Кров на люїс сумарні атіфа. Сифіліс. Імуноферментний аналіз виявлення сумарних антитіл класу M і G до збудника сифілісу. Головними перевагами методу ІФА є

16.02.2022

Імуноферментний аналіз крові є найпоширенішим методом виявлення різних патологій. Результат аналізу крові, розшифрування ІФА якого було інтерпретовано лікарем лабораторної діагностики, є достовірним у більшості випадків.

Що таке ІФА

ІФА – сучасний діагностичний метод, який застосовується для діагностики інфекцій, гормональних та імунних порушень, онкологічних захворювань у лабораторних умовах. Метод дозволяє виявити антитіла до інфекції на ранніх термінах захворювання.Даний метод відноситься до непрямих діагностичних методів, оскільки він виявляє імунну відповідь організму. Серед переваг ІФА порівняно з іншими методами діагностики можна виділити високий рівень технологічності, що зменшує ймовірність помилок. Метод є високочутливим та застосовується для діагностики захворювань як у дітей, так і у дорослих. Існує велика кількість різних модифікацій ІФА.

Метод ІФА ґрунтується на специфічності імунохімічних реакцій, а також фізико-хімічних закономірностях реакцій комплексів антиген-антитіло. Реакції проводяться за участю специфічних ферментів, які є мітками визначення антитіл. Внаслідок імунохімічної реакції суворо певні антитіла зв'язуються з відповідними антигенами. Дослідження крові методом імуноферментного аналізу майже виключає можливість отримання хибнопозитивного результату. Про позитивний чи негативний результат фахівці лабораторної діагностики судять виходячи з того, чи відбулося фарбування розчину в ході ферментативної індикації комплексу антиген-антитіло. Якщо розчин забарвився, то відбулася взаємодія антигену з антитілом, результат ІФА позитивний.

Які захворювання можна виявити методом ІФА

Дослідження методом імуноферментного аналізу дозволяє:

виявити низку інфекційних захворювань;
діагностувати аутоімунні захворювання;
виявити наявність онкології;
визначити гормональні порушення;
зробити інші дослідження.

Аналіз крові методом ІФА дозволяє визначити наявність наступних інфекцій:

Метод застосовується виявлення антигенів збудників низки інфекцій, і навіть виявлення антитіл різних класів. Велику популярність метод ІФА отримав виявлення сифілісу, ВІЛ, вірусних гепатитів. Визначати наявність та рівень антитіл у сироватці крові з метою первинної діагностики ІПСШ не рекомендується. В даному випадку наявність антитіл у крові може бути лише ознакою того, що організм пацієнта контактував із збудником інфекції у минулому.

Діагностика різних аутоімунних захворювань методом ІФА проводиться за допомогою дослідження:

антинуклеарних тіл;
антитіл до двоспіральної ДНК;
антитіл до розчинних нуклеарних антигенів (ENA скрін);
антикардіоліпінових антитіл;
IgG до цитрулінового пептиду;
ревматоїдного фактора;
С-реактивного білка;
аутоантитіл до цитоплазматичних антигенів нейтрофілів (ANCA скрін).

Специфічні імунні комплекси характерні для певних аутоімунних захворювань. Наприклад, антитіла двоспіральної ДНК є характерними для такого захворювання, як системний червоний вовчак.

Визначення онкологічних захворювань провадиться при імуноферментному дослідженні сироватки крові на специфічні онкомаркери, такі як ПСА, СА-125.

ПСА свідчить про наявність аденоми простати та раку простати. СА-125 – це онкомаркер злоякісної пухлини яєчника. Значення підвищується при ракових пухлинах матки, молочних залоз, ендометрію.

Підготовка до аналізу

Щоб забезпечити максимальну точність результатів, потрібно дотримуватись певних правил підготовки до дослідження. Аналіз для лабораторної діагностики методом ІФА, як правило, здається вранці з ліктьової вени. Здавати кров необхідно строго натще. Крім цього простого розпорядження, слід виконувати такі рекомендації щодо підготовки:

за 24 години до дослідження необхідно виключити прийом алкоголю та куріння;
уникати важких фізичних навантажень;
перебувати у спокійному стані;
уникати нервової напруги;
здавати кров на ІФА не раніше, ніж через 10 днів після відміни ліків;
попередити лікаря про прийом необхідних ліків.

Крім того, за кілька днів до здачі аналізу рекомендується дотримуватись дієти. При цьому з раціону виключити жирні продукти, смажену їжу. Перед аналізом на вірусні гепатити з раціону виключити не лише жирне та смажене, а й цитрусові, а також помаранчеві овочі.

Слід зазначити, що результати певного спектра гормональних досліджень впливає такий чинник, як фаза менструального циклу. Необхідність здавати аналіз у ту чи іншу фазу менструального циклу слід заздалегідь обговорити з лікарем. А якщо ні, то можна отримати несподівані показники. Так, наприклад, нормальний рівень лютеїнізуючого статевого гормону у жінок варіюється в залежності від дня циклу:

1-12 день - 2-14 мед/л;
12-14 день - 24-150 мед/л;
з 15 дня до початку нового циклу - 2-17 мед/л.

Розшифровка результатів ІФА

Аналіз дозволяє встановити наявність в організмі антитіл різних класів. Існують антитіла 3 класів:

Вироблення цих антитіл відбувається на різних стадіях захворювання. Найпершими після зараження в організмі починають вироблятися антитіла IgM. Їх наявність є показником хвороби у будь-якому випадку. В організмі здорової людини цей клас антитіл відсутній.

Ці імуноглобуліни присутні у сироватці крові близько 5-6 тижнів.

Імуноглобуліни класу G, присутні в крові, говорять про те, що людина або вже перенесла захворювання, або є носієм інфекції. Ці антитіла починають вироблятися після антитіл класу М при більшості захворювань на 3-4 тиждень після зараження. Їхня присутність в організмі можлива протягом декількох років. А при деяких хворобах (наприклад, сифіліс) IgG присутні в крові довічно.

Якщо в організмі присутні IgA, необхідно якнайінтенсивніше боротися з інфекцією. Антитіла цього з'являються лише у разі хронічного інфекційного захворювання. Зникнення IgA свідчить про знищення інфекції.

Якщо аналіз ІФА проводиться у дитячому віці до 1,5 років, має враховуватися така особливість: кров дитини містить IgG матері до різних інфекцій. Це зовсім не означає, що дитина хвора. У такому разі це скоріше норма. Наявність IgM є свідченням внутрішньоутробної інфекції чи інфекції, придбаної після народження. IgM матері не можуть проникнути в організм дитини через плаценту.

У таблиці подано можливі комбінації наявності чи відсутності в організмі антитіл 3 класів та їх інтерпретації.

При розшифровці аналізів (+) свідчить про позитивний результат, а (-) говорить про зворотний, тобто негативний. Результат, що показує наявність чи відсутність будь-якої речовини в організмі, називається якісним. Він може бути доповнений кількісним. Кількісний результат відображає кількісне вміст різних речовин в організмі.

Варто зазначити, що тест-системи мають власні, визначені виробником референтні значення, які характеризують показники. Перевищення референтних значень зазвичай означають наявність тих чи інших патологій в організмі досліджуваного.

Після отримання результатів ІФА розшифровку отриманих значень повинен проводити лікар. Тільки він зможе зробити правильну оцінку отриманих результатів та визначити стадію захворювання.

Вконтакте

ІФА – імуноферментний аналіз – є одним із найпрогресивніших методів діагностики сифілісу. Він виявляє ознаки присутності збудника захворювання на різних стадіях останнього. В основі аналізу лежить виявлення специфічних антитіл, які з'являються в крові хворого під час впровадження в організм блідої трепонеми (бактеріального збудника).

Метод ІФА працює не тільки для групи захворювань, що передаються статевим шляхом. У рівній мірі він застосовний і для діагностики різних хвороб інфекційного характеру. Принцип проведення аналізу було розроблено ще у 60-х роках минулого сторіччя. Однак активно використовуватись він почав лише через 20 років.

Зараз ІФА застосовується для діагностики сифілісу, СНІДу, туберкульозу та багатьох інших хвороб. Для виявлення антитіл використовуються спеціально розроблені ферменти, які активно реагують на специфічні білки крові.

У яких випадках призначають ІФА?

Хворий може сам прийти в клініку для проведення аналізу, якщо у нього є підозрілі симптоми (характерні висипання на тілі, підвищена температура, біль у м'язах та ін.). Однак на певних стадіях недуга не виявляється настільки явно. Через кілька тижнів після інфікування симптоми зникають, і пацієнт може помилково вважати себе одужавшим. З цієї причини існує низка випадків, коли аналіз ІФА проводиться в обов'язковому порядку:

При влаштуванні на роботу на підприємства, де є контакт із великою кількістю людей, продуктами харчування, дитячими та медичними товарами.
При постановці на облік вагітної. Хвороба передається від хворої матері немовляті, тож важливо її вчасно виявити.
При донорстві крові. Перед тим, як здавати кров, донор повинен перевірити її на наявність небезпечних інфекцій, у тому числі й сифілісу.
Під час підготовки до операції. Проведення такого роду втручань має на увазі прямий контакт із кров'ю хворого. Це може бути небезпечним для медперсоналу та інших пацієнтів клініки.
При виявленні симптомів у одного із статевих партнерів. І тут другий партнер також має здати кров на пробу.
Під час проходження військової служби, а також у разі ув'язнення. Обидві ситуації передбачають тривалий контакт із великою кількістю людей. Оскільки недуга передається як статевим, а й контактно-побутовим шляхом, будь-яка людина з оточення інфікованого перебуває під загрозою.

Як проводиться?

Головна особливість ІФА – висока точність даних. Дозволяє не просто виявити антитіла, а й визначити їхнє кількісне співвідношення.

Це означає, що імуноферментний аналіз дозволяє з 99,99%-ною ймовірністю виявити хворобу і одночасно визначити, на якій стадії розвитку хвороба зараз перебуває.

Під час проведення ІФА у пацієнта беруть кров із вени. Потім її особливим чином готують і розміщують на полістирольні панелі з безліччю лунок. При діагностиці сироватку крові додають спеціальні ферменти, які за наявності антитіл/антигенів недуги утворюють з ними міцні сполуки.

Результатом утворення таких сполук стає зміна кольору плазми крові в лунці (з безбарвного – на яскраво-жовтий). Працівнику лабораторії достатньо візуально оцінити результат, щоб зрозуміти, що на панелі – кров хворого.

Трактування результатів

При ІФА на сифіліс оцінюють наявність 3 класів антитіл (імуноглобулінів): A, M та G. Ці речовини утворюються в крові інфікованої людини у строго визначеній послідовності:

Наявність імуноглобуліну A вказує на те, що з моменту зараження блідою трепонемою пройшло більше місяця.
Антитіла M виявляються за тривалої присутності інфекції в організмі. Також можуть бути реакцією на загострення хронічної хвороби.
Імуноглобулін G організм виробляє на самому піку захворювання, а також після вже проведеного лікування.

Інтенсивність фарбування плазми в яскраво-жовтий колір при проведенні ІФА безпосередньо вказує на кількість антитіл. Якщо колір плазми трохи жовтуватий, результати ставлять під сумнів і процедуру повторюють. При негативному результаті колір плазми не змінюється та залишається прозорим.

Неправдивий результат ІФА

Протягом усього життя людині досить часто доводиться робити ІФА на сифіліс (перед влаштуванням на роботу тощо). Позитивний результат завжди стає стресом. Однак не варто панікувати завчасно! Іноді ІФА може дати хибно-позитивний результат. І тут є сенс провести повторне обстеження.

Фахівці не радять турбуватися після першого ж позитивного результату ІФА, оскільки це дослідження спрямоване на виявлення не найблідішої трепонеми, а антитіл, які організм виробляє у відповідь на атаку патогенних бактерій. ІФА – аналіз з високою точністю (ймовірність похибки менше 1%). За наявності сумнівів, лікарі не ставлять діагноз відразу ж, а пропонують пацієнтові здати кров ще раз.

Неправдива відповідь ІФА можлива при хворобах:

сполучної тканини, суглобів (васкуліт, ревматоїдний артрит та ін.);
серця (переважно це стосується запальних захворювань: міокардиту, ендокардиту);
ендокринної системи (діабет);
інфекційних (гепатит, туберкульоз та ін.).

Несправжній позитивний результат може бути при вагітності або в тому випадку, якщо незадовго до ІФА пацієнту було проведено вакцинацію. Змінити підсумки аналізу не на краще здатне і вживання алкоголю, наркотиків.

У досить велику кількість випадків позитивну реакцію дає перевірка крові пацієнтів, які вже пройшли лікування. У 10% вилікуваних позитивна реакція залишається на все життя, оскільки в крові постійно циркулює певну кількість антитіл як імунну відповідь на захворювання, що виникло одного разу.

Хибнонегативний результат

Поряд з хибнопозитивним можлива і хибнонегативна реакція. На самому початку хвороби, коли трепонема лише потрапила до організму, антитіла виробляються у недостатньому виявлення кількості. Ферменти можуть не зафіксувати, тому результати ІФА виявляються негативними.

За наявності підозр на сифіліс (пацієнт мав незахищений статевий акт, тим чи іншим чином контактував із можливими хворими тощо) проводиться повторний аналіз.

Обстеження контактних осіб

Існує певний протокол дій на той випадок, якщо у пацієнта зі 100% достовірністю було виявлено недугу. Насамперед обстеження проходить його статевий партнер: чоловік, дружина, інші особи, які вступали із зараженим в інтимний зв'язок. У цьому плані медики категоричні. Обстеження сексуальних партнерів є обов'язковим, щоб уникнути поширення небезпечного захворювання.

Лікування проходять усі члени сім'ї хворого, навіть якщо їх аналізи показали негативний результат. Пам'ятаємо: сифіліс – гострозаразна хвороба, що передається контактно-побутовим шляхом. Діти та інші члени сім'ї можуть отримати трепонему під час користування санвузлом, загальними рушниками, посудом.

Дії після підтвердження діагнозу

Як тільки дані ІФА на сифіліс підтвердилися, інфікований і особи, що з ним контактували, проходять терапію антибіотиками. Усі рекомендації лікаря – дозування, періодичність прийому ліків – необхідно дотримуватися точно!

На час лікування працюючим громадянам видається довідка із зашифрованим згідно МКХ-10 діагнозом. Після повного одужання медична книжка продовжується. Одужаючий працівник може приступати до своїх безпосередніх обов'язків. Роботодавець немає права відмовити йому у відновленні робочому місці.

Такими є основні дані щодо проведення ІФА. Тим, хто заразився, потрібно пам'ятати: постановка діагнозу не ставить хрест на всьому наступному житті хворого. Наразі існують ефективні препарати, що дозволяють надійно виліковувати це захворювання. Вчасно проведені обстеження та лікування дозволяють уникнути найнебезпечніших наслідків недуги та захистити від неї інших членів суспільства.

Для комплексної оцінки стану організму застосовується ІФА-метод проведення діагностики. Імуноферментний аналіз крові призначений для діагностування інфекційних, гематологічних, первинних та вторинних імунодефіцитів.

Що таке аналіз ІФА

Багато пацієнтів цікавляться методом ІФА: що це, навіщо проводиться дослідження. Імуноферментний аналіз почав використовуватися порівняно недавно. Спочатку з його допомогою вивчалися антигенні структури, і він проводився лише з науковою метою. Потім вчені дійшли висновку, що за допомогою ферментів можна виявити специфічні антитіла, що виникають у відповідь на захворювання.

Спочатку ця методика застосовувалася лише вузькопрофільними медичними установами, переважно на станціях переливання крові. Особливе значення має метод ІФА виявлення ВІЛ-інфекції.

На сьогоднішній день цей метод має широку сферу застосування. Сучасні лабораторії використовують його для діагностування:

пухлин;
гормональних порушень;
інфекцій;
хронічних чи перенесених раніше інфекційних процесів;
гельмінтів.

Якщо в організмі протікає інфекційний процес, цей вид діагностики вважається найбільш оптимальним для визначення типу захворювання.

Суть методу та його види

Метод ІФА – що це, яка суть цього виду дослідження? Це та багато інших питань цікавлять пацієнтів. Основою цього способу діагностики є зв'язування імунних клітин організму з антигенами збудників інфекції. Вийшов комплекс визначають за допомогою спеціального ферменту.

Щоб зрозуміти принцип методу ІФА, потрібно знати, як проходить реакція антиген-антитіло. Антиген – чужорідна для організму молекула білкового походження, яка проникає разом із інфекцією. Частинки чужої крові, які не збігаються за групою, також вважаються антигенами. В організмі вони стимулюють імунну реакцію, спрямовану на захист від чужорідних речовин. Тому тіло людини виробляє антитіла – імуноглобуліни, здатні приєднуватися до антигенів, утворюючи імунний комплекс. Такі сполуки набагато легше розпізнаються та знищуються клітинами імунітету.

Реакцію на наявність таких імунних комплексів проводять у лабораторних умовах, застосовуючи вже готові сполуки, щоб визначити, чи є у крові подібні до них.

Суть методу ІФА досить проста, однак через те, що аналіз крові проводиться для виявлення багатьох інфекцій та хвороб, існує кілька його різновидів. Кожен відрізняється схемою проведення та сферою застосування. Може бути прямою чи непрямою ІФА. Прямий метод має на увазі під собою те, що застосовуються знерухомлені антитіла, що реагують з антигенами. Основним плюсом такого методу і те, що це процеси можна автоматизувати, отже, діагностика займає трохи часу.

Непрямий метод передбачає, що використовуються антитіла вторинного характеру. А на твердій фазі знерухомлюється антиген. Аналіз дозволяє визначити антитіла до різних антигенів. Це допомагає досягти точнішого результату, проте метод відрізняється складністю.

Переваги дослідження

Методом ІФА мають багато переваг у порівнянні з іншими способами діагностики. До основних можна віднести такі:

висока чутливість;
стабільність при зберіганні інгредієнтів;
швидкість проведення діагностики;
можна використовувати невелику кількість досліджуваного матеріалу;
є можливість автоматизації всіх процесів;
можна виявити інфекцію на ранніх стадіях.

Цей метод діагностики є універсальним, тому підходить для проведення масового обстеження. За допомогою аналізу можна простежити динаміку перебігу інфекційного процесу.

Показання для аналізу та забору матеріалу

Проведення дослідження за допомогою методу ІФА можуть призначити за підозри на безліч хвороб:

На наявність антитіл досліджується венозна кров. Перед проведенням аналізу із неї виділяють елементи, які можуть ускладнювати дослідження. Може проводитися паркан та інших біологічних рідин.

Щоб отримати найточнішу інформацію, забір крові проводиться на голодний шлунок. Якщо процедура була призначена для визначення прихованої інфекції, то за кілька тижнів до проведення аналізу слід припинити приймати антибактеріальні та противірусні препарати. Залежно від оснащеності лабораторії, де проводився забір матеріалу, результат можна отримати протягом доби. В екстрених випадках цей час скорочується до кількох годин.

Аналіз на сифіліс

Використання методу ІФА допомагає визначити наявність багатьох інфекцій в організмі, зокрема й сифілісу. Для проведення дослідження береться кров із вени натще. Потім здійснюється дослідження, що допомагає визначити як наявність хвороби в організмі, а й точні терміни її початку, оскільки протягом хвороби одні антитіла замінюються іншими у певному порядку.

При гострій фазі, що свідчить про тривалий перебіг хвороби, або при загостренні хронічної інфекції в крові, будуть виявлені імуноглобуліни типу M. Наявність імуноглобулінів типу A свідчить про те, що інфекція мешкає в організмі більше 4 тижнів. Імуноглобуліни групи G говорять про розпал хвороби або про раніше проведену терапію.

За ступенем забарвлення лунок оцінюють інтенсивність протікання інфекційного процесу, оскільки його насиченість залежить від кількості імунних комплексів, що утворилися.

Аналіз на ВІЛ-інфекцію

ІФА-метод застосовується і для проведення аналізу на такому випадку має певні особливості, які пов'язані з перебігом та прогресуванням хвороби. Цей метод дослідження вважається найбільш прийнятним для визначення, проте проводити його потрібно не раніше, ніж через місяць після впливу факторів ризику. Це пов'язано з наявністю інкубаційного періоду, що протікає від 45 днів до 6 місяців. Саме тому аналіз потрібно повторити за півроку.

аскаридоз;
лямбліоз;
токсоплазмоз та ін.

Незважаючи на всі переваги, є також недоліки методу ІФА. Основним недоліком вважається те, що при проведенні дослідження лікар повинен заздалегідь мати припущення щодо захворювання.

При немає можливості випадково знайти збудника та визначити його імуноферментні властивості. Тест лише вказує на наявність антитіл у крові хворого. Крім того, це досить дорогий аналіз.

Розшифровка аналізу

Результатом якісного ІФА буде наявність антитіл, або їх відсутність у крові. Якщо проводиться кількісний аналіз, то концентрація антитіл може виражатися або в цифровому значенні, або певною кількістю знаків +.

Крім того, аналізуються такі показники, як:

Показник IgM вказує на перебіг гострого інфекційного процесу в організмі. Повна його відсутність може говорити про відсутність збудника хвороби або перехід її в хронічну стадію.

Показник IgA при негативному результаті тесту на IgM говорить про хронічну або приховану інфекцію. Одночасна присутність IgM та IgA свідчить про те, що хвороба перебуває у гострій стадії. Наявність IgG говорить про перехід хвороби в хронічну стадію або про повне одужання та вироблення імунітету.

Наразі існують спеціальні тести ІФА, які можна провести самостійно.

Перелік доступних методик діагностики в останні десятиліття швидко розширюється, діагности намагаються в нових методах поєднати переваги всіх колишніх аналізів, позбавившись усіх їхніх колишніх недоліків.

Останнім часом все частіше в переліку діагностичних процедур фігурує імуноферментний аналіз - сучасний і досить новий тест, про який мало відомо звичайній людині, яка не пов'язана з медициною. Тим не менш, ця методика стрімко поповнює ряди своїх прихильників серед кваліфікованого медперсоналу. Що вона є і в яких випадках її слід використовувати, можна спробувати розібратися, ознайомившись з її особливостями та головними характеристиками.

Імуноферментне дослідження - інструментально-лабораторна методика, побудована на молекулярній реакції антиген-антитіло, що дозволяє виявляти специфічні білки в біологічних матеріалах (зразках для дослідження). Такими білками можуть бути ензими, різноманітні мікроорганізми (віруси, бактерії, грибки), найпростіші тощо.

Після відкриття методу йому було дано назву ELISA-тест, що не має відношення до імені першовідкривачів, а є абревіатурою повної назви в англійському варіанті – enzyme-linked immunosorbent assay. Медики всього світу використовують цю назву, деякі лікарі у російськомовних країнах теж так називають цей тип дослідження.

Основний принцип методу полягає у молекулярній реакції «антиген-антитіло».

Антигеном є будь-яка чужа молекула, яка потрапила до людського організму у складі мікроба-збудника хвороби. Антигени є, як правило, білковими молекулами. Крім мікроорганізмів таким «чужинцем» можуть бути клітини чужої крові, які не збігаються за групою або резус-фактором.

У відповідь на попадання такого антигену в організмі запускається імунна реакція, спрямована на захист від будь-яких чужих молекул. Це відбувається за рахунок синтезу спеціальних агентів імунної системи – антитіл (імуноглобулінів). Кожне антитіло підходить тільки до певного антигену і нейтралізує патогенного «чужинця», зв'язуючись з ним у єдиний комплекс. Саме процес такого зв'язування називають реакцією «антиген-антитіло».

Види антитіл

Усі антитіла (імуноглобуліни) діляться на 5 видів залежно від того, на якому етапі імунної відповіді вони з'являються:

Для ІФА-діагностики найчастіше важливі рівні імуноглобулінів IgG, IgM та IgA. За їхніми титрами можна дізнатися, чи перехворіла людина на хворобу раніше або заразився в недавньому часі, чи виробився в неї імунітет чи його організм беззахисний перед патологією.

Переваги та недоліки імуноферментного аналізу

На даний момент ІФА - один із найточніших і найчутливіших методів. Він взятий на озброєння фахівцями у різних галузях медицини та продовжує розширювати сфери застосування.

Переваги методу

Висока точність даних.
Чутливість (дозволяє виявити необхідну речовину навіть за мінімальної присутності збудника у зразку).
Можливість діагностики у перші дні хвороби чи в інкубаційному періоді.
Швидкість отримання даних у порівнянні з іншими методиками такої точності.
Висока автоматизація процесу та мінімальна участь людини, що знижує похибку виконавця.
Отримання даних про стадії патологічного процесу та ефективність обраної терапії.
Безболісність та мала інвазивність при відборі матеріалу.

Недоліки методу

Найчастіше дозволяє визначати відповідь організму на патогенний агент, а чи не самого збудника.
Перед дослідженням має бути точно відоме передбачуване захворювання, оскільки тест високоспецифічний.
Імовірність хибних показників, викликаних технічними моментами, прийомом лікарських засобів, одночасною присутністю кількох хронічних захворювань або порушення обмінних процесів в організмі хворого.
Інтерпретацію результатів повинен робити лише висококваліфікований фахівець, оскільки для трактування отриманих даних необхідно мати спеціальну підготовку та великий запас медичних знань у певній галузі.
ІФА – досить рідкісний аналіз, тому виконують його далеко не у всіх діагностичних лабораторіях.
Метод досить дорогий, оскільки окрім реактивів у лабораторії має бути дороге чисельне обладнання та зразки антигенів, що виготовляються у спеціальних інститутах.

У яких випадках використовують імуноферментний аналіз

Повний перелік показань до призначення імуноферментного дослідження дуже широкий, він включає практично всі галузі медицини.

Найчастіше ІФА застосовують для таких цілей:

виявлення інфекційних захворювань;
діагностика венеричних хвороб;
визначення імунного статусу чи окремих аутоімунних захворювань;
ідентифікація онкомаркерів;
визначення гормонів.

У разі інфекційних та вірусних захворювань методика дозволяє виявити такі патології:

Крім того, ІФА дозволяє швидко та ефективно визначити інфарктний стан, оцінити репродуктивний потенціал організму, виявити алергію, її джерело та ін.

Імуноферментна методика використовується для проведення клінічних досліджень у ході розробки нових лікарських препаратів та оцінки їх впливу на організм людини.

Типи зразків та методи їх відбору для дослідження

Найчастіше досліджуваним матеріалом для імуноферментного аналізу є кров, яку беруть із ліктьової вени пацієнта. Відбір проби проводиться натщесерце, переважно в ранковий час. Після відбору з крові відокремлюють та видаляють ті форменні клітини, які заважають проведенню дослідження, залишаючи тільки сироватку.

При діагностуванні сечостатевих інфекцій часто матеріалом стають мазки зі слизових тканин статевих органів, слиз з уретри або шийки матки, зразки з прямої кишки, зіскрібки з ерозій або виразок в області паху та інших ділянок тіла. Мазки можуть брати і з порожнини рота, а також з носоглотки.

Іноді імуноферментне обстеження використовується в акушерській та гінекологічній практиці під час вагітності для визначення стану навколоплідних вод. У такому разі зразком стає амніотична рідина. Для цього відбирають невелику кількість рідини, проколивши плодовий міхур довгою голкою. Усі маніпуляції проводять стерильним інструментом, щоб мінімізувати ризики.

Нерідко матеріалом стає спинномозкова чи серозна рідина. Це відбувається за місцевої анестезії, яка вводиться ін'єкційно.

Уточнити, який тип матеріалів необхідний для імуноферментного аналізу, повинен спеціаліст, який спрямовує на дослідження. Часто беруться зразки відразу кількох типів чи з різних місць. Про підготовку до здачі біоматеріалу пацієнту теж має розповісти лікар, який видає направлення на цей тип обстеження.

Підготовка до імуноферментного аналізу

Для збільшення точності даних, отриманих після імуноферментного обстеження, підготовка до відбору матеріалу має бути такою:

за 10 діб до дослідження виключити антибіотики, противірусні та антимікотичні препарати;
за добу необхідно виключити спиртне, куріння та прийом наркотичних речовин;
у цей період необхідно уникати фізичного перенапруження;
попередити спеціаліста, який виписує призначення, про всі ліки, які пацієнт приймає;
оповістити лікаря у разі вагітності чи підозри на вагітність.

Найкраще, якщо матеріали для тестування будуть відібрані вранці натще.

Якщо діагностика ставить за мету визначити стан гормонального фону, то важливо забезпечити собі спокійний стан напередодні та уникати нервової напруги. Для жінок здавання крові на гормони чітко визначається періодом місячного циклу, про що буде сказано лікарем у момент призначення.

За 2-3 дні до відбору матеріалу потрібно виключити з меню смажене та жирне, а перед аналізом на гепатит не є цитрусові та будь-які інші фрукти та овочі оранжевого та жовтого кольору.

Розшифрування результатів імуноферментного аналізу

Результат якісного дослідження, як правило, позначається знаками "+" (виявлено) або "-" (не виявлено).

За наявністю чи відсутністю певних груп імуноглобулінів можна робити такі висновки:

JgM(-), JgG(-), JgA(-) - імунітет до захворювання повністю відсутня (з таким типом антигену організм раніше не стикався);
JgM(-), JgG(+), JgA(-) - раніше було зіткнення з даним антигеном або з вакциною;
JgM(+), JgG(-/+), JgA(-/+) - гострий патологічний процес (швидше за все первинний);
JgM(-), JgG(+/-), JgA(+/-) - процес хронічної течії;
JgM(+), JgG(+), JgA(+) - рецидив;
JgM (-) – стадія одужання.

Кількісні значення мають велике інформаційне навантаження, але трактувати їх здатний тільки лікар, виходячи з попередніх показань, віку пацієнта, норм для кожного конкретного захворювання. Саме з цієї причини оцінювати результати самостійно не можна.

Скільки необхідно чекати на результати

Дана методика має багато різновидів, залежно від яких визначається термін отримання даних на руки. Середня тривалість ІФА-діагностики становить 4-6 годин, що дозволяє видати результати вже наступного дня.

Найтриваліші методики займають до 10 днів, наприклад, у разі виявлення ВІЛ-інфекції.

При гострій необхідності можливе застосування експрес-методик, у яких відповідь отримують вже через 1-2 години.

Де можна пройти ІФА тестування

Оскільки обладнання для проведення такого типу діагностики є досить дорогим, то придбати його можуть не всі лабораторії. Крім того, тести, що містять специфічні антигени, мають обмежений термін придатності (зазвичай близько 1 року), тому потребують постійного оновлення.

З цих причин у державних медичних закладах ІФА-лабораторії є далеко не завжди. Найчастіше необхідно звертатися до великих приватних медичних чи великих діагностичних центрів.

Для проведення ІФА-дослідження лабораторія повинна мати спеціальну ліцензію, а персонал та лаборанти мають пройти спеціальне навчання.

Найчастіше конкретний діагностичний центр чи лабораторію рекомендує лікар, який спрямовує пацієнта на обстеження.

Вартість імуноферментного дослідження

Ціна на це дослідження залежить від регіону країни та від рівня клініки, що надає послугу. У Москві мінімальна ціна визначення одного антигену стартує від 700 крб. Якщо необхідно виявити відразу кілька імуноглобулінів, то ціна сумуватиметься.

У разі термінового аналізу ціна зростає на 150-200 руб. за кожний антиген.

Незважаючи на досить високу вартість, імуноферментний аналіз дозволяє зробити обстеження пацієнта максимально інформативним та швидким, що скорочує час до початку лікування та дозволяє швидше стабілізувати стан людини.

На цьому відео представлений фільм "Основи імуноферментного аналізу".

З прогресом сучасної медицини вдається проводити більш поглиблену діагностику за підозри на ті чи інші патології у пацієнта. Одним із інформативних методів лабораторного дослідження став ІФА аналіз, який проводять методом забору венозної крові. Тобто для пацієнта нічого не змінюється. А ось лаборант-аналізатор ІФА проводить складну техніку дослідження забраного біоматеріалу. У тому, що таке аналізи ІФА і які тонкощі застосування ІФА методу як діагностичного, розбираємося в матеріалі нижче.

Що таке імуноферментний аналіз?

Вироблення антитіл провокують самі антигени, що проникли в організм людини. При вступі в «битву» за здоров'я організму антитіла як би позначають антигени, що при дослідженні крові і бачить лаборант. Тобто у забраному біоматеріалі можна відстежити не тільки наявність інфекції, а й її сліди вже після того, як організм одужав.

Таким чином, призначаючи імуноферментний аналіз крові пацієнту, лікар може відстежити давність інфекції, ступінь її прогресування або виявити наявність імунітету до тієї чи іншої інфекції.

Процес ІФА діагностики виглядає таким чином:

Забрана венозна кров наводиться в лабораторії стан сироватки крові;
Потім лаборант використовує спеціальний лоток з осередками, у кожному з яких є всі необхідні антигени. Досить просто капнути в кожен осередок сироватку крові та відстежити реакцію імуноглобулінів (антитіл) на антигени. Про наявність «потрібної» реакції свідчить зміна кольору матеріалу, що досліджується. Надалі лаборант вивчає оптичну густину досліджуваного середовища.

Аскаридоз та ентеробіоз (аскариди та гострики);
Трихінельоз;
Описторгосп в гострій та хронічній формах;
Лямбліоз;
Амебіоз;
Токсоплазмоз;
Лейшманіоз у будь-якій формі.

Важливо: імуноферментний аналіз буває як якісним, і кількісним. У першому випадку лаборант лише підтверджує чи спростовує наявність шуканої речовини у крові. У другий випадок у результаті аналізу вказують його концентрацію в організмі пацієнта.

Недоліки методу

При всіх перевагах такого способу діагностики варто розуміти, що імуноферментний аналіз крові - не спосіб знаходження причини хвороби пацієнта, а лише метод підтвердження передбачуваного лікарем діагнозу. А з огляду на те, що дослідження є досить недешевим, використовувати його потрібно з розумом. При цьому результати дослідження має трактувати лише кваліфікований спеціаліст.

Розшифровка результатів

Після того як ми розібрали абревіатуру ІФА і що це таке ─ з'ясували, чи варто перейти до трактування результатів. Тут важливо розуміти, що й аналіз проводили якісний, то результат буде лише позитивним чи негативним. Тобто діагностика чи підтверджує підозри лікаря щодо певного діагнозу, чи спростовує їх. У цьому випадку в бланку стоятимуть символи "+" або "-" відповідно.

Важливо: негативний результат аналізу який завжди свідчить про відсутність інфекції. Справа в тому, що антитіла до антигенів можуть формуватися протягом 14 днів після інфікування і цілком ймовірно, що вони ще не сформовані.

Якщо ж проводиться кількісний аналіз, тут визначається вид антитіл, їх кількість і стадія активності. Зокрема, при такій діагностиці визначають антитіла (імуноглобуліни) IgG та IgM, які формуються в різні періоди прогресування інфекції. Найпоширенішими варіантами результатів у цьому випадку є:

Підвищений IgМ та повна відсутність IgG. Така картина свідчить про недавнє інфікування та гостру фазу перебігу патології.
Підвищена активність імуноглобулінів обох видів (IgМ та IgG). Говорить про давнє та хронічне перебіг інфекційного процесу.
Активність IgG та повна відсутність IgМ. Інфікування було не менш як півроку тому і зараз вірус перебуває в затяжній хронічній стадії.
Відсутність антитіл IgG та IgA. Результат не визначено.
Відсутність антитіл IgM, IgA та IgG. Свідчить про відсутність імунітету до певної інфекції.
Активність антитіл IgG, IgM та IgA говорить про загострення хронічного процесу.

Крім виявлення типів антитіл, лаборант у спеціальній графі бланка вказує і їх кількість на об'єм крові. Пам'ятайте, розібравшись у тому, що таке метод ІФА, не тлумачте результати самостійно. Отримані результати з точністю може інтерпретувати тільки лікар, що залежить від передбачуваного діагнозу, що вибудовується на підставі клінічної картини у пацієнта.