Цей рід представлений лише одним видом бактерій – Е. coli, але поєднує безліч варіантів. Різновиди кишкової палички відрізняються за біологічними властивостями, у них можуть бути різні набори ферментів (біовари) та різна антигенна структура (серовари).
Кишкова паличка вперше виділена в 1888 р. Ешеріхом з випорожнень людини і названа на його ім'я.
Природним місцем проживання E. coli є кишечник людини. Кишкова паличка – представник нормальної мікрофлори кишечника.
У процесі життєдіяльності E. coli виробляє ферменти, які сприяють травленню (наприклад, що розщеплюють клітковину), синтезує деякі вітаміни (наприклад, вітаміни групи В). Крім того, ці бактерії мають антагоністичну дію щодо патогенних мікроорганізмів, таких як збудники Дизентерії, черевного тифу, токсикоінфекцій. Відсутність кишкової палички у товстому кишечнику веде до тяжкого захворювання – дисбактеріозу. При цьому порушується нормальний склад мікрофлори кишечника, розвиваються протей, кокова флора, гриби тощо.
При зниженні стійкості організму (голоданні, перевтомі тощо) ешерихії можуть проникнути в інші органи та тканини і стати причиною важких патологічних процесів. Таким чином, можна вважати, що ешерихії - типові умовно-патогенні мікроорганізми: у звичайних умовах вони є сапрофітами, а при зміні умов викликають захворювання.
Виділяючись із фекаліями, кишкова паличка потрапляє у зовнішнє середовище. Виявлення E. coli у ґрунті, воді та інших об'єктах свідчить про їх фекальному забруднення, а визначення кількості E. coli (колі-титр, коли-індекс) характеризує санітарний стан об'єкта (див. "Санітарна мікробіологія").
Морфологія. E. coli – короткі, в середньому 0,5-3,0×0,5-0,8 мкм палички. Грамнегативні. Найчастіше вони рухливі, перитрихи. Однак деякі варіанти кишкової палички є нерухомими. Багато штами утворюють капсулу. Суперечка не утворюють.
Культивування. Кишкова паличка – факультативний анаероб. Добре росте на простих поживних середовищах при 37 ° С та рН середовища 7,2-7,8. Штами E. coli, виділені з кишечника людини та тварин, розвиваються і при 43-45 ° С, а кишкові палички холоднокровних за цих умов не розмножуються. Цю відмінність у властивостях E. coli різного походження використовують визначення санітарного стану об'єкта, оскільки лише виявлення E. coli теплокровних свідчить про санітарному неблагополуччя.
На МПА кишкова паличка утворює каламутні, злегка опуклі вологі колонії з рівним краєм. На МПБ дає рівномірне помутніння. Культури, що мають капсулу, зростають у вигляді слизових колоній.
Для ідентифікації ешерихій використовують диференціально-діагностичні середовища: Ендо та агар з еозинметиленовим синім (ЕМС). На середовищі Ендо кишкова паличка росте у вигляді малиново-червоних колоній із металевим блиском або без нього. На середовищі ЕМС у вигляді темно-фіолетових колоній.
Ферментативні властивості. E. coli мають значну ферментативну активність. Розщеплюють лактозу, глюкозу, маніт, мальтозу, сахарозу та інші вуглеводи та спирти з утворенням кислоти та газу. Лротеолітичні властивості: утворюють індол. Желатин не розщеплюють. Окремі біовари не ферментують лактозу та сахарозу (табл. 29).
Примітка, кг - утворення кислоти та газу; + Наявність ознаки; - Відсутність ознаки.
Токсигенність. Ешеріхій мають ендотоксин (ліггополісахарид).
Антигенна структура. Ешеріхій розрізняються за антигенною структурою мікробної клітини, що покладено основою класифікації бактерій цього. Розрізняють три типи антигенів ешерихій: О-антиген (соматичний), К-антиген (капсульний) та Н-антиген (джгутиковий). Термостабільний О-антиген є ліпополісахариднопротеїновим комплексом і розташований у клітинній стінці бактерій. О-антиген визначає приналежність культури до серологічної групи. Описано понад 170 таких груп. Деякі компоненти О-антигена є загальними для різних О-груп ешерихій, а іноді й інших ентеробактерій (шигел, сальмонел та ін.). К-антигени ешерихій різні: А, В, L та М. Антигени А та М – термостабільні, В та L – термолабільні. К-антиген розташований у мікробній клітині більш поверхово, ніж О-антиген, і тому в його присутності реакція аглютинації живої культури з О-сироваткою не відбувається. Для виявлення Про-антигена культуру прогрівають протягом години при 100° С: К-антиген при прогріванні руйнується, а Про-антиген стає здатним вступати у взаємодію із сироваткою. Встановлено, що ешерихії мають близько 100 типів К-антигенів, в основному типу В-антигенів (термолабільних). Н-антиген є тільки у рухомих штамів, так як він пов'язаний із джгутиками. У ешерихій відомо понад 50 типів Н-антигену. Визначення Н-антигена дозволяє встановити сероваріант виділеної культури (рис. 40).
Характеристику антигенного складу виділеної культури ешерихій дають на підставі результатів реакції аглютинації із сироватками, що містять О-, К- та Н-антитіла. У цьому визначають, які антигени є у культурі, які поєднання характеризує антигенну формулу виділеної культури, т. е. її сероваріант. У табл.30 представлені приклади антигенної структури деяких сероваріантів E. coli, у яких К-антигени є антигенами.
Якщо культура аглютинується ОК-сироваткою ОП1:К58 (В4) та Н-сироваткою "6", то означає виділений сероваріант E. coli О111:В4:Н6; якщо відзначено реакцію аглютинації з ОК-сироваткою О26:К60 (В6) та з Н-сироваткою "11" - виділено культуру E. coli 026:В6:Н11 і т.п.
Крім визначення сероваріанту E. coli, можна визначити і фаговар виділеної культури. Є набори бактеріофагів, які лізують ешерихії окремих серогруп. По лізису культури однією з фагів встановлюють її фаговар. Визначення фаговар має епідеміологічне значення.
Антагоністичну дію E. coli, їхню здатність пригнічувати зростання гнильних та патогенних бактерій використовують для створення бактерійних препаратів для лікування дисбактеріозу та різних захворювань кишечника (колібактерин, біфікол).
Стійкість до факторів довкілля. E. coli досить стійкі. При 55 ° С вони гинуть протягом години, при 60 ° С - за 15 хв. У ґрунті та воді зберігаються до 2-3 міс, у молоці не тільки зберігаються, а й розмножуються. Розчини речовин, що дезінфікують (3% хлорамін, розчин сулеми 1:1000 та ін) вбивають їх за 20-30 хв. Особливо чутливі E. coli до дії діамантового зеленого.
Сприйнятливість тварин. Ешерихії окремих серогруп патогенні для різних тварин і викликають у них захворювання шлунково-кишкового тракту. З лабораторних тварин найбільш чутливі до E. coli морські свинки, кролі, білі миші. Залежно від способу введення культура кишкової палички викликає різні патологічні процеси: запалення та абсцес при підшкірних ін'єкціях, перитоніт та сепсис – при внутрішньочеревному та внутрішньовенному введенні.
Джерела інфекції. Хвора людина. При цьому бактерії проникають в організм із зовнішнього середовища (екзогенна інфекція). Кишкова паличка може також спричинити розвиток патологічного процесу "зсередини" (ендогенна інфекція).
Шляхи передачі. Основний шлях передачі при екзогенній формі інфекції – контактно-побутовий (непрямий контакт). Збудники можуть бути перенесені на брудних руках через посуд, іграшки, білизну, їжу, мух.
Патогенез. Захворювання, що викликаються ешеріхіями, називають ешеріхіозами. Розвиток ешеріхіоз залежить від шляху впровадження збудника в організм і від серогрупи, до якої належить збудник. При проникненні бактерій через рот можуть виникнути кишкові захворювання дітей та дорослих. Деякі О-групи ешерихії (серовари) найчастіше є збудниками захворювань людини. Такі бактерії називають ентеропатогенними кишковими паличками (ЕПКП). В даний час відомо багато варіантів ЕПКП, що зумовлюють різний перебіг ешеріхіозів. Розрізняють кілька груп ЕКПК:
група I - збудники коліентериту у дітей раннього віку (сірогрупи О111, О26, О55, О86 та ін);
група II - збудники дизентеріоподібних захворювань у дітей та дорослих (О25, О124, О143, О144 та ін);
група III – збудники холероподібних захворювань (О1, О5, О6, О78 та ін.).
Потрапляючи в харчові продукти, кишкова паличка може розмножуватися. Вживання таких продуктів веде до розвитку харчової токсикоінфекції.
Розвиток ендогенної інфекції призводить до ураження різних органів: запалення жовчного міхура (холецистит), сечового міхура (цистит), зараження крові (сепсис) та ін.
Імунітет. Імунітет виробляється лише щодо одного сероваріанту ешерихії – збудника цього захворювання. Різноманітність ешерихії робить цей імунітет недієвим. У розвитку імунного стану при захворюванні дітей велике значення має утворення IgM-антитіл, які не проходять через плаценту, а отже, не передаються від матері. IgA-антитіла до ешеріхій передаються дитині від матері з грудним молоком.
Профілактика. Дотримання особистої гігієни та санітарно-гігієнічного режиму. Специфічної профілактики немає.
Лікування. Антибіотики: ампіцилін, тетрациклін та ін. В даний час випускають коліпротейний фаг, використання якого дає хороші результати.
Контрольні питання
1. Які основні ознаки бактерій сімейства кишкових?
2. Які антигени є в ешеріхії?
3. Які лікувальні препарати готують із кишкових паличок?
Мікробіологічне дослідження
Мета дослідження: виділення та ідентифікація ЕПКП.
Матеріал для дослідження
1. Випорожнення.
2. Блювотні маси.
При необхідності досліджує відокремлюване з носа і зіва, гній з вуха, кров, сечу, шматочки органів трупа.
У разі виникнення вогнища захворювань коли-энтеритом досліджують (за епідеміологічними показаннями) харчові продукти, змив з рук обслуговуючого персоналу, іграшок та інших предметів.
Примітка. Чим раніше від початку захворювання досліджують випорожнення, тим вірогідніше можливість виділення збудника.
Основний метод дослідження
Бактеріологічний
Хід дослідження
Другий день дослідження
Виймають з термостата засіяні напередодні чашки і переглядають їх у світлі, що падає або проходить. За наявності малиново-червоних колоній на середовищі Ендо (з металевим блиском або без нього) або фіолетових на середовищі ЕМС ставлять пробну реакцію аглютинації на склі для диференціації ЕПКП від інших різновидів ешерихій.
Для встановлення пробної реакції аглютинації відбирають не менше 10 ізольованих колоній, відзначаючи або нумеруючи їх на звороті чашки; частину кожної наміченої колонії знімають петлею та аглютинують у краплі полівалентної сироватки або імуноглобуліну. Випробовують тільки частину колонії, щоб у разі позитивної реакції аглютинації можна було з частини колонії, що залишилася, виділити чисту культуру.
Типові або полівалентні ешеріхіозні сироватки (або імуноглобуліни) виготовляють у виробничих умовах. Полівалентні ешеріхіозні ОК-сироватки (або ОК-імуноглобуліни) містять антитіла до кількох О-і К-антигенів ешерихій. З їхньою допомогою орієнтовно визначають приналежність виділеної культури до ЭПКП. Наприклад, полівалентна сироватка О26, О55, О111 дозволяє виявити однойменні культури ешерихії. Сироватки розводять відповідно до вказівки на етикетці.
У лабораторії можна приготувати суміш окремих ОК-сироваток, з'єднуючи не більше 5 сироваток, щоб розведення кожної було не вище 1:10.
Постановка пробної реакції аглютинації. На одне або два добре знежирені предметні стекла наносять 10 крапель полівалентної сироватки (або імуноглобуліну). У кожну краплю вносять частину наміченої колонії та розтирають її. Колонії, що дали реакцію аглютинації, відсівають у пробірки зі скошеним агаром і ставлять у термостат на 18-20 год. Якщо жодна з 10 колоній не дала реакції аглютинації, дають негативну відповідь.
Третій день дослідження
Виймають із термостату посіви та переглядають їх. На МПА ентеропатогенні кишкові палички утворюють зазвичай вологий, блискучий, сірий наліт, рідше він буває каламутним. Культуру, що виросла на скошеному агарі, перевіряють повторно в реакції аглютинації на склі з полівалентними ешеріхіозними сироватками (або імуноглобулінами). Якщо виділена культура дає реакцію аглютинації з полівалентною сироваткою (імуноглобуліном), її аглютинують з кожною типовою сироваткою (імуноглобуліном) окремо в розведенні 1:5 - 1:10. Аглютинація з живою культурою має орієнтовне значення.
Далі необхідно підтвердити належність виділеної культури до роду Ешеріхія біологічними тестами. Для цього виробляють посів культури на напіврідкі середовища Гісса з лактозою, глюкозою, манітом, сахарозою, мальтозою та іншими цукрами, а також на бульйон або пептонну воду для визначення утворення індолу та сірководню. Для цього в пробірки під пробку опускають два індикаторні папірці, змочені реактивами, що виявляють утворення цих речовин. Один папірець за наявності індолу червоніє, інший за наявності сірководню чорніє.
При ферментації Сахаров реакція середовища стає кислою і колір індикатора змінюється. Якщо, крім кислоти, утворюється газ, серед з'являються бульбашки. Одночасно визначають рухливість бактерій: роблять посів у напіврідкий (0,2%) агар уколом. Рухливі бактерії дають помутніння всього середовища, нерухомі - ростуть лише за уколом.
Для остаточної ідентифікації виділеної культури ставлять розгорнуту реакцію аглютинації з живою та грітою культурами: з живою - для визначення К-антигена, з гретою - для визначення О-антигена. Для постановки розгорнутої реакції аглютинації антиген готують наступним чином: 3-5 мл ізотонічного розчину хлориду натрію змивають культуру зі скошеного агару. Отриману суспензію розливають у дві пробірки. Одну з них прогрівають на водяній бані при 100° протягом години.
Розгорнуту реакцію аглютинації ставлять у двох рядах пробірок. Сироватку в обох рядах розводять у співвідношенні 1:50 - 1:100 (у 1 пробірці) до титру, вказаного на етикетці ампули з сироваткою. До першого ряду додають по 2 краплі живої культури, у другий - по 2 краплі гретої культури.
Пробірки струшують і поміщають термостат на 18-24 год.
Четвертий день дослідження
Проводять облік змін середовищ Гісса, реєструють утворення індолу та сірководню.
Більшість представників ешерихій ферментують вуглеводи з утворенням кислоти та газу, розщеплюють білковий поживний субстрат до утворення індолу.
Врахування пробіркової реакції аглютинації проводять за допомогою лупи або аглютиноскопа. Аглютинація з живою культурою великобавовняна, з убитою – дрібнозерниста. Реакцію вважають позитивною, якщо аглютинація з гретою культурою відзначається у розведенні сироватки не нижче половини титру сироватки, а жива культура аглютинується сироваткою, розведеною не менше ніж 1:200. Відіграє роль і співвідношення антитіл до гретої та живої культури. Розведення сироватки, в якому відзначається аглютинація з гретою культурою, повинне перевищувати розведення сироватки, в якому аглютинується жива культура, не менш ніж у 2 рази. У табл. 31 наведено різні варіанти результату реакції аглютинації.
Примітка. Можливі три варіанти реакції: 1) грета культура аглютинується сироваткою у більших розведеннях, ніж жива, реакція – позитивна; 2) жива та гріта культура дають аглютинацію в однакових розведеннях сироватки. Такий результат може свідчити про відсутність у культурі К-антигена; аглютинація живої та гретої культур викликана О-антигеном. У цих випадках необхідна повторна постановка реакції аглютинації; 3) аглютинація живої культури за відсутності аглютинації гретою дозволяє дати негативну відповідь. Вочевидь, у культурі немає О-антигена, відповідного O-антитілам у сироватці (рис. 41).
Контрольні питання
1. Який матеріал досліджують виділення ешерихій?
2. За допомогою яких сироваток можна диференціювати ЕПКП?
3. Для чого ставлять розгорнуту реакцію аглютинації з живою та грітою культурами ешерихій?
1. Отримайте у викладача чашки Петрі з засіяною на середовищі Ендо культурою і пересівши на пробірку зі скошеним агаром.
2. Візьміть у викладача культуру ЕПКП на скошеному агарі, змийте ізотонічним розчином хлориду натрію. Частину змиву прогрійте на водяній бані при 100 ° С. Розведіть сироватку в двох рядах пробірок і поставте реакцію аглютинації описаним вище способом.
Поживні середовища
Диференціальні середовища Ендо та ЕМС служать для вирощування кишкових бактерій. Випускаються як сухого порошку. Відповідно до вказівок на етикетці відважують певну кількість сухого середовища, розчиняють у відповідній кількості води, кип'ятять, помішуючи, і розливають у стерильні чашки Петрі.
У вашому приватному житті безвідносна порожнеча? Нема постійної дівчини? Вони спокусливі повії будуть всіляко сприятливі можливості задовольнити ваші статеві потреби гарненькими способами.
Курсова робота
Біологічна характеристика Escherichia coli
Вступ
Ешеріхіоз (escherichiosis) (колібактеріоз) - Протікає в гострій формі бактеріальна інфекційна хвороба молодняку сільськогосподарських тварин, включаючи птахів (в основному до 2-тижневого віку), що проявляється профузним проносом, ознаками важкої інтоксикації та зневоднення організму.
Протікає в ентеритній, септичній та ентеротоксемічній формах. Встановлено понад 150 типів. У домашніх тварин та людини відомо більше десяти серотипів кишкової палички, що викликає колібактеріоз.
Загальновизнано, що кишкова паличка живе в кишечнику тварин. Як правило, вона не викликає захворювання.
Матеріалом виділення кишкової палички є об'єкти довкілля (вода, грунт, змиви з різних предметів), при захворюваннях - випорожнення, блювотні маси, сеча, дуоденальний вміст чи кров, і навіть харчові продукти, підозрювані як джерело зараження. Матеріал засівають на диференційно-діагностичні середовища з наступним виділенням чистої культури E.coli. Ідентифікацію проводять шляхом вивчення морфологічних, біохімічних та антигенних ознак. Заключним етапом є визначення біовару кишкової палички, особливо серогрупи та серовару.
1.Історична довідка
кишковий паличка патогенність захворювання
Кишкові палички
(Бактерії групи кишкових паличок) У 1885 р. Ешеріх відкрив мікроорганізм, який отримав назву Escherichia coli (кишкова паличка). Цей мікроорганізм є постійним мешканцем товстого відділу кишечника людини та тварин. Крім Е. coli, до групи кишкових бактерій входять епіфітні та фітопатогенні види, а також види, екологія (походження) яких поки що не встановлена. До бактерій групи кишкових паличок відносять пологи Escherichia (типовий представник Е. coli), Citrobacter (типовий представник Citr. coli citrovorum), Enterobacter (типовий представник Ent. aerogenes), які об'єднані в одне сімейство Enterobacteriaceae завдяки спільності морфологічних та культуральних властивостей. Вони характеризуються різними ферментативними властивостями та антигенною структурою.
Вперше захворювання у телят встановлено у 1891 році К. Ієйсеном у Данії. У спеціальній літературі відомо багато синонімів, під якими описувалася патологія: колібацильоз, колісепсис, коліентерит, колі-діарея, «білий пронос телят», токсична диспепсія. Патологія має глобальне поширення, що супроводжується великими збитками. У Німеччині захворюваність на колібактеріоз телят у тридцяті роки досягала 42-48%., Серед лошат -19,7%. У Франції окремі роки деяких фермах летальність тварин становила 40 - 55%. У США втрати від колібактеріозу визначаються цифрою в 10%, до загальної захворюваності на телят. Захворювання молодняку з різними показниками спостерігаються у всіх країнах Європи, Азії та ін. (Я.Є. Коляков, 1970).
У Росії її захворювання реєструється в усіх регіонах. У господарствах Амурської області в 1946-1969 роки серед телят, що загинули в перший день життя, кількість позитивних лабораторних висновків на колібактеріоз становила 28,7%, досліджених проб, серед телят у віці. 2-3 днів – 34%., 4-7 днів – 22,5%., 8-14 днів – 19,4%., 15-21 день – 14,3%. Досліджено 3829 проб патологічного матеріалу (Ю.П. Мозжухін, 1971). У Примор'ї за 1967-1970 роки на колібактеріоз проведено 746 експертиз, у тому числі від 38%, до 55%, щороку були позитивними (Е.А. Кирьянов, 1974). Летальність при окремих спалахах хвороби серед телят досягала 46,6%, а в середньому за рік – 32%. (Е.А. Кір'янов, 1977, 1979). У Хабаровському краї щодо 258 проб, оброблених 1972-1975 роки, кількість позитивних підтверджень на колібактеріоз телят становило 12,4%. Випадків колібактеріозу серед поросят у роки не діагностовано (Е.А. Кирьянов, М.Ф. Соснин, 1978). На Сахаліні у 1972-1976 роки кількість позитивних випадків діагностики колібактеріозу телят перебувала в межах 2.1 – 46.2%. (Е.А. Кір'янов, В.Г. Курдюков та ін, 1981). В Амурській області в 1972-1976 роки на колібактеріоз телят досліджено 1696 об'єктів, частота позитивних результатів за роками коливалася в межах 15,4-27,9%., Серед поросят - 17,3-35%. Досліджено 287 трупів (Є.А. Кір'янов, І.Ф. Тютрін, 1981). Колібактеріоз у зоні Далекого Сходу в аналізовані роки також реєструвався серед норок, птахів, кролів.
2. Біологічна характеристика
.1 Морфологічні властивості
E.coli – це дрібні (довжиною 2 – 3 мкм., шириною 0,5 – 0,7 мкм.) грамнегативні палички із закругленими кінцями. Ультраструктура подібна до інших грамнегативних бактерій. У мазках вони розташовуються безладно, не утворюють суперечки, перетрихи (джгутики відходять по периметру бактерії). Кишкові палички рухливі. Деякі штами мають мікрокапсулу, пили.
Кишкова паличка не утворює суперечки.
2.2 Культуральні характеристики
Температурний оптимум для зростання ешерихій 37 ° С, pH 7,2 ... 7,4, факультативний анаероб до живильних середовищ невибагливий.
При сівбі на м'ясопептонний бульйон (МПБ), м'ясопептонний агар (МПА):
На МПБ дають рясне зростання при значному помутнінні середовища; осад невеликий, сірого кольору, що легко розбивається. Утворюють пристінне кільце, плівка на поверхні бульйону зазвичай відсутня.
На МПА колонії прозорі з сірувато-блакитним відливом, що легко зливаються між собою (див. Додаток 2).
При сівбі на диференціальні середовища:
на середовищі Ендо утворюють плоскі червоні колонії середньої величини із темним металевим блиском (Е. coli). (Див. Додаток 3)
на середовищі Левина кишкові палички дають забарвлені в колір індикатора колонії, оскільки здатні розкладати лактозу, що входить у ці середовища.
на середовищі Хісса кишкова паличка може утворювати газ. На селективно-диференціальних середовищах колонії приймають колір, що відповідає забарвленню середовища.
на середовищі Плоскірєва – відповідно червоні з жовтим відтінком або безбарвні.
на кров'яному агар (КА) можуть давати повний гемоліз.
2.3 Біохімічні властивості
Кишкова паличка продукує численні сахаролітичні ферменти, швидко ферментує глюкозу та інші вуглеводи, найчастіше з кислото- та газоутворенням. Майже всі біотипи кишкової палички постійно ферментують манітол, арабіноз, мальтозу з утворенням кислоти; понад 90% штамів – лактозу, сорбіт; постійно - сахарозу, раффінозу, рамнозу, ксилозу, дульцит, саліцин; як правило, не ферментують адоніт та інозит. E.coli не утилізує цитрат амонію, малонат натрію, не росте на сраді з ціаністим калієм, не редукує нітрати та нітрити, не розщеплює сечовину, не розріджує желатину, більшість штамів утворює індол і не виділяє H 2S. Кишкова паличка дає позитивну реакцію з метилротом і негативну реакцію Фогеса-Проскауера: (Для постановки реакції Фогес-Проскауера до 2,5 куб. см культури бактерій додають на початку 1 куб. см 6% спиртового розчину альфа-нафтола, а потім 0,4 куб.см 40% водного розчину КОН, пробірку ретельно струшують і через 3-5 хв враховують результати.При наявності в культурі ацетилметилкарбінолу вона забарвлюється в рожевий колір - позитивна реакція, забарвлення культури в жовтий колір свідчить про негативну реакції, при сумнівній реакції культура забарвлюється у світло-оранжевий колір.). E.coli не синтезує ферменти цитохромоксидазу та фенілаланіндезаміназу, постійно декарбоксилює лізин, орнітин і дегідролізує аргінін. Згортають молоко.
2.4 Антигенна структура
За антигенними, а головне, токсиногенними властивостями, розрізняють два варіанти E.coli:
умовно-патогенні кишкові палички;
патогенні палички, які викликають діарею.
Кишкова паличка містить О-, К- та Н-антигени. О(соматичні) – антигени у E.coli, пов'язані з ліпополісахаридом (ЛПС) клітинної стінки. Імунохімічна специфічність О-антигена визначається складом гексасахаридів у ланках кінцевої ділянки полісахаридного ланцюга, що повторюються, яка іншим кінцем пов'язана через 2-кето-3-дезоксиоктонат (КДО) з ліпідом А. Наприклад, структура ЛПС одного зі штамів кишкової палички представлена
Кількість цукрів у тому самому кінцевому ланці, як і кількість детермінантних ланок в різних серогруп ешерихій, неоднакове. Специфічність О-антигенів кишкової палички зазвичай визначається реакції аглютинації з О- або ОВ-аглютинуючими сироватками на предметному склі, рідше іншими методами.
К-антигенами позначають поверхневі антигени, які пов'язані з капсулою та з ЛПС кишкової палички. Їх поділяють на A-, B-і L-антигени, що відрізняються один від одного чутливістю до високої температури та хімічних агентів. Найбільш високою стійкістю до нагрівання (до 100°С протягом 2 ½ годину), спирту та 1 н. розчину HCl має А-антиген, найменш стійкий L-антиген. У більшості кишкових паличок К-антигени є кислі полісахариди, що містять уронові кислоти. Деякі К-антигени містять лише білок. E.coli, що мають К-антигени, не аглютинуються гомологічною О-коли-сироваткою. Ця особливість властива живим культурам і втрачається після кип'ятіння або автоклавування. Наявність К-антигенів встановлюється також реакції адсорбції агглютининов і при імуноелектрофоретическом дослідженні.
H-джгутикві, або флагелярні, антигени властиві активно-рухливим штамам. Вони пов'язані з білком-флагелліном та визначають іпову імунохімічну специфічність кишкової палички. H-антигени трмолабільні. Вони повністю руйнуються при кип'ятінні протягом 2½ годин.
У E.coli описано близько 170 О-антигенів, 97 К-антигенів та 50 Н-антигенів. Штами кишкової палички, забезпечені віями, містять білкові війчасті антигени. Їх виявляють у реакції гемаглютинації.
Кишкові палички позначаються за антигенними формулами: на першому місці ставиться номер О-антигена, на другому - К-антигена, на третьому - Н-антигена. Тип К-антигена вказується у дужках. Наприклад, К(В) або К(L). Номери О-, К- та Н-антигенів поділяються двокрапками. За антигенними формулами встановлюється належність дослідженого штаму до певної серологічної групи.
Епізоотичні спалахи колібактеріозу найчастіше викликають патогенні штмпи ешерихій наступних серогруп:
у телят - 08, 09, 015, 020, 026, 035, 078, 086, 0101, 0115, 0117, 0119, 0141, рідше 02, 033, 041, 055, 01;
у поросят – 06, 026, 033, 0101, 0136, 0139, 0141, 0142, 0149, 0152, 0157;
у ягнят - 04, 08, 09, 015, 020, 028, 035, 041, 078, 0101, 0137;
у птахів – 01, 02, 08, 015, 018, 026,055, 078, 0111, 0113, 0128, 0141.
2.5 Плазміди
Кишкові палички можуть містити різні плазміди: профаг, фактор фертильності, коліциногенний фактор, фактор резистентності, антигенний фактор, ентеротоксигенний фактор та інші. Профаги можуть викликати зміни окремих ознак кишкової палички, наприклад О-антигена (лізогенія (від грец. l ý sis - розкладання, розпад і ... geneia - походження, створення), генетично обумовлена здатність бактерій лізуватися з виділенням бактеріофага через ряд поколінь після безпосереднього зараження ним. Теорія лізогенії розроблена в 1950 р. французькими вченими А. Львовим і А. Гутманом, які показали, що лізогенний стан пов'язаний з присутністю в клітинах бактерій потенційно інфекційної структури - профагу. У кожному поколінні лізогенних бактерій піддається лізису дуже невелика частина клітин (1 клітина на мільйон) зі звільненням від 70 до 150 частинок так званого помірного фага. Частота переходу профагу в інфекційний стан (індукція профагу) може бути збільшена рядом агентів (наприклад, ультрафіолетовими променями). Після зараження бактеріальної клітини помірним фагом процес інфекції може розвиватися по одному з двох напрямків: шляхом літичного циклу, який так само, як і при зараженні бактерій вірулентними фагами, закінчується лізисом клітин і виходом потомства фага в навколишнє середовище; по шляху лізогенізації, коли в результаті біосинтетичних процесів у клітині виробляється імунітет до інфікуючого фагу, фагова ДНК включається в ДНК бактерії і надалі реплікується разом з нею як її складова частина (профаг), а бактерія виживає та стає лізогенною. Доля клітин вирішується на перших етапах інфекції і залежить головним чином від часу формування імунітету. Якщо стан імунітету настає раніше, ніж розвиток інфекції досягне стадії, що незворотно веде до лізису, то може існувати лізогенізація. У геномі бактерій можуть міститися одночасно профаги декількох різних фагів (підлога та лізогенія). У цьому випадку клітина має імунітет щодо всіх цих фагів. Внаслідок лізогенізації може відбутися зміна деяких властивостей бактеріальної клітини (так звана лізогенна конверсія), зумовлена придбанням бактерією нової генетичної інформації. Штучно одержані лізогенні бактерії за своїми властивостями не відрізняються від лізогенних бактерій, знайдених у природних умовах. У невеликої частини потомства лізогенної клітини відбувається зцілення - втрата профагу. Клітини, що втратили профаг, дають початок нелізогенним лініям. Частота цього може бути збільшена, наприклад, дією ультрафіолетових променів. Отже, лізогенія. - Складна форма вірусної інфекції у бактерій, при якій від моменту зараження бактерій фагом до лізису клітини проходить велика кількість клітинних поколінь).
F-плазміди визначають статеву полярність та викликають утворення статевих вій (sex-pili). Col-плазміди контролюють утворення коліцинів, що пригнічують зростання філогенетично споріднених бактерій. R-плазміди відповідають за резистентність E.coli до антибіотиків. Плазміда К88 контролює синтез однойменного антигену та ниток, що визначають адгезивні властивості ентеропатогенних та ентеротоксигенних кишкових паличок; Плазміди можуть бути двох типів. Один з них визначає синтез термолабільного, інший – термолабільного та термостабільного ентеротоксину.
2.6 Токсиноутворення
Кишкова паличка утворює ендотоксин, пов'язаний з ЛПС (ліпополісахаридом), який є частиною О-антигену. Біологічна активність ендотоксину виявляється неоднаково у різних серогруп кишкової палички. Токсичні властивості ендотоксину визначаються цілою молекулою ЛПС, оскільки один ліпід або полісахарид є малотоксичним. Ендотоксин вражає згортаючу систему крові, викликає феномен Щвартцмана та інші явища, має пірогенні, ад'ювантні, протективні та мітогенні властивості. У невеликих дозах стимулює, а великих пригнічує фагоцитарну реакцію.
Багато серогруп E.coli продукують ендотоксини. Вважають, що одні серогрупи кишкової палички викликають холероподібну діарею у людей, інші лише у тварин (поросят, телят).
E.coli продукують два типи ентеротоксину. Термостабільний ентеротоксин інактивується лише після кип'ятіння протягом 30 хв, повільно діалізується через целофан, зберігає активність при кислих значеннях рН та після обробки трипсином та проназою. Молекулярна вага 10 3-104. Антигенними властивостями не має. Термолабільний ентеротоксин інактивується після 30-хвилинного прогрівання при 60°С, рН 4,0-5,0 під дією пронази і не діалізується. Антигенна специфічність термолабільних ентеротоксинів, що продукуються різними серогрупами, та холерогену однакова. Вони стимулюють активність аденілатциклази та викликають накопичення циклічного аденозинмонофосфату (цАМФ), що призводить до порушення секреції та розвитку гострої діареї.
2.7 Резистентність
Стійкість E.coli до впливу зовнішніх факторів – звичайна для аспорогенних бактерій. У довкіллі (воді, грунті) вона виживає залежно від конкретних умов протягом кількох місяців. При нагріванні у суспензіях гине при 55 ° через годину, при 60 ° - через 15 хв, в 1% розчині фенолу - через 10 хв, в розчині сулеми 1:1000 - через 2 хв. Кишкова паличка має вибіркову чутливість до діамантового зеленого та солей тетратіонової кислоти. На цьому ґрунтується застосування ряду селективних середовищ. Багато штами E.coli високочутливі до мономіцину, канаміцину, гентаміцину.
2.8 Патогенність
Кишкові палички – комменсали товстого кишечника – можуть викликати гнійно-запальні процеси в органах та тканинах при різкому зниженні резистентності організму.
Вірулентність кишкової палички проявляється в адгезивності кишкової палички, тобто прилипанні до ворсинок епітелію кишки, розмноження у просвіті тонкої та товстої кишки, пенетрації в клітини епітелію та у внутрішньоклітинному розмноженні, а також у придушенні фагоцитарної активності макрофагів та поліморф. Кишкові палички – збудники коліентеритів у молодняку та холероподібних захворювань у дорослих тварин – розмножуються на поверхні епітеліальних клітин кишки. Кишкові палички – збудники дизентеріоподібних захворювань – проникають у клітини епітелію та розмножуються в них. Прояв вірулентності кишкової палички залежить від дози бактерій, що проникли в кишечник. Вірулентність кишкової палички визначається у тканинних культурах, дослідах на лабораторних тваринах при відтворенні експериментальних коліентеритів, пневмонії та інших процесів. Пенетраційна здатність встановлюється кератокон'юнктивальною пробою Шереня шляхом введення культури E.coli на кон'юнктиву ока морської свинки.
E.coli може завдавати значної шкоди тварині. Штами, що мешкають у товстій кишці і є умовно-патогенними, можуть потрапити за межі шлунково-кишкового тракту та при зниженні імунітету та їх накопичення стати причиною різних неспецифічних гнійно-запальних захворювань (циститів, холециститів, колисепсису та інших). Такі хвороби називаються парентеральними ешеріхіозами.
Діареєгенні штами E.coli, які потрапляють в організмі ззовні, можуть викликати спалахи ентеральних (епідемічних) ешеріхіозів.
Найчастіше від епідемічних ешеріхіоз страждають новонароджені тварини, у яких імунна система ще повністю не сформувалася; у них є лише IgG, отримані від матері через плаценту (а від грамнегативних бактерій захищають IgM); кислотність шлункового соку низька; нормальна мікрофлора лише формується.
Але діарегенні ешерихії здатні вражати тварин і старшого віку, і навіть дорослих. Причому ешеріхіоз може протікати, наприклад, на кшталт холери (ентеротоксигенні штами), дизентерії (ентероінвазивні штами), геморагічного коліту (ентерогеморагічні штами). Іноді кишкові палички спричиняють колісепсис, перитоніт, ендотоксичний (септичний шок). Крім того, E.coli може бути причиною харчової токсикоінфекції.
2.9 Патогенез
Своєрідність цієї інфекції полягає в тому, що виникнення та розвиток захворювання визначаються своєрідністю захисних реакцій у тварин раннього віку та значно меншою мірою залежать від властивостей мікроба-збудника та дози інфекту. Велике значення у патогенезі виникнення хвороби мають зміни ферментативної діяльності залоз шлунково-кишкового тракту, виникнення дисбактеріозу, зниження антагоністичних, ферментативних та вітаміноутворюючих властивостей мікрофлори кишечника. Поряд з колікоксином, що виділяється патогенними серологічними типами кишкових паличок та продуктами розпаду мікробних тіл, з кишечника всмоктуються токсичні продукти, що утворюються з їжі у зв'язку з порушеннями процесів перетравлення та швидкості просування її у просвіті кишечника. Ці токсичні продукти та антигени кишкових паличок впливають на нервові закінчення і безпосередньо на нервові центри, на стінки судин та тканини. Другий чинник, який має величезний вплив на клінічні прояви токсикозу, - це зміна маси циркулюючої крові, що з різким спазмом артеріол при значному розширенні капілярів і дрібних вен. Одночасно у зв'язку з розширенням судин черевної порожнини відбувається перерозподіл маси крові, депонування її в черевній порожнині та створення недокрів'я в судинах головного мозку, шкіри, нирок. Зростаюча проникність судин призводить до появи набряку тканин за рахунок переходу білків і рідкої частини крові в міжклітинні простори. Наростанню згущення крові та погіршенню кровообігу сприяють також великі втрати води та солей з частим рідким стільцемблюванням, підвищеним випаром з поверхні шкіри, а також з диханням. Все це призводить до порушення кровообігу, погіршення постачання тканин киснем, падіння серцевої діяльності та зниження сечоутворення.
Підвищення рівня калію у таких хворих короткочасно та швидко змінюється прогресуючим зниженням його рівня у сироватці крові на тлі посиленої втрати калію із сечею та калом.
Певну роль у картині токсикозу, що розвивається, відіграє майже постійне і тривале падіння функції кори надниркових залоз зі зменшенням продукції та секреції глюкокортикоїдних гормонів, що регулюють тонус судин, білковий і вуглеводний обмін, що відновлюють порушену проникність клітин.
2.10 Екологія
Резервуаром кишкової палички у природі є людина, тварина товста кишка якого заселяється різними біотипами цього мікроба.
Кількість E.coli в 1 г випорожнень коливається від кількох мільйонів до 1-3 млрд. особин. Протягом життя відбувається багаторазова зміна біоварів кишкової палички у кишечнику. Певну роль у процесі грає режим харчування, перенесені інфекції, лікування хіміопрепаратами, антибіотиками та інші чинники.
3. Лабораторна діагностика
При виявленні бактерій, типових за морфологічними, тинкторіальними і культуральними властивостями для Е. coli, біохімічні властивості не вивчають, а відразу досліджують у РА на склі з аглютинуючими антиадгезивними сироватками, спочатку з комплексною, а потім при отриманні позитивного результату з моновал. Результат реакції враховують протягом однієї хвилини. Контролем служать:
) досліджувана культура + фізіологічний розчин;
) культура + нормальна кроляча сироватка, розведена у співвідношенні 1:10.
Культури, що виросли на МПА, перевіряють із сироватками До 88, 987 Р та А 20, культури з середовища Мінка - із сироватками До 99 та F41. При позитиві РА культури відносять до збудників ешеріхіозу і на цьому закінчують їх подальше вивчення. За відсутності ешерихій з адгезивними антигенами культуру ідентифікують виходячи з вивчення ферментативних ознак. Для Е. coli характерне розщеплення глюкози та лактози з утворенням кислоти та газу, виділення індолу, відсутність уреази та нездатність утилізувати цитрати.
У культур, ідентифікованих як Е. coli, встановлюють О-сіркогрупову приналежність як непрямий показник патогенності або вивчають патогенність біопробі на білих мишах, курчатах.
О-Серогрупу ешерихій встановлюють в такий спосіб. Культури, вирощені на скошеному МПА при 37 0Протягом 18…20 год, змивають фізіологічним розчином, переносять у сухі стерильні пробірки, прогрівають у водяній бані при 100 0З 1 год для руйнування поверхневих термолабільних L-і В-антигенів або автоклавують при 120°З 2 год для руйнування термостабільного А-антигена. Прогріту завис бактерій центрифугують при 2000 ... 3000 хв -110 ... 15 хв і осад використовують як антиген для постановки РА на склі. Решту антигену розводять стерильним фізіологічним розчином до концентрації клітин 5 108/мл і ставлять пробіркову РА.
Визначення серогрупової приналежності культур починають із постановки РА на склі з груповими полівалентними сироватками: чисте знежирене скло наносять по краплі полівалентні сироватки. У кожну краплю петлею вносять культуру, що обложена центрифугуванням, і добре змішують, результат враховують протягом 3 хв. Позитивна реакція характеризується утворенням дрібнозернистого аглютинату та просвітленням рідини. При негативному результаті вся крапля залишається каламутною.
Антиген, що аглютинуються однією з полівалентних групових сироваток, досліджують у РА на склі з моновалентними сироватками, розведеними у співвідношенні 1:10 і що входять до складу даної полівалентної сироватки. Потім із моновалентною сироваткою, що дала позитивну реакцію, ставлять РА в пробірках обсягом 1 мл. Сироватку розводять фізіологічним розчином 1:25 до титру, зазначеного на етикетці: спочатку готують вихідне розведення - до 2,4 мл фізіологічного розчину додають 0,1 мл сироватки, інші пробірки розливають по 0,5 мл фізіологічного розчину, з вихідного розведення переносять 0 5 мл суміші в другу перемішують з другої - в третю і т.д. з останньої пробірки видаляють 0,5 мл суміші, з першої - 1,5 мл. У всі пробірки додають 0,5 мл антигену. Одночасно ставлять контролі: 1) антиген + фізіологічний розчин (для виключення самоаглютинації); 2) сироватка, розведена 1:25 без антигену (для виключення флокуляції). Усі пробірки струшують, витримують у термостаті при 37°С 16… 18 год і потім за кімнатної температури - 6…8 год. Читають реакцію з допомогою аглютиноскопа.
Результати враховують за загальноприйнятим методом та позначають у хрестах (++++, +++, ++, +, -).
Для прискореного методу діагностики та підвищення частоти позитивних результатів застосовується метод люмінесцентних антитіл – модифікація методу Кунса та Каштана (Coons, Kaplan, 1950). Мазок готується або безпосередньо з калу (розведення в 5-10 разів-фізіологічним розчином), або після попереднього підрощування протягом 3-24 годин на середовищі Ендо або в рідкому бульйоні. Після обробки специфічною флюоресцентною сироваткою при позитивному результаті препарату при огляді в люмінесцентному мікроскопі виявляється яскраве світіння бактеріальних клітин.
4. Лікування та профілактика
Лікування.Всі заходи проводяться приблизно так само, як і при сальмонельозі. Сироватка проти кишкової палички не завжди ефективна з огляду на те, що вона не завжди відповідає типу збудника колібактеріозу. Найбільш ефективний вплив надає пероральне використання хлортетрацикліну гідрохлориду (0,01-0,02 г), окситетрацикліну (0,025 г) або міцерину (0,01 г на 1 кг живої маси).
Для лікування хворих тварин широко використовують антибіотики (О. 3. Ісхаков та ін, 1984):
Ампіцилін Препарат застосовують перорально індивідуально або груповим способом по 20 мг на кг живої маси 3 рази на день;
Біовіт. Антибіотик призначають із кормом, водою, молозивом 2 рази на добу в дозі 0,25 г па кг живої маси. Курс профілактики –5-20 днів;
Вітатетрін. З лікувальною метою дають індивідуально по 40 мг на кг живої маси з інтервалом о 12 год. Курс лікування 5-7 днів;
Гентаміцин. Антибіотик вводять внутрішньом'язово в дозі 15 мг на кг живої маси протягом 5-7 днів;
Левоміцетин. Призначають перорально по 20 мг на кг живої маси;
Мікс-10. Дають із кормом у дозі 3-4 кг на 1 т корму. Курс лікування 7-10 днів;
Норомандоміксин. Дози телят 100 мг на 1 кг живої маси. Антибіотик дають крізь рот. Курс лікування – 7 днів;
Оріміцин. Вводиться внутрішньом'язово, підшкірно, внутрішньочеревно або повільно внутрішньовенно у дозі 4-30 мг на кг маси тварини 2 рази на добу. Об'єм розчину, що вводиться 10-20 мл. Курс лікування – 5-7 днів;
Поліміксину М сульфат. Дають внутрішньо 2-3 десь у день як водного розчину по 4 мг на кг живої маси;
Солвоветін. Вводиться внутрішньом'язово через 12 годин у дозі 0,15 мл на кг живої маси. Ін'єкції повторюють 5-7 днів;
Спектам В. Спектам вводять внутрішньо за 20-30 хвилин до випоювання молозива. Доза - 40-60 мг па кг живої маси тварини 2 десь у день, 3 дні поспіль.
Крім антибіотиків, при колібактеріозі показано застосування сульфаніламідних препаратів: сельфапіридазину, фтазину, сульфадиметоксину, сульфамонометоксину, ентеро-септолу, інтестопану, мексаформу, невигрому та ін. (Р.М. Салімов, 1985; 1985; .Проданов, 1974; В. В. Мітюшин, 1985; Л. І. Гершкович, 1966; В. А. Гу-мул та ін, 1985). Останнім часом для терапії телят, хворих на колібактеріоз, запропоновані лерс і стартин, що забезпечують лікувальний ефект до 88 відс. (Н.І. Овсянов із співавторами, 1984; І.Д. Колесніченка зі співавторами, 1985).
Заходи боротьби та профілактика. При встановленні діагнозу хворих на телят ізолюють, піддають лікуванню. Народженим телятам випаюють 80-100 мл гіперімунної сироватки і по 10 мл коліпротектану. Коліпротектан дають протягом двох днів до 60мл. Підстилку та гній видаляють із приміщення щодня. Гній складують у відведеному місці для біотермічного знезараження. Щодня також піддають дезінфекції верстати або клітини у телятнику-профілакторії. Дезінфікують інвентар, гною жолоби, гною проходи.
У секції, де містяться хворі телята, подовжують розрив між переносними клітинами. Знезаражують повітряне середовище приміщення. Персонал, що працює у телятнику, забезпечується спецодягом та взуттям. Відвідування профілакторію, телятника сторонніми особами не допускається. Центральним завданням боротьби з колібактеріозом є створення нормальних умов годівлі та утримання корів, а також забезпечення вирощування молодняку. У зв'язку з цим годівля корів має здійснюватися на основі біологічно повноцінних раціонів. Тваринам обов'язково влаштовується активний маціон. Організація активного маціону корів служить потужним фактором, що профілактує накопичення плазмід, що мають патогенність і лікарську стійкість.
Не менше значення у системі попередження поширення патогенних ешерихій має правильна організація отелів та вирощування новонароджених телят. Для отелення корів на кожній фермі обладнають двосекційні пологові обеління з розрахунку 10-15% місць від загального поголів'я корів. У кожній такій секції споруджується кілька боксів. Перед отеленням проводять туалет та дезінфекцію шкірного покриву корови. Продезінфікований бокс заправляють підстилкою гарної якості. Готель приймають на чисту мішковину. Теля першу годину після народження з метою профілактики колібактеріозу випаюють 80-100 мл гіперімунної сироватки, потім молозиво.
Вирощування телят, що народилися, організують у боксах. Для цього профілакторій ділять на 4 ізольовані секції з окремими входами, автономною вентиляцією та каналізацією. У кожній секції встановлюють індивідуальні клітини. Секції заповнюють за 3-4 дні. При використанні їх дотримуються принципу «все порожньо - все зайнято». Містять в індивідуальних клітинах 10 днів, потім із профілакторії їх переводять на груповий вміст. Намагаються, щоб телята у телятнику розміщувалися посекційно в одній, двох групових клітинах. Клітини, що звільнилися в профілакторії, і секцію піддають механічному очищенню і дезінфекції. Після цього протягом п'яти днів секцію не займають, надають їй «біологічний відпочинок».
У господарствах проводять специфічну профілактику колібактеріозу. Для цього глибоко стельних корів і нетелів вакцинують гідроокис-алюмінієвою, формол-тномерсаловою вакциною проти колібактеріозу телят та ягнят. Корів і телят імунізують за 1,5-2 місяці до отелення внутрішньом'язово дворазово з перервою в 10-15 днів. Вакцинацією корів забезпечується висока концентрація антитіл в молозиві, які захищають теляти від впливу патогенних ешерихій. Застосування вакцини коровам знижує захворюваність телят на колібактеріоз у 1,5-3 рази, смертність - у 5-10 разів (В.В. Кольчак, 1983).
Крім цього, з метою профілактики хвороби показано застосування телят сироватки крові корів, взятої в тому ж господарстві, а також нормальних глобулінів, коліфагу. Позитивну дію має випоювання ацидофільно-бульйонної культури, ацидофільного молока. Хороший ефект дає застосування колібактеріну, біфідумбактеріну. Біфідумбактерин призначають по 2-3 дози 2-3 десь у день протягом 3-4 діб Г.В. Гнатенко зі співавторами (1983), глибоко стельних корів рекомендують обробляти стрептоміцином. Препарат у дозі 500 ОД на 1 кг живої маси вводиться внутрішньом'язово по 2 рази на день 3 дні поспіль. За їхніми даними, захворюваність телят, отриманих від оброблених корів, знижується до 7,1%, немає летальних наслідків. За відсутності такої обробки захворюваність на телят досягає 80%., летальність - до 61%.
Висновок
Кишкова паличка, Escherichia coli, - ми не раз чули цю назву в телерепортажах про епідемії недавніх років у деяких російських містах (Іваново, Смоленськ, Челябінськ). Коли незнайома з мікробіологією людина слухає радіо або дивиться подібні сюжети по телебаченню, у неї складається враження, що кишкова паличка може завдати людині тільки шкоди, і що її потрібно позбавлятися всіма можливими способами.
Але якщо придивитися до цього мікроорганізму уважніше, то ми побачимо, що кишкова паличка може приносити багато користі людству, а її шкідливі впливи можна суттєво обмежити належними санітарно-гігієнічними заходами та правильним лікуванням. Вона є дуже зручним об'єктом для приведення генно-інженерних та інших досліджень, покликаних у майбутньому допомогти у лікуванні пацієнтів із різними захворюваннями.
У нашій країні ці дослідження ведуться не так активно, як у США, через брак фінансування таких робіт, але якщо ця проблема буде найближчим часом подолана, то російські вчені мають всі шанси для відкриття новітніх методик лікування, пов'язаних з використанням кишкової палички. (Велику роль тут відіграє і величезний ентузіазм вітчизняних вчених, у тому числі й зацікавленість сучасної наукової молоді).
Список використаної літератури
1.Борисов Л.Б. Ентеропатогенні кишкові палички та їх фаги, Л., 1976.
2.БСЕ, стор 366-368.
Гнатенко Г.В., Тупія Л.Г. Ракицький Д.Т. Досвід боротьби із колібактеріозом телят. – Ветеринарія, Київ: «Урожай», 1983, вип. 57
Гумул В.А., Афанасьєв Л.А., Мауланов А. 3. Клініка та лікування колібактеріозу телят. - Вісник с-г науки Казахстану, 1985 №2.
Кауфман Ф. Сімейство кишкових бактерій, пров. з англ., М., 1959.
Кір'янов Є.А. Патогенна мікрофлора жуйних тварин. - У кн.: Боротьба з хворобами сільськогосподарських тварин у Забайкаллі та Далекому Сході. Зб. наук. праць Благовіщенського СХІ, Благовіщенськ, 1974.
Кір'янов Є.А. Хвороби телят та його профілактика в колгоспах п радгоспах Приморського краю. – Владивосток, 1977.
Кір'янов Є.А., Соснін М.Ф. Епізоотична ситуація та проблеми здорових стад тварин у Приамур'ї. - підвищення продуктивності сільськогосподарських тварин на Далекому Сході. Зб. наук. тр. Приморського СХІ, вип. 47, Уссурійськ, 1978.
Кір'янов Є.А., Галіуліна Р.В. Профілактика хвороб молодняку сільськогосподарських тварин. – Владивосток, 1979.
Кір'янов Є.А., Тютрін І.Ф. Етюди щодо інфекційної патології сільськогосподарських тварин. - Відтворення стада та ветеринарна охорона здоров'я в умовах інтенсивного тваринництва Далекого Сходу. Зб. наук. тр. Приморського СХІ, Уссурійськ, 1981.
Кольчак В.В. Колібактеріоз телят та заходи боротьби з ним у господарствах Амурської області (метод, рекомендації). - Новосибірськ: З ВАСГНІЛ, 1983,
Коляков Я - Е-, Гітельсон С. С, Каврук Л.С. Колібактеріоз телят. - М: "Колос", 1970.
Лурія С., Дарнелл Дж., Загальна вірусологія, пров. з англ., М., 1970; Равін Ст К., Лізогенія, М., 1971.
Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія, під ред. Л.Б. Борисова та А.М. Смирновій, с. 269-273, М., Медицина, 1994.
Медична енциклопедія, с. 252.
Методи санітарно-мікробіологічного дослідження об'єктів довкілля, за ред. Г.І. Сидоренко, М., 1978.
Мікробіологія та імунологія, під ред. А.А. Воробйова, с. 289-293, М., Медицина, 1999.
Мінкевич І.Є. Бактерії групи кишкової палички як санітарно-показові мікроорганізми, Л., 1949.
Мозжухін Ю.П. До епізоотології колібактеріозів телят та поросят в Амурській області. – У кн.: Матеріали XIX наукової конференції. Благовіщенськ, 1971
Овсянов Н.І., Оволодєєва М, А., Наумова К.М. Препарат Лерс при діареї телят. - Земля сибірська, далекосхідна, 1984 №2
Гострі кишкові інфекції, за ред. Т.В. Передзе, с. 73, Л., 1973.
Поздєєв О.К. Медична мікробіологія, с. 351-357, М., Геотар-мед, 2002.
Проданов В.І. Матеріали для вивчення шлунково-кишкових захворювань новонароджених телят. - У кн.: Профілактика та лікування хвороб молодняку сільськогосподарських тварин. М.: "Колос", 1974
Салімов Р.М. Лікарські препарати при колібак-
теріозі. - Земля сибірська, далекосхідна, 1985. Табачник А.Л., Гіршович Є.С., Темпер Р.М. Ентеротоксигенні E.coli, Журн. мікро., епід. та імун., №3, с. 31, 1977.
Фортушний В.А. Сульфагін при колібактеріозі теляг. - Ветеринарія, 1985 №9
Репетиторство
Потрібна допомога з вивчення якоїсь теми?
Наші фахівці проконсультують або нададуть репетиторські послуги з цікавої для вас тематики.
Надішліть заявкуіз зазначенням теми прямо зараз, щоб дізнатися про можливість отримання консультації.
СТАЙЛАБ пропонує тест-системи для визначення кишкової палички (E. coli) у пробах продуктів та навколишнього середовища мікробіологічними методами, за допомогою ПЛР у реальному часі, а також методом латекс-аглютинації.
Кишкова паличка ( Escherichia coli) - це факультативно-анаеробна грамнегативна рухлива паличкоподібна бактерія, що входить до складу нормальної мікрофлори кишечника більшості теплокровних тварин, у тому числі, і людини. Існує безліч серотипів кишкової палички, більшість з яких нешкідливі або навіть корисні для носія. Бактерії, що входять до складу мікрофлори, перешкоджають розмноженню інших бактерій, у тому числі патогенних. Крім того, кишкова паличка виробляє вітамін К. Однак деякі серотипи E. coliможуть викликати тяжкі захворювання. Морфологічно нешкідливі та патогенні кишкові палички не відрізняються, тому для визначення патогенності мікроорганізму потрібно проаналізувати його антигени.
Бактерії кишкової палички можуть відноситися до різних серогруп: мати різні антигени. Серогруппа - це група бактерій, які мають загальний антиген; вона може включати більше одного серотипу, виду чи роду. Для E. coliнайбільш відомими є серогрупи ентеропатогенної кишкової палички O26, O55, O86, O111, O114, O119, O125, O126, O127, O128, O142 та O158. До цих груп можуть належати й інші типи патогенної кишкової палички. Наприклад, у DAEC виявлені серогрупи O86, O127, O142 та O158.
Вирізняють шість типів патогенних кишкових паличок.
- Ентерогеморагічна кишкова паличка (EHEC, використовуються також скорочення STEC - від «шигатоксин-продукуюча E. coli і VTEC - «веротоксин-продукуюча E.Coli). Ці бактерії виробляють два токсини, які називають , або шигаподібні (шигелоподібні) токсинами. EHEC викликає захворювання, що за симптоматикою подібні до дизентерії і супроводжуються геморагічною діареєю. У важких випадках може розвиватись гемолітико-уремічний синдром (ГУС). До EHEC відносяться серотипи кишкової палички O104: H4, O157: H7 та деякі інші.
- Ентеротоксигенна кишкова паличка (ETEC) виробляє термолабільний та термостабільний токсини, останній з яких схожий на токсин холерного вібріона. Для захворювань, що викликаються цією бактерією, характерна рідка діарея, підвищена температура і, у деяких випадках, нудота.
- Ентероінвазивна кишкова паличка (EIEC) спричиняє захворювання, схожі на бактеріальну дизентерію. Ці бактерії проникають у клітини епітелію кишечника та розмножуються у них.
- Ентеропатогенна кишкова паличка (EPEC) частіше спричиняє діарею у дітей, ніж у дорослих. Механізм її дії відрізняється від ETEC та EIEC: ці бактерії прикріплюються до клітин епітелію кишечника, але не проникають у них. Захворювання, спричинені EPEC, можуть тривати до 2 тижнів.
- Ентероагрегативна кишкова паличка (EAEC) також викликає захворювання, переважно, у дітей. Бактерії прикріплюються до епітелію кишечника та виділяють токсини.
- Дифузно-адгезивна кишкова паличка (DAEC) викликає легку діарею у дітей, особливо віком до 2 років. Однак цей мікроорганізм виявляли і у здорових дітей, а також здорових дорослих.
Кишкова паличка здатна викликати не тільки ентерити та токсикоінфекції, а й менінгіти новонароджених, респіраторні інфекції, інфекції сечовивідних шляхів та бактеріємію – загальне ураження організму, спричинене бактеріями, що проникли в кров.
E. coliвідноситься до найбільш вивчених організмів. Геном одного із штамів цих бактерій був повністю секвенований у 1997 році. Кишкову паличку використовують у генетичних та мікробіологічних експериментах, а також при вивченні видоутворення. Крім того, за допомогою цих бактерій синтезують різні білки, зокрема аналог інсуліну людини, деякі ферменти та ін. Їх застосовують також для отримання вакцин. Ведуться дослідження щодо використання кишкової палички для отримання палива.
У Російській Федерації та країнах Митного Союзу вміст кишкової палички у харчових продуктах обмежено ТР ТС 021/2011 «Про безпеку харчової продукції», ТР ТС 033/2013 «Про безпеку молока та молочної продукції» та іншими технічними регламентами. З актуальною законодавчою інформацією можна ознайомитись на сайті compact24. com .
Для визначення кишкової палички в пробах використовують мікробіологічні методи (селективні середовища, тест-підкладки), так і визначення ДНК за допомогою ПЛР. Як експрес-тести застосовують простий і швидкий метод латекс-аглютинації.
Література
- О.К. Поздєєв. Медична мікробіологія Москва, Геотар-МЕД, 2001.
- Офіційний сайт CDC.
- Germani Y, Bégaud E, Duval P, Le Bouguénec C. Prevalence of enteropathogenic, enteroaggregative, і diffuselly adherent Escherichia coli серед isolates від дітей з диарея в новому Каледонії. J Infect Dis. 1996 Nov; 174 (5): 1124-6.
- Mansan-Almeida R, Pereira AL, Giugliano LG. Відмінно пристосований Escherichia coli strains isolated from children and adults constitute 2 different populations. BMC Microbiol. 2013 Feb 1;13:22.
- Isabel C. A. Scaletsky, Sandra H. Fabbricotti, Rozane L. B. Carvalho, Claudia R. Nunes, Helcio S. Maranhão, Mauro B. Morais, і Ulysses Fagundes-Neto Diffusely Adherent Escherichia coliяк Cause of Acute Diarrhea в Young Children в Northeast Brazil: a Case-Control Study. J Clin Microbiol. 2002 Feb; 40 (2): 645-648.
Ешеріхії (кишкова паличка)
Історія відкриття.
Вперше були виділені з кишечника дитини та описані в 1885 р.німецьким лікарем-педіатром Теодором Ешеріхом.
|
Таксономія. Сімейство |
Enterobacteriaceae |
|
Тріба |
|
|
Види |
E. сoli та інші, всього 5 видів |
Морфологія та тинкторіальні властивості .
E. сoli є грамнегативними прямими із закругленими кінцями палички розміром 0,4-0,-2-6 мкм, в мазках розташовуються безладно, рухливі (перетрихи), мають мікрокапсулу, пили I і II типів, суперечка не утворюють.
Культуральні властивості .
E.сoli – факультативні анаероби, хемоорганогетеротрофи. Чи не вимогливі до умов культивування. Оптимальні умови культивування: температура 37 С, рН 7,2-7,5, тривалість культивування – 24-48 години. Добре ростуть на простих живильних середовищах (МПБ, МПА). У МПБ спостерігається зростання як дифузного помутніння з наступним утворенням осаду. На МПА утворюють колонії в S-формі: напівпрозорі слабовипуклі колонії з рівними краями і гладкою, блискучою поверхнею середнього розміру. Можливий ріст у R-формі (колонії з порізаними краями, шорсткою поверхнею), іноді виростають слизові колонії (М-форма).
Надають характерне зростання на диференціально-діагностичних середовищах: Ендо (малинові колонії з металевим блиском); Левіна (темно-сині колонії з металевим блиском), Плоскірєва (рожеві колонії з металевим блиском), Ресселя та Олькеницького. На кров'яному агарі можуть давати гемоліз.
Біохімічні властивості .
E. сoli мають високу ферментативну активність. Каталазопозитивні та оксидазонегативні. Реакція Фогеса-Проскауера негативна. Розкладають цукру (глюкозу, лактозу, маніт, арабінозу, сахарозу та ін.) до кислоти та газу. Розкладання лактози до кислоти та газу є відмітною ознакою ешерихій від інших ентеробактерій. Відновлюють нітрати в нітрити, утворюють індол, аміак, не продукують сірководень, не розріджують желатин.
Антигенна структура .
Антигенна структура складна. Є О-, Н-, К- (L, В, А), М-антигени, фімбріальні, рибосомні та багато інших антигенів. При сероідентифікації найбільше значення мають О-, Н-, К-антигени.
* Про - соматичний антиген, ліпополісахарид клітинної стінки, термостабільний, спиртостійкий, груповий (? 171 серогрупа).
* Н - джгутиковий антиген, білок флагеллін, типовий (понад 57 серотипів).
* К - капсульний антиген, кислий полісахарид, теж типовий (більше 97 серотипів). К-антиген не однорідний - залежно від стійкості до температури виділяють 3 його різновиди:
L – термолабільний антиген (руйнується при нагріванні до 600С);
А – термостабільний (витримує 2-3-годинне кип'ятіння);
В - проміжний термолабільності між А і L (витримує нагрівання до 60С протягом години, але руйнується при кип'ятінні).
Серовари ешерихій позначають із зазначенням антигенної формули: О26:К60: Н2…
Чинники патогенності.
1. Токсини:
* ендотоксин - чинить на організм людини пірогенну та токсичну (зниження АТ, нейротоксичність) дію, пригнічує фагоцитоз;
* Екзотоксин утворюють деякі штами кишкової палички:
Ентеротоскін (ЕТКП);
Цитотоксин з гемолітичною та некротичною дією (ЕІКП, ЕГКП).
2. Структурні та хімічні компоненти клітини:
* пили I (адгезія) та II (кон'югація) типів;
* капсула та Т-білок клітинної стінки (адгезія, пригнічення фагоцитозу);
* плазміди (у E. сoli виявлені Col-, R-, F-, Hly-, Ent-плазміди, а також плазміди, що кодують синтез факторів адгезії).
резистентність.
E. сoli мають хорошу виживання в зовнішньому середовищі, зберігаються в грунті і воді кілька місяців. При 56С гинуть протягом 1 години, нагрівання до 60С витримують трохи більше 15-20 хв, при кип'ятінні гинуть миттєво. Чутливі до дезінфікуючих засобів та антибіотиків.
Екологія та роль у патології.
Розрізняють умовно-патогенні та діареєгенніE. зoli.
Умовно-патогенні E. сoli входять до складу мікрофлори кишечника людини, ссавців, птахів, рептилій та риб. З випорожненнями E. сoli виділяються у довкілля. Кишкова паличка є санітарно-показовим мікроорганізмом, її виявлення свідчить про свіже фекальне забруднення об'єктів довкілля.
Умовно-патогенні E. сoli викликають ендогенні гнійно-запальні процеси різної локалізації (інфекції сечовивідних шляхів, нагноєння ран, холецистит, апендицит, перитоніт, кон'юктивіт, отит, пневмонії, менінгіти…) аж до сепсису.
Діареєгенні E. сoli є збудниками екзогенних інфекцій – ешеріхіозів (гострі кишкові захворювання, що протікають за типом ентеритів та ентероколітів) та харчові отруєння.
Епідеміологія
.
Захворювання, спричинені
E. сoli, поширене повсюдно.
Джерело інфекції : хворі та бактеріоносії.
Механізм передачі : фекально-оральний (шляхи: харчовий, контактно-побутовий та рідше водний).
Патогенез та клінічні прояви .
Діареєгенні серовари кишкової палички поділені на 5 груп:
* Ентеропатогенні (ЕПКП);
* Ентеротоксигенні (ЕТКП);
* Ентероінвазивні (ЕІКП);
* Ентерогеморагіческіе (ЕГКП);
* Ентероадгезивні (ЕАКП).
Крім вищеперелічених виділяють дифузноприлипні кишкові палички (поки недостатньо вивчені).
Морфологічно представники різних груп не відрізняються один від одного; їх диференціюють за антигенноїструктурі та за факторами патогенності.
ЕПКП - викликають ешеріхіоз у дітей до 1 року (частіше у дітей, які перебувають на штучному вигодовуванні). Збудники вражають епітелій тонкого кишечника: адсорбуючись на поверхні ентероцитів за рахунок білка зовнішньої мембрани (інтиміну), розмножуються тут і ушкоджують мікроворсинки, викликаючи їхнє відторгнення. Запальна реакція, що при цьому розвивається, обумовлена дією ендотоскіну, який звільняється при руйнуванні кишкових паличок. Основні клінічні прояви: діарея, блювання, відрижка їжі, ознаки зневоднення організму, гіпотрофія. Перебіг хвороби – тяжкий, може тривати тижнями.
ЕТКП викликають холероподібні захворювання у дітей та дорослих. За допомогою пилок вони прикріплюються до епітелію нижніх відділів тонкого кишечника, розмножуються завдяки CF (фактор колонізації) і продукують 2 типи токсинів: LT (термолабільний, за механізмом дії нагадує екзотоксин холерного вібріона) та ST (термостабільний). LT і ST збільшують у клітинах епітелію вміст цАМФ та цГМФ відповідно, що викликає порушення транспорту молекулярного заліза та підвищеного виходу води з клітин. Це порушує водно-сольовий баланс у кишечнику і призводить до розвитку рідкої діареї. Захворювання характером течії нагадує легку форму холери (у літературі його часто називають діареєю мандрівників).
ЕІКП викликають дизентерієподібне захворювання у дітей та дорослих. Адсорбуються на клітинах епітелію нижніх відділів товстої кишки, проникають усередину клітин, розмножуються, виділяють шигелоподібний токсин та руйнують клітини. Поширюючись міжклітинними просторами, вони вражають сусідні клітини, утворюючи виразки. Клінічні симптоми: спочатку - рідка діарея, потім у випорожненнях з'являється домішка слизу та крові.
ЕГКП – збудники геморагічної діареї та гемолітичного уремічного синдрому, вражаючи переважно дітей. Збудники виділяють шигелоподібний цитотоксин, що викликає руйнування ендотелію судин (блокує синтез білків на рибосомах) кишечника та нирок, внаслідок чого розвиваються ішемія та некроз клітин. Клінічно спостерігається геморагічний коліт (кривавий пронос) та гемолітичний уремічний синдром (гемолітична анемія та ниркова недостатність), які протікають важко та нерідко з летальним кінцем.
ЕАКП (описані в 1985 р.у) здатні швидко прикріплюватися до поверхні клітин та колонізувати різні відділи кишечника, але частіше вражають товсту кишку. Цитотоксинів вони не утворюють, клітини не проникають. Клінічно захворювання характеризується наполегливим діарейним синдромом.
Імунітет .
Після перенесення ешеріхіоз формується гуморальний типоспецифічний імунітет, спостерігається вироблення місцевого імунітету (SIgA). Утворюючі антитіла не мають протективних властивостей.
У дітей першого року життя пасивний трансплацентарний імунітет забезпечується антитілами і антитілами, що проходять через плаценту, що надходять з материнським молоком. Також з жіночим молоком передаються і мукополісахариди, що сприяють розмноженню лакто- та біфідобактерій – антагоністів збудників ешеріхіозів.
Мікробіологічна діагностика .
Досліджуваний матеріал: при кишкових ешеріхіозах – випорожнення, блювотні маси, у грудних дітей мазки із зіва, при ендогенній інфекції – матеріал з відповідного вогнища (сеча, рани, що відділяється, кров…).
1. Бактеріоскопічний метод.
2. Бактеріологічний метод (основний) – виділення чистої культури збудника, її ідентифікація, визначення чутливості до антибіотиків.
3. Серологічний метод:
* РА з полі-(ОВ) та моновалентними аглютинуючими ешеріхіозними сироватками;
4. Молекулярно-біологічний метод (ПЛР, ДНК-зонди).
Специфічна профілактика не розроблена .
Неспецифічна профілактика : рання діагностика, ізоляція хворих, регулярне профілактичне обстеження працівників дитячих закладів та ЛПЗ. Велике значення має суворе дотримання санепідрежиму у цих установах.
Принципи терапії : дієта, ХТП (нітрофурани, фторхінолони), при генералізованих формах - антибіотики з урахуванням чутливості, специфічне лікування - колі-бактеріофаг, лакто- та біфідовмісні пробіотики.
61. Патогенні ешерихії (збудники ешеріхіозів): систематика, морфологія, культуральні та тинкторіальні властивості, біохімічні особливості, антигенна структура та токсиноутворення, патогенез та клініка. Діареєгенні ешерихії, їх диференціація від умовно-патогенних. Мікробіологічна діагностика Профілактика та лікування.
Рід Escherichia.
Ешеріхії - найбільш поширені аеробні бактерії кишечника, здатні за певних умов викликати велику групу захворювань людини, як кишкової (діарея), так і позакишкової (бактеремія, інфекції сечовивідних шляхів та ін) локалізації. Основний вид – E.coli (кишкова паличка) – найпоширеніший збудник інфекційних захворювань, що викликаються ентеробактеріями. Цей збудник є показником фекального забруднення, особливо води. Коли – титр та коли – індекс часто використовували як санітарні показники. Ешеріхії входять до складу мікрофлори товстого кишечника ссавців, птахів, плазунів та риб.
Культуральні характеристики. На рідких середовищах E.coli дає дифузне помутніння, на щільних середовищах утворює S і R форми колоній. На основний для ешерихій середовищі Ендо лактозоферментуючі кишкові палички утворюють інтенсивно червоні колонії з металевим блиском, не ферментуючі - блідо-рожеві або безбарвні колонії з більш темним центром, на середовищі Плоскірєва - червоні з жовтуватим відтінком, на середовищі Левіна - темно .
Біохімічні властивості. Кишкова паличка в більшості випадків ферментує вуглеводи (глюкозу, лактозу, маніт, арабінозу, галактозу та ін) з утворенням кислоти і газу, утворює індол, але не утворює сірководень, не розріджує желатин.
Антигенна структура. Якісь істотні морфологічні відмінності між патогенними і непатогенними кишковими паличками не виявлені. Їхня диференціація заснована на вивченні антигенних властивостей. Серед поверхневих антигенів виділяють полісахаридні О-антигени, джгутикові Н-антигени та капсульні полісахаридні К-антигени. Відомо більше 170 варіантів О-антигенів (це відповідає приналежності збудника до певної серогрупи) та 57 - Н-антигенів (приналежність до серовару). До складу діареєгенних (що викликають діарею) кишкових паличок входять 43 О-групи та 57 ОН- варіантів.
Основні фактори патогенності діареєгенних E.coli.
1. Фактори адгезії, колонізації та інвазії, пов'язані з пилками, фімбріальними структурами, білками зовнішньої мембрани. Вони кодуються плазмідними генами та сприяють колонізації нижніх відділів тонкої кишки.
2. Екзотоксини: цитотонини (стимулюють гіперсекрецію клітинами кишечника рідини, порушують водно-сольовий обмін та сприяють розвитку діареї) та ентероцитотоксини (діють на клітини стінки кишечника та ендотелію капілярів).
3. Ендотоксин (ліпополісахарид).
Залежно від наявності різних факторів патогенності діареєгенні кишкові палички поділені на п'ять основних типів: ентеротоксигенні, ентероінвазивні, ентеропатогенні, ентерогеморагічні, ентероадгезивні.
4. Для патогенних кишкових паличок характерне вироблення бактеріоцинів (коліцинів).
Ентеротоксигенні E.coli мають високомолекулярний термолабільний токсин, схожий на дію з холерним, викликають холероподібну діарею (гастроентерити у дітей молодшого віку, діарею мандрівників та ін.).
Ентероінвазивні кишкові палички здатні проникати та розмножуватися у клітинах епітелію кишечника. Викликають профузну діарею з домішкою крові та великою кількістю лейкоцитів (показник інвазивного процесу) у випорожненнях. Клінічно нагадує дизентерію. Штами мають деяку подібність із шигелами (нерухомі, не ферментують лактозу, мають високі ентероінвазивні властивості).
Ентеропатогенні E.coli – основні збудники діареї у дітей. В основі уражень – адгезія бактерій до епітелію кишечника з ушкодженням мікроворсинок. Характерна рідка діарея і виражене зневоднення.
Ентерогеморагіческіе палички викликають діарею з домішкою крові (геморагічний коліт), гемолітико – уремічний синдром (гемолітична анемія у поєднанні з нирковою недостатністю). Найбільш частий серотип ентерогеморагічних кишкових паличок – О157: Н7.
Ентероадгезивні E.coli не утворюють цитотоксини, слабо вивчені.
Епідеміологія. Основний механізм поширення діареєгенних кишкових паличок – фекально – оральний. Зараження може відбуватися через їжу, воду при догляді за тваринами. Оскільки ешерихії мешкають у кишечниках багатьох видів тварин, конкретне джерело зараження встановити складно. Контактний шлях зараження може бути у закритих закладах. Ентеропатогенні та ентероінвазивні E.coli – найчастіші причини внутрішньолікарняних спалахів ешеріхіозів.
Лабораторна діагностика. Основним підходом є виділення чистої культури на диференційно-діагностичних середовищах та її ідентифікація за антигенними властивостями. Ставлять РА з набором полівалентних ОК (до - і К - антигенів) сироваток, потім - адсорбованих О - сироваток і прогрітими при 100 градусах Цельсія (для руйнування К - антигенів) культурами.
Біохімічна диференціація має додаткове значення. Ідентифікація діареєгенних типів можлива при виявленні специфічних маркерів (ентерогеморагічні кишкові палички не ферментують сорбіт, а серовар О157: Н7 не виявляє бета – глюкуронідазної активності).