Ta rod predstavlja samo ena vrsta bakterij - E. coli, vendar združuje številne možnosti. Sorte E. coli se razlikujejo po bioloških lastnostih, imajo lahko različne sklope encimov (biovarje) in različno antigensko strukturo (serovarje).
Escherichio coli je leta 1888 prvi izoliral Escherich iz človeških iztrebkov in jo poimenoval po njem.
Naravni habitat E. coli je človeško črevo. E. coli je predstavnik normalne črevesne mikroflore.
V procesu življenja E. coli proizvaja encime, ki pospešujejo prebavo (na primer razgrajujejo vlakna), sintetizira nekatere vitamine (na primer vitamine B). Poleg tega imajo te bakterije antagonistični učinek proti patogenim mikroorganizmom, kot so povzročitelji dizenterije, tifusa in toksičnih okužb. Odsotnost Escherichia coli v debelem črevesu vodi v resno bolezen - disbakteriozo. V tem primeru je motena normalna sestava črevesne mikroflore, razvijejo se proteus, kokalna flora, glive itd.
Z zmanjšanjem odpornosti telesa (stradanje, prekomerno delo itd.) Lahko Escherichia prodre v druge organe in tkiva ter povzroči hude patološke procese. Tako lahko domnevamo, da so Escherichia tipični pogojno patogeni mikroorganizmi: v normalnih pogojih so saprofiti, ko se razmere spremenijo, pa povzročajo bolezni.
E. coli, ki izstopa z blatom, vstopi v zunanje okolje. Odkrivanje E. coli v zemlji, vodi in drugih predmetih kaže na njihovo fekalno kontaminacijo, določanje količine E. coli (coli-titer, coli-indeks) pa označuje sanitarno stanje predmeta (glej "Sanitarna mikrobiologija" ).
Morfologija. E. coli so kratke, povprečno 0,5-3,0 × 0,5-0,8 µm palice. po Gramu negativna. V večini primerov so mobilni, peritrihalni. Vendar pa nekatere različice E. coli niso gibljive. Mnogi sevi tvorijo kapsulo. Spor se ne oblikuje.
gojenje. E. coli je fakultativni anaerob. Dobro raste na preprostih hranilnih medijih pri 37 ° C in pH 7,2-7,8. Sevi E. coli, izolirani iz črevesja ljudi in živali, se razvijejo že pri 43-45°C, medtem ko se Escherichia coli hladnokrvnih živali v teh pogojih ne razmnožuje. Ta razlika v lastnostih E. coli različnega izvora se uporablja za določitev sanitarnega stanja objekta, saj le odkritje toplokrvne E. coli kaže na sanitarni problem.
Escherichia coli na MPA tvori motne, rahlo konveksne, vlažne kolonije z gladkim robom. Na MPB daje enakomerno motnost. Kapsulirane kulture rastejo kot sluzaste kolonije.
Za identifikacijo Escherichia se uporabljajo diferencialno diagnostični mediji: Endo in agar z eozinmetilen modrim (EMS). Na Endovem gojišču E. coli raste kot škrlatno rdeče kolonije s kovinskim leskom ali brez njega. Na mediju EMS - v obliki temno vijoličnih kolonij.
Encimske lastnosti. E. coli ima pomembno encimsko aktivnost. Razgradijo laktozo, glukozo, manitol, maltozo, saharozo in druge ogljikove hidrate ter alkohole s tvorbo kisline in plina. Proteolitske lastnosti: tvori indol. Želatina se ne razgradi. Nekateri biovari ne fermentirajo laktoze in saharoze (Tabela 29).
Opomba, kg - tvorba kisline in plina; + prisotnost znaka; - pomanjkanje znaka.
Toksigenost. Escherichia ima endotoksin (ligopolisaharid).
Antigenska struktura. Escherichia se razlikuje po antigenski strukturi mikrobne celice, kar je osnova za razvrstitev bakterij tega rodu. Poznamo tri vrste antigenov Escherichie: O-antigen (somatski), K-antigen (kapsularni) in H-antigen (flagelatni). Termostabilni O-antigen je lipopolisaharidno-proteinski kompleks, ki se nahaja v bakterijski celični steni. O-antigen določa, ali kultura pripada serološki skupini. Opisanih je več kot 170 takih skupin. Nekatere komponente O-antigena so skupne različnim O-skupinam Escherichia, včasih pa tudi drugim enterobakterijam (Shigella, Salmonella itd.). Escherichia K-antigeni so različni: A, B, L in M. Antigena A in M sta termostabilna, B in L pa termolabilna. K-antigen se nahaja v mikrobni celici bolj površinsko kot O-antigen, zato v njegovi prisotnosti ne pride do reakcije aglutinacije žive kulture z O-serumom. Za identifikacijo O-antigena kulturo segrevamo eno uro pri 100 ° C: K-antigen se med segrevanjem uniči in O-antigen postane sposoben interakcije s serumom. Ugotovljeno je bilo, da imajo Escherichia okoli 100 vrst K-antigenov, predvsem tipa B-antigen (termolabilni). H-antigen je prisoten le v gibljivih sevih, saj je povezan z bički. Escherichia pozna več kot 50 tipov H-antigena. Z določitvijo H-antigena je mogoče ugotoviti serovariant izolirane kulture (slika 40).
Značilnosti antigenske sestave izolirane kulture Escherichie so podane na podlagi rezultatov aglutinacijske reakcije s serumi, ki vsebujejo O-, K- in H-protitelesa. Hkrati se določi, kateri antigeni so prisotni v kulturi, njihova kombinacija pa označuje antigensko formulo izolirane kulture, to je njeno serovarianto. Tabela 30 prikazuje primere antigenske strukture nekaterih serovaniant E. coli, katerih antigeni K so antigeni B.
Če kulturo aglutiniramo z OK-serumom OP1:K58 (B4) in H-serumom "6", potem izoliramo serovaniantno E. coli O111:B4:H6; če opazimo reakcijo aglutinacije z OK-serumom O26:K60 (B6) in s H-serumom "11", izoliramo kulturo E. coli 026:B6:H11 itd.
Poleg določanja serovariant E. coli je možno določiti tudi fagovar izolirane kulture. Obstajajo sklopi bakteriofagov, ki lizirajo Escherichia posameznih seroloških skupin. Glede na lizo kulture eden od fagov vzpostavi svoj fagovar. Opredelitev fagovarjev je epidemiološko pomembna.
Antagonistični učinek E. coli, njihova sposobnost zatiranja rasti gnitnih in patogenih bakterij se uporablja za ustvarjanje bakterijskih pripravkov za zdravljenje disbakterioze in različnih črevesnih bolezni (kolibakterin, bifikol).
Odpornost na okolje. E. coli je precej odporna. Pri 55 ° C umrejo v eni uri, pri 60 ° C - v 15 minutah. V zemlji in vodi ostanejo do 2-3 mesece, v mleku pa ne le ostanejo, ampak se tudi razmnožujejo. Raztopine dezinfekcijskih sredstev (3% kloramin, raztopina sublimata 1:1000 itd.) jih ubijejo v 20-30 minutah. E. coli je še posebej občutljiva na briljantno zeleno.
Občutljivost živali. Escherichia nekaterih seroloških skupin je patogena za različne živali in pri njih povzroča bolezni prebavil. Od laboratorijskih živali so na E. coli najbolj občutljivi morski prašički, kunci, bele miši. Odvisno od načina vnosa povzroča kultura Escherichia coli različne patološke procese: vnetje in absces pri podkožnih injekcijah, peritonitis in sepso pri intraperitonealni in intravenski aplikaciji.
Viri okužbe. Bolan človek. V tem primeru bakterije vstopijo v telo iz zunanjega okolja (eksogena okužba). E. coli lahko povzroči tudi razvoj patološkega procesa "od znotraj" (endogena okužba).
Prenosne poti. Glavna pot prenosa pri eksogeni obliki okužbe je kontaktno gospodinjstvo (posredni stik). Povzročitelji se lahko prenašajo na umazanih rokah, skozi posodo, igrače, spodnje perilo, hrano, muhe.
Patogeneza. Bolezni, ki jih povzroča Escherichia, se imenujejo Escherichiosis. Razvoj escherichiosis je odvisen od poti vnosa povzročitelja v telo in od serološke skupine, ki ji povzročitelj pripada. Ko bakterije vstopijo skozi usta, se lahko pojavijo črevesne bolezni pri otrocih in odraslih. Nekatere O-skupine Escherichia (serovari) so najpogosteje povzročitelji človeških bolezni. Te bakterije imenujemo enteropatogena Escherichia coli (EPEC). Trenutno je znanih veliko variant EPKD, ki povzročajo drugačen potek escherichiosis. Obstaja več skupin EKPC:
skupina I - povzročitelji kolienteritisa pri majhnih otrocih (seroskupine O111, O26, O55, O86 itd.);
skupina II - povzročitelji dizenteriji podobnih bolezni pri otrocih in odraslih (O25, O124, O143, O144 itd.);
skupina III - povzročitelji bolezni, podobnih koleri (O1, O5, O6, O78 itd.).
Ko pride v hrano, se lahko E. coli v njih razmnoži. Uživanje takšnih živil vodi v razvoj zastrupitve s hrano.
Razvoj endogene okužbe vodi do poškodb različnih organov: vnetje žolčnika (holecistitis), mehurja (cistitis), zastrupitev krvi (sepsa) itd.
Imuniteta. Imunost se razvije samo proti eni serovariant Escherichia - povzročitelja te bolezni. Raznolikost Escherichie praktično naredi to imuniteto neučinkovito. Pri razvoju imunskega stanja pri obolelih otrocih je zelo pomembna tvorba protiteles IgM, ki ne prehajajo skozi posteljico in se torej ne prenašajo z matere. Protitelesa IgA proti ešerihiji se prenašajo na otroka od matere z materinim mlekom.
Preprečevanje. Skladnost z osebno higieno in sanitarno-higienskim režimom. Specifične profilakse ni.
Zdravljenje. Antibiotiki: ampicilin, tetraciklin itd. Trenutno se proizvaja fag koliproteusa, katerega uporaba daje dobre rezultate.
Kontrolna vprašanja
1. Katere so glavne značilnosti črevesnih bakterij?
2. Katere antigene ima Escherichia?
3. Katera zdravila se pripravljajo iz Escherichie coli?
Mikrobiološke raziskave
Namen študije: izolacija in identifikacija EPC.
Raziskovalno gradivo
1. Gibanje črevesja.
2. Bruhanje.
Po potrebi pregleda izcedek iz nosu in žrela, gnoj iz ušesa, kri, urin, koščke organov trupla.
Ko pride do žarišča bolezni coli-enteritisa, se pregledajo prehrambeni izdelki, izpiranje iz rok spremljevalcev, igrače in drugi predmeti (glede na epidemiološke indikacije).
Opomba. Čim prej od začetka bolezni se pregleda blato, večja je možnost izolacije povzročitelja.
Glavna raziskovalna metoda
Bakteriološki
Napredek raziskav
Drugi dan raziskovanja
Skodelice, posejane prejšnji dan, se odstranijo iz termostata in jih pregledajo v vpadni ali presvetli svetlobi. V prisotnosti malinasto rdečih kolonij na Endovem gojišču (z ali brez kovinskega sijaja) ali vijoličnih na gojišču EMS se izvede poskusna reakcija aglutinacije na steklu za razlikovanje EPP od drugih sort Escherichia.
Za postavitev poskusne reakcije aglutinacije se izbere najmanj 10 izoliranih kolonij, ki se označijo ali oštevilčijo na zadnji strani posode; del vsake ciljne kolonije odstranimo z zanko in aglutiniramo v kapljici polivalentnega seruma ali imunoglobulina. Testiramo le del kolonije, da lahko v primeru pozitivne aglutinacijske reakcije iz preostalega dela kolonije izoliramo čisto kulturo.
Tipični ali polivalentni escherichialni serumi (ali imunoglobulini) se proizvajajo v proizvodnih pogojih. Polivalentni OK serumi Escherichie (ali OK imunoglobulini) vsebujejo protitelesa proti več antigenom Escherichie O in K. Z njihovo pomočjo se okvirno ugotovi, da izolirana kultura pripada EPKP. Na primer, polivalentni serum O26, O55, O111 omogoča identifikacijo kultur Escherichie z istim imenom. Serumi se razredčijo, kot je navedeno na etiketi.
V laboratoriju lahko pripravimo mešanico posameznih OK serumov tako, da združimo največ 5 serumov, tako da razredčitev vsakega ne presega 1:10.
Nastavitev poskusne reakcije aglutinacije. Na eno ali dve dobro razmaščeni stekelci nanesemo 10 kapljic polivalentnega seruma (ali imunoglobulina). Vsaki kapljici dodamo del predvidene kolonije in zdrobimo. Kolonije, ki so dale aglutinacijsko reakcijo, presejemo v epruvete s poševnim agarjem in postavimo v termostat za 18-20 ur.Če nobena od 10 kolonij ni dala aglutinacijske reakcije, odgovorimo negativno.
Tretji dan raziskovanja
Pridelke vzamemo iz termostata in si jih ogledamo. Na MPA tvori enteropatogena Escherichia coli navadno vlažen, sijoč, sivkast nanos, manj pogosto je moten. Kulturo, vzgojeno na poševnem agarju, ponovno preverimo v aglutinacijski reakciji na steklu s polivalentnimi serumi Escherichie (ali imunoglobulini). Če izbrana kultura daje aglutinacijsko reakcijo s polivalentnim serumom (imunoglobulinom), jo aglutiniramo z vsakim tipičnim serumom (imunoglobulinom) posebej v razredčitvi 1:5 - 1:10. Aglutinacija z živo kulturo je indikativna.
Nato je treba z biološkimi testi potrditi pripadnost izolirane kulture rodu Escherichia. Da bi to naredili, kulturo posejemo na poltekoče Gissove medije z laktozo, glukozo, manitolom, saharozo, maltozo in drugimi sladkorji, pa tudi na brozgo ali peptonsko vodo, da določimo tvorbo indola in vodikovega sulfida. Da bi to naredili, dva indikatorska papirja, navlažena z reagenti, ki zaznavajo nastanek teh snovi, spustimo v epruvete pod pluto. En kos papirja postane rdeč v prisotnosti indola, drugi pa črni v prisotnosti vodikovega sulfida.
Med fermentacijo sladkorjev postane reakcija medija kisla in barva indikatorja se spremeni. Če poleg kisline nastane še plin, se v mediju pojavijo mehurčki. Istočasno se določi mobilnost bakterij: inokulacija se izvede v poltekočem (0,2%) agarju z injekcijo. Gibljive bakterije povzročajo motnost celotnega okolja, nepremične - rastejo samo z injekcijo.
Za končno identifikacijo izolirane kulture izvedemo podrobno reakcijo aglutinacije z živimi in segretimi kulturami: z živimi - za določitev K-antigena, s segretimi - za določitev O-antigena. Za postavitev podrobne reakcije aglutinacije pripravimo antigen na naslednji način: 3-5 ml izotonične raztopine natrijevega klorida speremo s kulture s poševnega agarja. Nastalo suspenzijo vlijemo v dve epruveti. Enega od njih segrevamo v vodni kopeli pri 100 ° C eno uro.
Podaljšano reakcijo aglutinacije postavimo v dve vrsti epruvet. Serum v obeh vrstah razredčimo v razmerju 1:50 - 1:100 (v 1. epruveti) do titra, ki je naveden na nalepki ampule seruma. V prvo vrsto dodamo 2 kapljici žive kulture, v drugo pa 2 kapljici segrete kulture.
Epruvete pretresemo in postavimo v termostat za 18-24 ur.
Četrti dan raziskovanja
Zabeležene so spremembe v Hissovem okolju, zabeležen je nastanek indola in vodikovega sulfida.
Večina predstavnikov Escherichia fermentira ogljikove hidrate s tvorbo kisline in plina, razgradi beljakovinski hranilni substrat, da nastane indol.
Upoštevanje reakcije aglutinacije v epruveti se izvede z uporabo povečevalnega stekla ali aglutinoskopa. Aglutinacija z živo kulturo je grobozrnata, z mrtvo kulturo pa drobnozrnata. Reakcija se šteje za pozitivno, če opazimo aglutinacijo s segreto kulturo v serumu, razredčenem vsaj za polovico serumskega titra, živo kulturo pa aglutiniramo s serumom, razredčenim najmanj 1:200. Pomembno vlogo igra tudi razmerje med protitelesi proti segreti in živi kulturi. Razredčitev seruma, pri katerem opazimo aglutinacijo s segreto kulturo, mora vsaj 2-krat presegati razredčino seruma, v katerem je aglutinirana živa kultura. V tabeli. 31 prikazuje različne možnosti za rezultat reakcije aglutinacije.
Opomba. Možne so tri možnosti reakcije: 1) segreto kulturo aglutiniramo s serumom v višjih razredčinah kot živo, reakcija je pozitivna; 2) živa in segreta kultura daje aglutinacijo v istih razredčinah seruma. Tak rezultat lahko kaže na odsotnost K-antigena v kulturi; aglutinacijo živih in segretih kultur povzroči O-antigen. V teh primerih je treba ponoviti reakcijo aglutinacije; 3) aglutinacija žive kulture v odsotnosti aglutinacije s toploto vam omogoča negativen odgovor. Očitno je, da v kulturi ni O-antigena, ki bi ustrezal O-protitelesom v serumu (slika 41).
Kontrolna vprašanja
1. Kateri material se pregleda za izolacijo Escherichie?
2. Katere serume lahko uporabimo za razlikovanje EPKD?
3. Zakaj se izvaja podaljšana reakcija aglutinacije z živimi in segretimi kulturami Escherichie?
1. Od učitelja dobite petrijevke s kulturo, nacepljeno na gojišče Endo, in nacepite na epruveto s poševnim agarjem.
2. Od učitelja vzamemo kulturo EPP na poševnem agarju, speremo z izotonično raztopino natrijevega klorida. Topel del pranja v vodni kopeli pri 100 ° C. Serum razredčimo v dveh vrstah epruvet in nastavimo reakcijo aglutinacije, kot je opisano zgoraj.
Hranilni mediji
Diferencialni mediji Endo in EMS se uporabljajo za gojenje črevesnih bakterij. Na voljo v obliki suhega prahu. V skladu z navodili na etiketi stehtamo določeno količino suhega medija, ga raztopimo v ustrezni količini vode, med mešanjem zavremo in vlijemo v sterilne petrijevke.
Je v vašem zasebnem življenju nepomembna praznina? Brez stalne punce? Te zapeljive kurbe bodo v dobrem položaju, da zadovoljijo vaše spolne želje na ljubke načine.
Tečajna naloga
Biološke značilnosti Escherichia coli
Uvod
Escherichioza (kolibaciloza) - akutna bakterijska nalezljiva bolezen mladih domačih živali, vključno s pticami (večinoma do 2 tednov starosti), ki se kaže z obilno drisko, znaki hude zastrupitve in dehidracijo telesa.
Poteka v črevesnih, septičnih in enterotoksemičnih oblikah. Ugotovljenih je bilo več kot 150 vrst. Pri domačih živalih in ljudeh je poznanih več kot deset serotipov Escherichie coli, ki povzročajo kolibacilozo.
Splošno sprejeto je, da E. coli živi v črevesju živali. Praviloma ne povzroča bolezni.
Material za izolacijo Escherichia coli so okoljski predmeti (voda, zemlja, brisi različnih predmetov), v primeru bolezni - iztrebki, bruhanje, urin, vsebina dvanajstnika ali kri, pa tudi živila, za katera obstaja sum, da so vir okužbe. Material posejemo na diferencialno diagnostična gojišča, čemur sledi izolacija čiste kulture E. coli. Identifikacija se izvaja s preučevanjem morfoloških, biokemičnih in antigenskih značilnosti. Zadnji korak je določitev biovarja Escherichie coli, zlasti seroskupine in serovarja.
1.Zgodovinska referenca
coli patogena bolezen
Escherichia coli
(Bakterije iz skupine Escherichia coli) Leta 1885 je Escherich odkril mikroorganizem, ki so ga poimenovali Escherichia coli (Escherichia coli). Ta mikroorganizem je stalni prebivalec debelega črevesa ljudi in živali. V skupini črevesnih bakterij so poleg E. coli epifitske in fitopatogene vrste ter vrste, katerih ekologija (izvor) še ni ugotovljena. Med bakterije skupine Escherichia coli spadajo rodovi Escherichia (tipični predstavnik E. coli), Citrobacter (tipični predstavnik Citr. coli citrovorum), Enterobacter (tipični predstavnik Ent. aerogenes), ki so združeni v eno družino Enterobacteriaceae zaradi skupne morfološke in kulturne lastnosti. Zanje so značilne različne encimske lastnosti in antigenska zgradba.
Prvič je bolezen pri teletih leta 1891 ugotovil K. Ieysen na Danskem. V strokovni literaturi je znanih veliko sinonimov, pod katerimi je bila opisana patologija: kolibaciloza, kolisepsa, kolienteritis, koli-driska, "bela driska pri teletih", toksična dispepsija. Patologija ima globalno razširjenost, ki jo spremljajo velike izgube. V Nemčiji je pojavnost kolibaciloze pri teletih v tridesetih letih dosegla 42-48%, med žrebeti - 19,7%. V Franciji je bila v nekaterih letih na nekaterih farmah smrtnost živali 40-55 %. V ZDA so izgube zaradi kolibaciloze opredeljene kot 10% celotne incidence telet. Bolezen mladih živali z različnimi kazalniki opazimo v vseh državah Evrope, Azije itd. (Ya.E. Kolyakov, 1970).
V Rusiji je bolezen registrirana v vseh regijah. Na kmetijah Amurske regije v letih 1946-1969 je med teleti, ki so poginili prvi dan življenja, število pozitivnih laboratorijskih izvidov za kolibacilozo znašalo 28,7% števila vzorcev, preučenih med starimi teleti. 2-3 dni - 34%, 4-7 dni - 22,5%, 8-14 dni - 19,4%, 15-21 dni - 14,3%. Raziskanih je bilo 3829 vzorcev patološkega materiala (Yu.P. Mozzhukhin, 1971). V Primorju je bilo v letih 1967-1970 opravljenih 746 pregledov za kolibacilozo, od katerih je bilo vsako leto od 38% do 55% pozitivnih (E.A. Kiryanov, 1974). Smrtnost v posameznih izbruhih bolezni pri teletih je dosegla 46,6%, v povprečju na leto pa 32%. (E.A. Kiryanov, 1977, 1979). V Habarovskem ozemlju je bilo v študiji 258 vzorcev, obdelanih v letih 1972-1975, število pozitivnih potrditev kolibaciloze telet 12,4%. Primeri kolibaciloze med pujski v teh letih niso bili diagnosticirani (E.A. Kiryanov, M.F. Sosnin, 1978). Na Sahalinu v letih 1972-1976 je bilo število pozitivnih primerov diagnoze kolibaciloze pri teletih v razponu od 2,1 do 46,2%. (E.A. Kiryanov, V.G. Kurdyukov et al., 1981). V Amurski regiji v letih 1972-1976 je bilo pregledanih 1696 predmetov za kolibacilozo, teleta, pogostost pozitivnih rezultatov po letih je bila med 15,4-27,9%, med pujski - 17,3-35%. Raziskanih je bilo 287 trupel (E.A. Kiryanov, I.F. Tyutrin, 1981). Kolibaciloza na območju Daljnega vzhoda je bila v analiziranih letih zabeležena tudi pri kunah, pticah in zajcih.
2. Biološka karakterizacija
.1 Morfološke lastnosti
E. coli so majhne (2 - 3 mikrone dolge, 0,5 - 0,7 mikronov široke) gramnegativne paličice z zaobljenimi konci. Ultrastruktura je podobna drugim gramnegativnim bakterijam. V brisih so razporejeni naključno, ne tvorijo spor, peritrihous (flagele se raztezajo vzdolž oboda bakterije). Escherichia coli je mobilna. Nekateri sevi so mikrokapsulirani, pili.
E. coli ne tvori spor.
2.2 Kulturne znamenitosti
Temperaturni optimum za rast Escherichia je 37 ° C, pH 7,2 ... 7,4, fakultativni anaerob je nezahteven za hranilne medije.
Pri setvi na mesno-peptonsko juho (MPB), mesno-peptonski agar (MPA):
Na MPB dajejo obilno rast s precejšnjo motnostjo medija; usedlina je drobna, sivkaste barve, zlahka lomljiva. Oblikujejo parietalni obroč, film na površini brozge je običajno odsoten.
Na MPA so kolonije prozorne s sivkasto modrim odtenkom, ki se zlahka zlijejo med seboj (glej Dodatek 2).
Pri sejanju na diferencialne medije:
na Endovem gojišču tvorijo ploščate rdeče kolonije srednje velikosti s temno kovinskim leskom (E. coli). (Glej dodatek 3)
na Levinovem gojišču Escherichia coli dajejo kolonije, obarvane v barvo indikatorja, saj lahko razgradijo laktozo, ki je v teh gojiščih.
na Hissovem mediju lahko Escherichia coli tvori plin. Na selektivno-diferencialnih gojiščih kolonije prevzamejo barvo, ki ustreza barvi gojišča.
na mediju Ploskireva - rdeče z rumenim odtenkom ali brezbarven.
na krvnem agarju (KA) lahko povzroči popolno hemolizo.
2.3 Biokemijske lastnosti
E. coli proizvaja številne saharolitične encime, hitro fermentira glukozo in druge ogljikove hidrate, najpogosteje s tvorbo kisline in plinov. Skoraj vsi biotipi Escherichia coli nenehno fermentirajo manitol, arabinozo, maltozo s tvorbo kisline; več kot 90% sevov - laktoza, sorbitol; občasno - saharoza, rafinoza, ramnoza, ksiloza, dulcit, salicin; adonit in inozitol praviloma ne fermentirata. E.coli ne uporablja amonijevega citrata, natrijevega malonata, ne raste na gojišču s kalijevim cianidom, ne reducira nitratov in nitritov, ne razgrajuje sečnine, ne utekočini želatine, večina sevov tvori indol in ne sprošča H 2S. Escherichia coli daje pozitivno reakcijo z metilrotom in negativno Voges-Proskauerjevo reakcijo: (Za postavitev Voges-Proskauerjeve reakcije dodamo 1 kubični cm 6% alkoholne raztopine alfa-naftola k 2,5 cc bakterijske kulture, in nato 0,4 kubičnih cm 40% vodne raztopine KOH, epruveto temeljito pretresite in po 3-5 minutah upoštevajte rezultate. Če je v kulturi prisoten acetilmetilkarbinol, se obarva rožnato - pozitivna reakcija, rumena barva kultura kaže negativno reakcijo, pri dvomljivi reakciji se kultura obarva svetlo oranžno.). E. coli ne sintetizira encimov citokrom oksidaze in fenilalanin deaminaze, dekarboksilira lizin, ornitin in nedosledno dehidrolizira arginin. Zvijte mleko.
2.4 Antigenska struktura
Glede na antigenske in, kar je najpomembneje, toksinogene lastnosti obstajata dve različici E. coli:
oportunistična E. coli;
patogeni bacili, ki povzročajo drisko.
E. coli vsebuje O-, K- in H-antigene. O (somatski) - antigeni v E. coli so povezani z lipopolisaharidom (LPS) celične stene. Imunokemična specifičnost O-antigena je določena s sestavo heksasaharidov v ponavljajočih se enotah končnega odseka polisaharidne verige, ki je na drugem koncu preko 2-keto-3-deoksioktonata (KDO) povezana z lipidom A. Na primer, struktura LPS enega od sevov Escherichia coli je predstavljena na naslednji način:
Število sladkorjev v isti končni povezavi, kot tudi število determinantnih povezav v različnih seroloških skupinah Escherichia, ni enako. Specifičnost O-antigenov Escherichia coli se običajno določi v aglutinacijski reakciji z O- ali OB-aglutinirajočimi serumi na stekelcu, manj pogosto z drugimi metodami.
K-antigeni so površinski antigeni, ki so povezani s kapsulo in z LPS bakterije Escherichia coli. Delimo jih na A-, B- in L-antigene, ki se med seboj razlikujejo po občutljivosti na visoke temperature in kemična sredstva. Najvišja toplotna odpornost (do 100°C za 2 ½ uro), alkohola in 1 N. Raztopina HCl ima A-antigen, najmanj stabilen L-antigen. V večini Escherichia coli so antigeni K kisli polisaharidi, ki vsebujejo uronske kisline. Nekateri antigeni K vsebujejo samo beljakovine. E. coli s K-antigeni se ne aglutinira s homolognim serumom O-coli. Ta lastnost je neločljivo povezana z živimi kulturami in se izgubi, ko jih prekuhamo ali avtoklaviramo. Prisotnost K-antigenov ugotavljamo tudi v reakciji adsorpcije aglutininov in v imunoelektroforetskih študijah.
H-flagelirani ali flagelarni antigeni so lastni aktivno gibljivim sevom. Povezani so z beljakovino flagelin in določajo vrsto imunokemijske specifičnosti Escherichie coli. H-antigeni so termolabilni. Pri kuhanju 2½ se popolnoma uničijo ure.
V E. coli je opisanih okoli 170 antigenov O, 97 antigenov K in 50 antigenov H. Sevi Escherichia coli, opremljeni z migetalkami, vsebujejo proteinske ciliarne antigene. Najdemo jih v reakciji hemaglutinacije.
Escherichia coli je označena z antigenskimi formulami: na prvem mestu je številka O-antigena, na drugem je število K-antigena, na tretjem pa H-antigen. Vrsta K-antigena je navedena v oklepajih. Na primer K(B) ali K(L). Številke O-, K- in H-antigenov so ločene z dvopičji. Glede na antigenske formule se ugotovi pripadnost proučevanega seva določeni serološki skupini.
Epizootske izbruhe kolibaciloze najpogosteje povzročajo patogeni sevi Escherichia naslednjih seroloških skupin:
pri teletih - 08, 09, 015, 020, 026, 035, 078, 086, 0101, 0115, 0117, 0119, 0141, redkeje 02, 033, 041, 055, 0103, 0127, 0137;
pri pujskih - 06, 026, 033, 0101, 0136, 0139, 0141, 0142, 0149, 0152, 0157;
pri jagnjetih - 04, 08, 09, 015, 020, 028, 035, 041, 078, 0101, 0137;
pri pticah - 01, 02, 08, 015, 018, 026.055, 078, 0111, 0113, 0128, 0141.
2.5 Plazmidi
E. coli lahko vsebuje različne plazmide: profage, faktor plodnosti, kolicinogeni faktor, faktor odpornosti, antigenski faktor, enterotoksigenski faktor in druge. Profagi lahko povzročijo spremembe v posameznih znakih Escherichia coli, na primer O-antigen (lizogenija (iz grščine l ý sis - razgradnja, razpad in ... geneia - izvor, nastanek), genetsko pogojena sposobnost bakterij, da lizirajo s sproščanjem bakteriofaga več generacij po neposredni okužbi z njim. Teorijo lizogenije sta leta 1950 razvila francoska znanstvenika A. Lvov in A. Gutman, ki sta pokazala, da je lizogeno stanje povezano s prisotnostjo potencialno nalezljive strukture, profaga, v bakterijskih celicah. V vsaki generaciji lizogenih bakterij je zelo majhen delež celic (~1 celica na milijon) podvržen lizi, pri čemer se sprosti 70 do 150 delcev tako imenovanega zmernega faga. Pogostost prehoda profaga v infekcijsko stanje (indukcija profaga) lahko povečajo številni dejavniki (npr. ultravijolični žarki). Po okužbi bakterijske celice z zmernim fagom se lahko proces okužbe razvije v eno od dveh smeri: po poti litičnega cikla, ki se tako kot pri okužbi bakterij z virulentnimi fagi konča z lizo celice in sproščanjem potomstvo faga v okolje; na poti lizogenizacije, ko se kot posledica biosintetskih procesov v celici razvije imunost na okuženega faga, se DNK faga vključi v DNK bakterije in se nato skupaj z njo replicira kot njena komponenta (profag) in bakterija preživi in postane lizogena. Usoda celice se odloči v prvih fazah okužbe in je odvisna predvsem od časa oblikovanja imunosti. Če se stanje imunosti pojavi, preden razvoj okužbe doseže stopnjo, ki nepovratno vodi do lize, lahko pride do lizogenizacije. Genom bakterij lahko hkrati vsebuje profage več različnih fagov (spolni in lizogeni). V tem primeru je celica imuna na vse te fage. Zaradi lizogenizacije se lahko spremenijo nekatere lastnosti bakterijske celice (tako imenovana lizogena konverzija), zaradi pridobivanja novih genetskih informacij s strani bakterije. Umetno pridobljene lizogene bakterije se po svojih lastnostih ne razlikujejo od lizogenih bakterij, ki jih najdemo v naravnih razmerah. V majhnem delu potomcev lizogene celice pride do "zdravljenja" - izgube profaga. Celice, ki so izgubile profage, povzročijo nelizogene linije. Pogostost tega procesa je mogoče povečati na primer z delovanjem ultravijoličnih žarkov. Torej lizogenija. - zapletena oblika virusne okužbe pri bakterijah, pri kateri od trenutka okužbe bakterije s fagom do lize celic preteče veliko število celičnih generacij).
F-plazmidi določajo spolno polarnost in povzročajo nastanek spolnih migetalk (sex-pili). Col plazmidi nadzorujejo proizvodnjo kolicinov, ki zavirajo rast filogenetsko sorodnih bakterij. R-plazmidi so odgovorni za odpornost E. coli na antibiotike. Plazmid K88 nadzoruje sintezo istoimenskega antigena in niti, ki določajo adhezivne lastnosti enteropatogene in enterotoksigene Escherichie coli; Plazmidi so lahko dveh vrst. Eden od njih določa sintezo termolabilnega, drugi - termolabilnega in termostabilnega enterotoksina.
2.6 Tvorba toksinov
E. coli proizvaja endotoksin, povezan z LPS (lipopolisaharid), ki je del O-antigena. Biološka aktivnost endotoksina je različno izražena v različnih seroloških skupinah bakterije Escherichia coli. Toksične lastnosti endotoksina določa celotna molekula LPS, saj je en lipid ali polisaharid nizko toksičen. Endotoksin vpliva na koagulacijski sistem krvi, povzroča Schwartzmanov fenomen in druge pojave, ima pirogene, adjuvantne, zaščitne in mitogene lastnosti. V majhnih odmerkih spodbuja, v velikih odmerkih pa zavira fagocitno reakcijo.
Številne serološke skupine E. coli proizvajajo endotoksine. Menijo, da nekatere serološke skupine Escherichia coli povzročajo koleri podobno drisko pri ljudeh, druge le pri živalih (prašiči, teleta).
E. coli proizvaja dve vrsti enterotoksina. Termostabilni enterotoksin se inaktivira šele po 30-minutnem vrenju, počasi dializira skozi celofan in ostane aktiven pri kislih pH vrednostih ter po obdelavi s tripsinom in pronazo. Molekulska masa 10 3-104. Nima antigenskih lastnosti. Toplotno labilni enterotoksin se po 30 minutah segrevanja pri 60°C, pH 4,0-5,0 pod delovanjem pronaze inaktivira in se ne dializira. Antigenska specifičnost termolabilnih enterotoksinov, ki jih proizvajajo različne serološke skupine in holerogen, je enaka. Spodbujajo aktivnost adenilat ciklaze in povzročajo kopičenje cikličnega adenozin monofosfata (cAMP), kar vodi v moteno izločanje in razvoj akutne driske.
2.7 Odpornost
Odpornost E. coli na zunanje dejavnike je običajna za asporogene bakterije. V zunanjem okolju (voda, prst) preživi, odvisno od posebnih pogojev, več mesecev. Pri segrevanju v suspenziji umre pri 55 ° po eni uri, pri 60 ° - po 15 minutah, v 1% raztopini fenola - po 10 minutah, v raztopini živosrebrovega klorida 1: 1000 - po 2 minutah. E. coli ima selektivno občutljivost za briljantno zeleno in soli tetrationske kisline. To je osnova za uporabo številnih selektivnih medijev. Mnogi sevi E. coli so zelo občutljivi na monomicin, kanamicin, gentamicin.
2.8 Patogenost
Escherichia coli - komenzali debelega črevesa - lahko povzročijo gnojno-vnetne procese v organih in tkivih z močnim zmanjšanjem odpornosti telesa.
Virulentnost Escherichie coli se kaže v adhezivnosti Escherichie coli, to je adherenciji na resice črevesnega epitelija, razmnoževanju v lumnu tankega in debelega črevesa, prodiranju v epitelijske celice in znotrajceličnem razmnoževanju ter zatiranju fagocitna aktivnost makrofagov in polimorfonuklearnih levkocitov. Escherichia coli - povzročitelji kolienteritisa pri mladih živalih in koleri podobnih bolezni pri odraslih živalih - se razmnožujejo na površini črevesnih epitelijskih celic. Escherichia coli - povzročitelji bolezni, podobnih griži - prodrejo v epitelne celice in se v njih razmnožujejo. Manifestacija virulence E. coli je odvisna od odmerka bakterij, ki so vstopile v črevesje. Virulenco Escherichia coli ugotavljamo v tkivnih kulturah, poskusih na laboratorijskih živalih pri razmnoževanju eksperimentalnega kolienteritisa, pljučnice in drugih procesov. Sposobnost penetracije ugotavljamo s Sherenovim keratokonjunktivnim testom z vnosom kulture E. coli v veznico očesa morskega prašička.
E.coli lahko povzroči veliko škodo živali. Sevi, ki živijo v debelem črevesu in so oportunistični patogeni, lahko preidejo iz prebavil in z zmanjšanjem imunosti in kopičenjem lahko povzročijo različne nespecifične vnetne bolezni (cistitis, holecistitis, kolisepso in druge). Takšne bolezni imenujemo parenteralna escherichiosis.
Driski sevi E. coli, ki vstopijo v telo od zunaj, lahko povzročijo izbruhe enteralne (epidemične) escherichiosis.
Najpogosteje novorojene živali zbolijo za epidemično escherichiosis, pri kateri imunski sistem še ni popolnoma oblikovan; imajo samo IgG, pridobljen od matere preko posteljice (in IgM ščiti pred gramnegativnimi bakterijami); kislost želodčnega soka je nizka; normalna mikroflora se šele oblikuje.
Toda driskasta Escherichia lahko okuži starejše živali, pa tudi odrasle. Poleg tega se lahko escherichiosis nadaljuje, na primer, po vrsti kolere (enterotoksigeni sevi), dizenterije (enteroinvazivni sevi), hemoragičnega kolitisa (enterohemoragični sevi). Včasih Escherichia coli povzroči kolisepso, peritonitis, endotoksični (septični šok). Poleg tega lahko E. coli povzroči zastrupitev s hrano.
2.9 Patogeneza
Posebnost te okužbe je v tem, da sta pojav in razvoj bolezni določena z izvirnostjo zaščitnih reakcij pri mladih živalih in v veliko manjši meri odvisna od lastnosti mikrobnega povzročitelja in odmerka okužbe. . Velik pomen v patogenezi pojava bolezni so spremembe v encimski aktivnosti žlez prebavil, pojav disbakterioze, zmanjšanje antagonističnih, encimskih in vitaminskih lastnosti črevesne mikroflore. Toksikoza pri kolienteritisu je posledica več razlogov. Skupaj s kolitoksinom, ki ga izločajo patogene serološke vrste Escherichia coli, in produkti razpadanja mikrobnih teles, se strupeni produkti, ki nastanejo iz hrane, absorbirajo iz črevesja zaradi motenj prebavnih procesov in hitrosti njegovega gibanja v črevesnem lumnu. Ti toksični produkti in antigeni Escherichie coli vplivajo na živčne končiče in neposredno na živčne centre, na stene krvnih žil in tkiv. Drugi dejavnik, ki ima velik vpliv na klinične manifestacije toksikoze, je sprememba mase krožeče krvi, ki jo povzroči oster krč arteriolov s precejšnjim širjenjem kapilar in majhnih žil. Istočasno zaradi širjenja žil trebušne votline pride do prerazporeditve mase krvi, njenega odlaganja v trebušni votlini in nastanka anemije v žilah možganov, kože in ledvic. Povečanje vaskularne prepustnosti vodi do pojava edema tkiva zaradi prehoda beljakovin in tekočega dela krvi v medcelične prostore. K povečanemu strjevanju krvi in poslabšanju krvnega obtoka prispevajo tudi velike izgube vode in soli s pogostimi tekoče blato, bruhanje, povečano izhlapevanje s površine kože, pa tudi z dihanjem. Vse to vodi do motenj krvnega obtoka, poslabšanja oskrbe tkiv s kisikom, zmanjšanja srčne aktivnosti in zmanjšanja tvorbe urina.
Zvišanje ravni kalija pri takšnih bolnikih je kratkotrajno in se hitro nadomesti s progresivnim znižanjem njegove ravni v krvnem serumu v ozadju povečane izgube kalija z urinom in blatom.
Določeno vlogo pri razvoju slike toksikoze igra skoraj stalno in dolgotrajno zmanjšanje delovanja skorje nadledvične žleze z zmanjšanjem proizvodnje in izločanja glukokortikoidnih hormonov, ki uravnavajo žilni tonus, presnovo beljakovin in ogljikovih hidratov ter obnavljajo okvarjene celice. prepustnost.
2.10 Ekologija
Rezervoar Escherichie coli v naravi je človek, katerega živalsko črevo je naseljeno z različnimi biotipi tega mikroba.
Število E. coli v 1 g blata se giblje od nekaj milijonov do 1-3 milijard posameznikov. Skozi življenje pride do večkratne spremembe biovarjev E. coli v črevesju. Določeno vlogo pri tem procesu igrajo prehrana, pretekle okužbe, zdravljenje s kemoterapevtskimi zdravili, antibiotiki in drugi dejavniki.
3. Laboratorijska diagnostika
Ko najdemo bakterije, značilne za E. coli v smislu morfoloških, tinktorialnih in kulturnih lastnosti, biokemičnih lastnosti ne proučujemo, ampak jih takoj pregledamo v RA na steklu z aglutinacijskimi antiadhezivnimi serumi, najprej s kompleksom, nato pa ob pozitivnem rezultatu. pridobljeni z monovalentnimi serumi. Rezultat reakcije se upošteva v eni minuti. Kontrole so:
) testna kultura + fiziološka raztopina;
) kultura + normalni kunčji serum, razredčen 1:10.
Kulture, gojene na MPA, testiramo s sera K 88, 987 P in A 20, kulture iz Minkovega medija - s sera K 99 in F41. Ko je RA pozitiven, so kulture razvrščene kot povzročitelji escherichiosis in s tem je njihova nadaljnja študija zaključena. V odsotnosti Escherichia z adhezivnimi antigeni se kultura identificira na podlagi študije encimskih značilnosti. Za E. coli je značilna razgradnja glukoze in laktoze s tvorbo kisline in plina, sproščanje indola, odsotnost ureaze in nezmožnost izrabe citratov.
V kulturah, identificiranih kot E. coli, se kot posredni pokazatelj patogenosti ugotavlja pripadnost O-seroskupini ali pa se patogenost proučuje v biološkem testu na belih miših, kokoših.
O-seroskupina Escherichia je določena na naslednji način. Kulture, gojene na poševnem MPA pri 37 0C 18–20 h, speremo s fiziološko raztopino, prenesemo v suhe sterilne epruvete, segrevamo v vodni kopeli pri 100 °C. 0Z 1 uro za uničenje površinskih termolabilnih L- in B-antigenov ali v avtoklavu pri 120°C 2 uri za uničenje termostabilnega A-antigena. Segreto suspenzijo bakterij centrifugiramo pri 2000 ... 3000 min -110 ... 15 minut in sediment uporabimo kot antigen za nastavitev RA na steklu. Preostanek antigena razredčimo s sterilno fiziološko raztopino do celične koncentracije 5 108/ml in postavite epruveto RA.
Ugotavljanje seroskupinske pripadnosti kultur se prične z nastavitvijo RA na steklo s skupinskimi polivalentnimi serumi: polivalentne serume nanesemo po kapljicah na čisto steklo brez maščobe. Kulturo, oborjeno s centrifugiranjem, vnesemo v vsako kapljico z zanko in dobro premešamo, rezultat upoštevamo v 3 minutah. Za pozitivno reakcijo je značilna tvorba drobnozrnatega aglutinata in bistritev tekočine. Če je rezultat negativen, ostane celotna kapljica motna.
Antigen, aglutiniran z enim od serumov polivalentne skupine, pregledamo v RA na steklu z monovalentnimi serumi, razredčenimi v razmerju 1:10 in vključimo v ta polivalentni serum. Nato z monovalentnim serumom, ki je dal pozitivno reakcijo, damo RA v epruvete v volumnu 1 ml. Serum razredčimo s fiziološko raztopino 1:25 do titra, navedenega na etiketi: najprej pripravimo začetno razredčino - 0,1 ml seruma dodamo 2,4 ml fiziološke raztopine, v preostale epruvete vlijemo 0,5 ml fiziološke raztopine, prenesemo 0 iz začetne redčenje ,5 ml zmesi v drugo, premešamo, iz druge v tretjo itd., iz zadnje epruvete odvzamemo 0,5 ml zmesi, iz prve pa 1,5 ml. V vse epruvete dodajte 0,5 ml antigena. Istočasno se postavijo kontrole: 1) antigen + fiziološka raztopina (za izključitev samoaglutinacije); 2) serum, razredčen v razmerju 1:25, brez antigena (da preprečimo flokulacijo). Vse epruvete stresamo, hranimo v termostatu pri 37 ° C 16 ... 18 ur in nato pri sobni temperaturi - 6 ... 8 ur.Reakcijo odčitamo z aglutinoskopom.
Rezultati se upoštevajo po splošno sprejeti metodi in so označeni s križci (++++, +++, ++, +, -).
Za pospešeno diagnostično metodo in povečanje pogostnosti pozitivnih rezultatov se uporablja metoda luminescentnih protiteles - modifikacija metode Koons in Chestnut (Coons, Kaplan, 1950). Bris pripravimo neposredno iz blata (5-10-krat razredčimo s fiziološko raztopino) ali po predhodnem gojenju 3-24 ur na mediju Endo ali v tekočem bujonu. Po obdelavi s specifičnim fluorescentnim serumom se ob pozitivnem rezultatu v preparatu pod fluorescenčnim mikroskopom zazna svetel sij bakterijskih celic.
4. Zdravljenje in preprečevanje
Zdravljenje.Vse dejavnosti se izvajajo približno na enak način kot pri salmonelozi. Serum proti Escherichia coli ni vedno učinkovit zaradi dejstva, da ne ustreza vedno vrsti povzročitelja kolibaciloze. Najučinkovitejši učinek je zagotovljen s peroralno uporabo klortetraciklinijevega klorida (po 0,01-0,02 g), oksitetraciklina (po 0,025 g) ali micerina (0,01 g na 1 kg žive teže).
Antibiotiki se pogosto uporabljajo za zdravljenje bolnih živali (O. 3. Iskhakov et al., 1984):
Ampicilin, Zdravilo se daje peroralno, individualno ali skupinsko, 20 mg na kg telesne teže 3-krat na dan;
Biovit. Antibiotik se predpisuje s krmo, vodo, kolostrumom 2-krat na dan v odmerku 0,25 g na kg žive teže. Potek preprečevanja je 5-20 dni;
Vitatetrin. Za terapevtske namene dajejo posamično 40 mg na kg žive teže z intervalom 12 ur.Potek zdravljenja je 5-7 dni;
Gentamicin. Antibiotik se daje intramuskularno v odmerku 1,5 mg na kg žive teže 5-7 dni;
Levomicetin. Določite peroralno 20 mg na 1 kg žive teže;
Mešanica-10. Dajemo s krmo v odmerku 3-4 kg na 1 tono krme. Potek zdravljenja je 7-10 dni;
Noromandomiksin. Odmerki za teleta 100 mg na 1 kg žive teže. Antibiotik se daje peroralno. Potek zdravljenja je 7 dni;
Orimicin. Daje se intramuskularno, subkutano, intraperitonealno ali počasi intravensko v odmerku 4-30 mg na kg teže živali 2-krat na dan. Prostornina injicirane raztopine je 10-20 ml. Potek zdravljenja je 5-7 dni;
Polimiksin M sulfat. Dajte znotraj 2-3 krat na dan v obliki vodne raztopine 4 mg na kg žive teže;
Solvovetin. Daje se intramuskularno po 12 urah v odmerku 0,15 ml na kg žive teže. Injekcije se ponavljajo 5-7 dni;
Spectam B. Spectam se jemlje peroralno 20-30 minut pred pitjem kolostruma. Odmerek - 40-60 mg na kg žive teže živali 2-krat na dan, 3 dni zapored.
Poleg antibiotikov kolibaciloza kaže uporabo sulfanilamidnih zdravil: selfapiridazin, ftazin, sulfadimetoksin, sulfamonometoksin, enteroseptol, intestopan, meksaform, nevigrom itd. (R.M. Salimov, 1985; V.A. Fortushny, 1985; V.I. Prodanov, 1974; V. V. Mitjušin, 1985; L. I. Gershkovich, 1966; V. A. Gumul et al., 1985). Pred kratkim sta bila za zdravljenje telet s kolibacilozo predlagana Lers in Startin, ki zagotavljata terapevtski učinek do 88 odstotkov. (N.I. Ovsyanov et al., 1984; I.D. Kolesnichenko et al., 1985).
Nadzorni ukrepi in preventiva. Ko je diagnoza potrjena, bolna teleta izoliramo in zdravimo. Skotena teleta hranimo z 80-100 ml hiperimunskega seruma in 10 ml koliprotektana. Koliprotektan se daje v dveh dneh do 60 ml. Stelja in gnoj se vsak dan odstranjujeta iz prostorov. Gnoj se skladišči na za to namenjenem mestu za biotermično dezinfekcijo. Dnevno se razkužujejo tudi stroji oziroma kletke v teličarni. Razkužite inventar, žlebove za gnoj, prehode za gnoj.
V delu, kjer so bolna teleta, se podaljša reža med kletkami za prenos. Razkužite zrak v zaprtih prostorih. Osebje, ki dela v hlevu za teleta, je opremljeno s kombinezoni in obutvijo. Obisk ambulante, teletnjaka nepooblaščenim osebam ni dovoljen. Osrednja naloga boja proti kolibacilozi je ustvariti normalne pogoje za krmljenje in zadrževanje krav ter zagotoviti vzrejo mladih živali. V zvezi s tem je treba krave hraniti na podlagi biološko popolnih obrokov. Živali se morajo aktivno gibati. Organizacija aktivne vadbe pri kravah je močan dejavnik, ki preprečuje kopičenje plazmidov s patogenostjo in odpornostjo na zdravila.
Enako pomembna v sistemu preprečevanja širjenja patogenih ešerihij je pravilna organizacija telitve in reje novorojenih telet. Za telitve krav je vsaka kmetija opremljena z dvodelnim beljenjem materinstva v višini 10-15% mest celotnega števila krav. V vsakem takem odseku je zgrajenih več škatel. Pred telitvijo se opravi toaleta in dezinfekcija kože krave. Razkužen boks je napolnjen s kvalitetno steljo. Telitev se sprejme na čisto vrečo. V prvi uri po rojstvu, da preprečimo kolibacilozo, teletu damo 80-100 ml hiperimunskega seruma, nato kolostruma.
Reja skotenih telet je organizirana v boksih. V ta namen je ambulanta razdeljena na 4 ločene dele z ločenimi vhodi, avtonomnim prezračevanjem in kanalizacijo. V vsakem odseku so nameščene posamezne celice. Sekcije se polnijo v 3-4 dneh. Pri njihovi uporabi se upošteva načelo "vse je prazno - vse je zasedeno". V posameznih kletkah se hranijo 10 dni, nato se iz dispanzerja prenesejo na skupinsko vzdrževanje. Trudijo se zagotoviti, da so teleta v teletnjaku nameščena po oddelkih v eni ali dveh skupinskih kletkah. Celice in odsek, ki se sprosti v dispanzerju, se mehansko očisti in razkuži. Po tem odsek ni zaseden pet dni, dobi "biološki počitek".
Na kmetijah izvajamo specifično preventivo proti kolibacilozi. Da bi to naredili, so globoko breje krave in telice cepljene z aluminijevim hidroksidom, formol-tnomersalnim cepivom proti kolibacilozi telet in jagnjet. Krave in telice se imunizirajo 1,5-2 meseca pred telitvijo intramuskularno dvakrat s premorom 10-15 dni. Cepljenje krav zagotavlja visoko koncentracijo protiteles v kolostrumu, ki ščitijo skoteno tele pred vplivom patogene Escherichie. Uporaba cepiva pri kravah zmanjša pojavnost kolibaciloze pri teletih za 1,5-3 krat, smrtnost za 5-10 krat (VV Kolchak, 1983).
Poleg tega je za preprečevanje bolezni pri teletih indicirana uporaba kravjega krvnega seruma, odvzetega na isti kmetiji, pa tudi običajnih globulinov, kolifaga. Pitje acidofilne jušne kulture, acidofilnega mleka ima pozitiven učinek. Dober učinek je uporaba kolibakterina, bifidumbakterina. Bifidumbacterin je predpisan v 2-3 odmerkih 2-3 krat na dan 3-4 dni G.V. Gnatenko et al (1983) je priporočljivo, da se globoko breje krave zdravijo s streptomicinom. Zdravilo v odmerku 500 ie na 1 kg žive teže se daje intramuskularno 2-krat na dan 3 dni zapored. Po njihovih podatkih se pojavnost telet, pridobljenih od zdravljenih krav, zmanjša na 7,1 %, poginov ni. V odsotnosti takšnega zdravljenja incidenca telet doseže 80%, smrtnost - do 61%.
Zaključek
E. coli, Escherichia coli, - to ime smo večkrat slišali v televizijskih poročilih o epidemijah zadnjih let v nekaterih ruskih mestih (Ivanovo, Smolensk, Čeljabinsk). Ko človek, nevešč mikrobiologije, posluša radio ali gleda podobne zgodbe po televiziji, dobi vtis, da lahko E. coli človeku le škodi in da se je je treba znebiti na vse možne načine.
A če si ta mikroorganizem ogledamo pobližje, bomo videli, da lahko E. coli človeštvu prinese marsikatero korist, njene škodljive učinke pa lahko s pravilnimi sanitarno-higienskimi ukrepi in ustreznim zdravljenjem bistveno omejimo. Je zelo priročen objekt za prenos genskega inženiringa in drugih študij, ki naj bi v prihodnosti pomagale pri zdravljenju bolnikov z različnimi boleznimi.
V naši državi se te študije zaradi pomanjkanja sredstev za takšno delo ne izvajajo tako aktivno kot v ZDA, če pa bo ta problem v bližnji prihodnosti premagan, potem imajo ruski znanstveniki vse možnosti, da odkrijejo najnovejše metode zdravljenja. povezanih z uporabo Escherichie coli (Tu igra pomembno vlogo tudi velika zagnanost domačih znanstvenikov, vključno z zanimanjem sodobne znanstvene mladine).
Seznam uporabljene literature
1.Borisov L.B. Enteropatogena Escherichia coli in njihovi fagi, L., 1976.
2. TSB, str. 366-368.
Gnatenko G.V., Tupia L.G. Rakitsky D.T. Izkušnje v boju proti kolibacilozi pri teletih. - Veterinarska medicina, Kijev: "Žetev", 1983, št. 57
Gumul V.A., Afanasiev L.A., Maulanov A. 3. Klinična slika in zdravljenje kolibaciloze pri teletih. - Bilten kmetijske znanosti Kazahstana, 1985, št. 2.
Kaufman F. Družina črevesnih bakterij, trans. iz angleščine, M., 1959.
Kirjanov E.A. Patogena mikroflora prežvekovalcev. - V knjigi: Boj proti boleznim domačih živali v Transbaikaliji in na Daljnem vzhodu. sob. znanstveni Zbornik kmetijskega inštituta Blagoveshchensk, Blagoveshchensk, 1974.
Kirjanov E.A. Bolezni telet in njihovo preprečevanje v kolektivnih kmetijah in državnih kmetijah Primorskega. - Vladivostok, 1977.
Kiryanov E.A., Sosnin M.F. Epizootske razmere in problemi zdravih čred živali v Amurski regiji. - Povečanje produktivnosti domačih živali na Daljnem vzhodu. sob. znanstveni tr. Primorski kmetijski zavod, št. 47, Ussuriysk, 1978.
Kiryanov E.A., Galiulina R.V. Preprečevanje bolezni mladih domačih živali. - Vladivostok, 1979.
Kiryanov E.A., Tyutrin I.F. Skice o nalezljivi patologiji domačih živali. - Reprodukcija črede in veterinarsko zdravstveno varstvo v pogojih intenzivne živinoreje na Daljnem vzhodu. sob. znanstveni tr. Primorski kmetijski inštitut, Ussuriysk, 1981.
Kolčak V.V. Kolibaciloza telet in ukrepi za boj proti njej na kmetijah Amurske regije (metoda, priporočila). - Novosibirsk: SO VASKhNIL, 1983,
Koljakov I - E-, Gitelson S. S., Kavruk L. S. kolibaciloza pri teletih. - M: "Spike", 1970.
Luria S., Darnell J., Splošna virologija, trans. iz angleščine, M., 1970; Ravin V.K., Lysogenia, M., 1971.
Medicinska mikrobiologija, virologija in imunologija, ur. L.B. Borisov in A.M. Smirnova, str. 269-273, M., Medicina, 1994.
Medicinska enciklopedija, stran 252.
Metode sanitarnih in mikrobioloških raziskav okoljskih predmetov, ed. G.I. Sidorenko, M., 1978.
Mikrobiologija in imunologija, ur. A.A. Vorobyova, str. 289-293, M., Medicina, 1999.
Minkevich I.E. Bakterije skupine Escherichia coli kot sanitarni indikativni mikroorganizmi, L., 1949.
Mozzukhin Yu.P. O epizootologiji kolibaciloze pri teletih in pujskih v regiji Amur. - V knjigi: Materiali XIX znanstvene konference. Blagoveshchensk, 1971
Ovsyanov N.I., Ovladeva M.A., Naumova K.N. Lers zdravilo za drisko pri teletih. - Sibirska dežela, Daljni vzhod, 1984, št. 2
Akutne črevesne okužbe, ed. TV Peradze, str. 73, L., 1973.
Pozdeev O.K. Medicinska mikrobiologija, str. 351-357, M., Geotar-med, 2002.
Prodanov V.I. Materiali za preučevanje bolezni prebavil pri novorojenih teletih. - V knjigi: Preprečevanje in zdravljenje bolezni mladih rejnih živali. Moskva: Kolos, 1974
Salimov R.M. Zdravila za colibac-
terioza. - Sibirski, Daljni vzhod, 1985. Tabachnik A.L., Girshovich E.S., Temper R.M. Enterotoksigena E.coli, Zhurn. mikro, epid. in imuno., št. 3, str. 31, 1977.
Fortushny V.A. Sulfagin za kolibacilozo pri teletih. - Veterina, 1985, št. 9
mentorstvo
Potrebujete pomoč pri učenju teme?
Naši strokovnjaki vam bodo svetovali ali nudili storitve mentorstva o temah, ki vas zanimajo.
Oddajte prijavo navedite temo prav zdaj, da izveste o možnosti pridobitve posvetovanja.
STYLAB ponuja testne sisteme za odkrivanje bakterije Escherichia coli (E. coli) v vzorcih hrane in okolja z mikrobiološkimi metodami, PCR v realnem času in lateks aglutinacijo.
coli ( Escherichia coli) je fakultativna anaerobna gram-negativna gibljiva paličasta bakterija, ki je del normalne črevesne mikroflore večine toplokrvnih živali, vključno s človekom. Obstaja veliko serotipov E. coli, ki so večinoma neškodljivi ali celo koristni za prenašalca. Bakterije, ki sestavljajo mikrofloro, preprečujejo razmnoževanje drugih bakterij, vključno s patogenimi. Poleg tega E. coli proizvaja vitamin K. Vendar pa nekateri serotipi E. coli lahko povzroči hudo bolezen. Morfološko neškodljiva in patogena Escherichia coli se ne razlikujeta, zato je za določitev patogenosti mikroorganizma potrebno analizirati njegove antigene.
Bakterije E. coli lahko pripadajo različnim serološkim skupinam: imajo različne antigene. Seroskupina je skupina bakterij, ki imajo skupen antigen; lahko vključuje več kot en serotip, vrsto ali rod. Za E. coli najbolj znane so enteropatogene Escherichie coli serološke skupine O26, O55, O86, O111, O114, O119, O125, O126, O127, O128, O142 in O158. V iste skupine lahko spadajo tudi druge vrste patogene Escherichie coli. V DAEC so bile na primer identificirane serološke skupine O86, O127, O142 in O158.
Obstaja šest vrst patogene bakterije Escherichia coli.
- Enterohemoragična Escherichia coli (EHEC, uporabljajo se tudi okrajšave STEC - od "shigatoxin-producing E. coli" in VTEC - "verotoxin-producing E. coli"). Te bakterije proizvajajo dva toksina, ki ju imenujemo Shiga-like (Shigella-like) toksini. EHEC povzroča bolezni, ki so po simptomih podobne griži in jih spremlja hemoragična driska. V hujših primerih se lahko razvije hemolitični uremični sindrom (HUS). EHEC vključuje serotipe E. coli O104:H4, O157:H7 in nekatere druge.
- Enterotoksigena Escherichia coli (ETEC) proizvaja toplotno labilne in toplotno stabilne toksine, od katerih je slednji podoben toksinom Vibrio cholerae. Za bolezni, ki jih povzroča ta bakterija, so značilni vodena driska, povišana telesna temperatura in v nekaterih primerih slabost.
- Enteroinvazivna Escherichia coli (EIEC) povzroča bolezni, podobne bacilarni dizenteriji. Te bakterije prodrejo v celice črevesnega epitelija in se v njih razmnožujejo.
- Enteropatogena Escherichia coli (EPEC) pogosteje povzroči drisko pri otrocih kot pri odraslih. Njegov mehanizem delovanja se razlikuje od ETEC in EIEC: te bakterije se pritrdijo na celice črevesnega epitelija, vendar ne prodrejo vanje. Bolezni, ki jih povzroča EPEC, lahko trajajo do 2 tedna.
- Enteroagregativna E. coli (EAEC) prav tako povzroča bolezen, predvsem pri otrocih. Bakterije se pritrdijo na črevesni epitelij in sproščajo toksine.
- Diffuse-adhesive E. coli (DAEC) povzroča blago drisko pri otrocih, zlasti tistih, mlajših od 2 let. Vendar so ta mikroorganizem našli tako pri zdravih otrocih kot tudi pri zdravih odraslih.
E. coli lahko povzroči ne samo enteritis in toksične okužbe, ampak tudi neonatalni meningitis, okužbe dihal, okužbe sečil in bakteriemijo - običajno poškodbo telesa, ki jo povzročajo bakterije, ki so vstopile v krvni obtok.
E. coli spada med najbolj raziskane organizme. Genom enega od sevov teh bakterij je bil leta 1997 popolnoma sekvenciran. E. coli se uporablja v genetskih in mikrobioloških poskusih, pa tudi pri preučevanju speciacije. Poleg tega se s pomočjo teh bakterij sintetizirajo različne beljakovine, zlasti analog humanega insulina, nekateri encimi itd. Uporabljajo se tudi za proizvodnjo cepiv. Potekajo raziskave za uporabo E. coli kot gorivo.
V Ruski federaciji in državah carinske unije je vsebnost E. coli v živilih omejena s TR TS 021/2011 "O varnosti hrane", TR TS 033/2013 "O varnosti mleka in mlečnih izdelkov" in drugi tehnični predpisi. Aktualne pravne informacije najdete na spletni strani kompakten24. com .
Za določanje E. coli v vzorcih uporabljamo tako mikrobiološke metode (selektivna gojišča, testni substrati) kot določanje DNK s PCR. Kot hitri testi se uporablja preprosta in hitra metoda lateksne aglutinacije.
Literatura
- V REDU. Pozdeev. Medicinska mikrobiologija. Moskva, GEOTAR-MED, 2001.
- Uradna spletna stran CDC.
- Germani Y, Bégaud E, Duval P, Le Bouguénec C. Razširjenost enteropatogene, enteroagregativne in difuzno adherentne bakterije Escherichia coli med izolati otrok z drisko v Novi Kaledoniji. J Infect Dis. 1996 Nov;174(5):1124-6.
- Mansan-Almeida R, Pereira AL, Giugliano LG. Difuzno adherentni sevi Escherichia coli, izolirani od otrok in odraslih, sestavljajo dve različni populaciji. BMC Microbiol. 2013, 1. februar; 13:22.
- Isabel C. A. Scaletsky, Sandra H. Fabbricotti, Rozane L. B. Carvalho, Claudia R. Nunes, Helcio S. Maranhão, Mauro B. Morais in Ulysses Fagundes-Neto Diffusely Adherent Escherichia coli kot vzrok akutne driske pri majhnih otrocih v severovzhodni Braziliji: študija primera in kontrole. J Clin Microbiol. februar 2002; 40 (2): 645-648.
Escherichia (E. coli)
Zgodovina odkritij.
Najprej so jih izolirali iz črevesja otroka in opisali v 1885 nemški pediater Theodor Escherich.
|
Taksonomija. družina |
Enterobacteriaceae |
|
Pleme |
|
|
Vrste |
E. coli in druge, skupaj 5 vrst |
Morfologija in tinktorialne lastnosti .
E. coli so po Gramu negativne ravne paličice z zaobljenimi konci, velike 0,4-0,-2-6 µm, naključno razporejene v razmazih, mobilne (peritrične), imajo mikrokapsulo, pili tipa I in II, ne tvorijo spor.
kulturne lastnosti .
E.coli - fakultativni anaerobi, kemoorganoheterotrofi. Ni zahteven glede pogojev gojenja. Optimalni pogoji gojenja: temperatura 37 C, pH 7,2-7,5, trajanje gojenja - 24-48 ur. Dobro rastejo na enostavnih hranilnih gojiščih (MPB, MPA). Pri BCH opazimo rast v obliki difuzne motnosti, ki ji sledi nastanek oborine. Na MPA tvorijo kolonije v obliki črke S: rahlo izbočene prosojne kolonije z enakomernimi robovi in gladko, sijočo površino srednje velikosti. Možna je rast v R-obliki (kolonije z nazobčanimi robovi, hrapava površina), včasih se razrastejo mukozne kolonije (M-oblika).
Na diferencialno diagnostičnih medijih dajejo značilno rast: Endo (škrlatne kolonije s kovinskim leskom); Levin (temno modre kolonije s kovinskim leskom), Ploskirev (rožnate kolonije s kovinskim leskom), Ressel in Olkenitsky. Lahko pokaže hemolizo na krvnem agarju.
Biokemijske lastnosti .
E. coli ima visoko encimsko aktivnost. Katalaza-pozitiven in oksidaza-negativen. Voges-Proskauerjeva reakcija je negativna. Razgradijo sladkorje (glukozo, laktozo, manitol, arabinozo, saharozo itd.) na kislino in plin. Razgradnja laktoze na kislino in plin je značilnost Escherichie od drugih enterobakterij. Reducirajo nitrate v nitrite, tvorijo indol, amoniak, ne proizvajajo vodikovega sulfida, ne utekočinijo želatine.
Antigenska struktura .
Antigenska struktura je kompleksna. Obstajajo O-, H-, K- (L, B, A), M-antigeni, fimbrijski, ribosomski in številni drugi antigeni. Pri seroididentifikaciji so najpomembnejši O-, H-, K- antigeni.
* O - somatski antigen, lipopolisaharid celične stene, termostabilen, odporen na alkohol, skupina (≥171 seroskupina).
* H - flagelarni antigen, flagelinski protein, značilen (več kot 57 serotipov).
* K - kapsularni antigen, kislinski polisaharid, tudi značilen (več kot 97 serotipov). K-antigen ni homogen - glede na odpornost na temperaturo se razlikujejo 3 njegove sorte:
L - termolabilni antigen (uniči pri segrevanju na 600C);
A - termostabilen (vzdrži 2-3-urno vrenje);
B - vmesni po termolabilnosti med A in L (za eno uro vzdrži segrevanje do 60C, vendar se z vrenjem uniči).
Serovarje Escherichie označujemo z navedbo antigenske formule: O26: K60: H2 ...
dejavniki patogenosti.
1. Toksini:
* endotoksin - deluje pirogeno in toksično (znižanje krvnega tlaka, nevrotoksičnost) na človeško telo, zavira fagocitozo;
* eksotoksini tvorijo nekatere seve Escherichia coli:
Enterotoskina (ETKP);
Citotoksin s hemolitičnim in nekrotičnim delovanjem (EICP, EHEC).
2. Strukturne in kemične sestavine celice:
* pili I (adhezija) in II (konjugacija) vrste;
* kapsula in T-protein celične stene (adhezija, supresija fagocitoze);
* plazmidi (Col-, R-, F-, Hly-, Ent-plazmidi, kot tudi plazmidi, ki kodirajo sintezo adhezijskih faktorjev, so bili najdeni v E. coli).
odpornost.
E. coli dobro preživijo v zunanjem okolju, v zemlji in vodi ostanejo več mesecev. Pri 56 ° C umrejo v 1 uri, segrevanje na 60 ° C lahko zdrži največ 15-20 minut, pri kuhanju pa umrejo takoj. Občutljiv na razkužila in antibiotike.
Ekologija in vloga v patologiji.
Razlikovati med oportunističnim in driskimE. zoli.
Pogojno patogene E. coli so del črevesne mikroflore človeka, sesalcev, ptic, plazilcev in rib. Z blatom se E. coli izloči v okolje. E. coli je sanitarno indikativni mikroorganizem, njegovo odkrivanje kaže na svežo fekalno kontaminacijo okoljskih predmetov.
Pogojno patogena E. coli povzroča endogene gnojno-vnetne procese različnih lokalizacij (okužbe sečil, suppuration rane, holecistitis, apendicitis, peritonitis, konjunktivitis, otitis, pljučnica, meningitis ...) do sepse, pogosteje v ozadju IDS. .
Diareogene E. coli so povzročitelji eksogenih okužb - escherichiosis (akutne črevesne bolezni, ki se pojavljajo kot enteritis in enterokolitis) in zastrupitev s hrano.
Epidemiologija
.
Povzročene bolezni
E. coli, vseprisotna.
Vir okužbe : bolniki in prenašalci bakterij.
Prenosni mehanizem : fekalno-oralni (načini: hrana, kontaktno-gospodinjstvo in manj pogosto voda).
Patogeneza in klinične manifestacije .
Diareične serovare Escherichia coli delimo v 5 skupin:
* Enteropatogeni (EPKP);
* Enterotoksigeni (ETCP);
* Enteroinvazivna (EICP);
* Enterohemoragični (EGKP);
* Enteroadheziv (EACP).
Poleg naštetega izoliramo še difuzno adherentno bakterijo Escherichia coli (še ne dovolj raziskano).
Morfološko se predstavniki različnih skupin med seboj ne razlikujejo.; se razlikujejo po antigenski struktura in dejavniki patogenosti.
EPKD - povzroča escherichiosis pri otrocih, mlajših od 1 leta (pogosteje pri otrocih, hranjenih po steklenički). Patogeni vplivajo na epitelij tankega črevesa: adsorbirajo se na površini enterocitov zaradi beljakovine zunanje membrane (intimin), se tukaj razmnožujejo in poškodujejo mikrovile, kar povzroči njihovo zavrnitev. Vnetna reakcija, ki se v tem primeru razvije, je posledica delovanja endotoskina, ki se sprosti med uničenjem Escherichia coli. Glavne klinične manifestacije: driska, bruhanje, regurgitacija hrane, znaki dehidracije, podhranjenost. Potek bolezni je hud in lahko traja več tednov.
ETEC povzroča koleri podobna obolenja pri otrocih in odraslih. S pomočjo pilijev se vežejo na epitelij spodnjih delov tankega črevesa, se razmnožujejo zaradi CF (kolonizacijski faktor) in proizvajajo 2 vrsti toksinov: LT (termolabilni, po mehanizmu delovanja podoben eksotoksinu Vibrio cholerae) in ST (termostabilen). LT in ST povečata vsebnost cAMP in cGMP v epitelijskih celicah, kar povzroči kršitev transporta molekularnega železa in povečano sproščanje vode iz celic. To moti vodno-solno ravnovesje v črevesju in vodi do razvoja vodne driske. Bolezen po svoji naravi spominja na blago obliko kolere (v literaturi jo pogosto imenujemo potovalna driska).
EIEC povzroča dizenteriji podobno bolezen pri otrocih in odraslih. Adsorbirajo se na celice epitelija spodnjih delov debelega črevesa, prodrejo v celice, se razmnožujejo, izločajo šigelam podoben toksin in celice uničujejo. Ko se širijo skozi medcelične prostore, vplivajo na sosednje celice in tvorijo razjede. Klinični simptomi: najprej - vodena driska, nato pa se v blatu pojavi primesi sluzi in krvi.
EHEC je povzročitelj hemoragične driske in hemolitičnega uremičnega sindroma, ki prizadene predvsem otroke. Patogeni izločajo šigelu podoben citotoksin, ki povzroči uničenje vaskularnega endotelija (blokira sintezo beljakovin na ribosomih) črevesja in ledvic, kar povzroči ishemijo in nekrozo celic. Klinično opažen hemoragični kolitis (krvava driska) in hemolitični uremični sindrom (hemolitična anemija in odpoved ledvic), ki sta huda in pogosto usodna.
EACP (opisani leta 1985) se lahko hitro pritrdijo na površino celic in kolonizirajo različne dele črevesja, vendar pogosteje prizadenejo debelo črevo. Ne tvorijo citotoksinov, ne prodrejo v celice. Klinično je za bolezen značilen vztrajni diarealni sindrom.
Imuniteta .
Po prenosu escherichiosis se oblikuje humoralna tipsko specifična imunost, opazimo razvoj lokalne imunosti (SIgA). Tvorba protiteles nima zaščitnih lastnosti.
Pri otrocih prvega leta življenja pasivno transplacentalno imunost zagotavljajo protitelesa, ki prehajajo skozi placento, in protitelesa, ki prihajajo z materinim mlekom. Z ženskim mlekom se prenašajo tudi mukopolisaharidi, ki prispevajo k razmnoževanju lakto- in bifidobakterij - antagonistov povzročiteljev escherichiosis.
Mikrobiološka diagnostika .
Material, ki se preučuje: s črevesno escherichiosis - blato, bruhanje, brisi iz grla pri dojenčkih, z endogeno okužbo - material iz ustreznega žarišča (urin, izcedek iz ran, kri ...).
1. Bakterioskopska metoda.
2. Bakteriološka metoda (osnovna) - izolacija čiste kulture patogena, njena identifikacija, določanje občutljivosti na antibiotike.
3. Serološka metoda:
* RA s poli-(OB) in monovalentnimi aglutinirajočimi serumi Escherichie;
4. Molekularno biološka metoda (PCR, DNA sonde).
Specifična profilaksa ni bila razvita .
Nespecifična profilaksa : zgodnja diagnoza, izolacija bolnikov, redni preventivni pregledi zaposlenih v otroških ustanovah in zdravstvenih ustanovah. Zelo pomembno je strogo upoštevanje sanitarnega in epidemiološkega režima v teh ustanovah.
Načela terapije : prehrana, CTP (nitrofurani, fluorokinoloni), s splošnimi oblikami - antibiotiki, ob upoštevanju občutljivosti, specifično zdravljenje - coli-bakteriofag, probiotiki, ki vsebujejo lakto in bifid.
61. Patogene ešerihije (povzročitelji ešerihije): sistematika, morfologija, kultivacijske in tinktorske lastnosti, biokemične značilnosti, antigenska struktura in tvorba toksinov, patogeneza in klinika. Diareogene Escherichia, njihova diferenciacija od pogojno patogenih. Mikrobiološka diagnostika. Preprečevanje in zdravljenje.
Rod Escherichia.
Escherichia so najpogostejše aerobne črevesne bakterije, ki lahko pod določenimi pogoji povzročijo široko skupino človeških bolezni, tako črevesne (driska) kot zunajčrevesne (bakteriemija, okužbe sečil itd.) lokalizacije. Glavna vrsta - E. coli (E. coli) - najpogostejši povzročitelj nalezljivih bolezni, ki jih povzročajo enterobakterije. Ta patogen je indikator fekalne kontaminacije, zlasti vode. Kot sanitarna indikatorja sta se pogosto uporabljala if - titer in if - indeks. Escherichia je del mikroflore debelega črevesa sesalcev, ptic, plazilcev in rib.
kulturne lastnosti. Na tekočih gojiščih E. coli daje difuzno motnost, na gostih gojiščih tvori S- in R-oblike kolonij. Na mediju Endo za Escherichia Escherichia coli, ki fermentira laktozo, tvori intenzivno rdeče kolonije s kovinskim sijajem, nefermentirajoče - bledo rožnate ali brezbarvne kolonije s temnejšim središčem, na mediju Ploskireva - rdeče z rumenkastim odtenkom, na mediju Levin - temno. modra s kovinskim leskom.
biokemijske lastnosti. Escherichia coli v večini primerov fermentira ogljikove hidrate (glukozo, laktozo, manitol, arabinozo, galaktozo itd.) S tvorbo kisline in plina, tvori indol, vendar ne tvori vodikovega sulfida in ne utekočini želatine.
Antigenska struktura. Pomembnih morfoloških razlik med patogeno in nepatogeno Escherichia coli niso našli. Njihova diferenciacija temelji na študiji antigenskih lastnosti. Med površinskimi antigeni ločimo polisaharidne O-antigene, flagelarne H-antigene in kapsularne polisaharidne K-antigene. Znanih je več kot 170 variant O-antigenov (to ustreza patogenu, ki pripada določeni serološki skupini) in 57 H-antigenov (ki pripadajo serovarju). Sestava diareične (povzročajoče driske) Escherichie coli vključuje 43 O-skupin in 57 OH-variant.
Glavni dejavniki patogenosti driske E.coli.
1. Dejavniki adhezije, kolonizacije in invazije, povezani s pili, fimbrijskimi strukturami, proteini zunanje membrane. Kodirani so s plazmidnimi geni in spodbujajo kolonizacijo spodnjega dela tankega črevesa.
2. Eksotoksini: citotonini (spodbujajo hipersekrecijo tekočine v črevesnih celicah, motijo presnovo vode in soli in prispevajo k razvoju driske) in enterocitotoksini (delujejo na celice črevesne stene in kapilarnega endotelija).
3. Endotoksin (lipopolisaharid).
Glede na prisotnost različnih dejavnikov patogenosti so diarejske Escherichia coli razdeljene na pet glavnih vrst: enterotoksigene, enteroinvazivne, enteropatogene, enterohemoragične in enteroadhezivne.
4. Za patogeno E. coli je značilna proizvodnja bakteriocinov (kolicinov).
Enterotoksigene E. coli imajo termolabilen toksin z visoko molekulsko maso, po delovanju podoben koleri, povzročajo koleri podobne driske (gastroenteritis pri majhnih otrocih, potovalna driska itd.).
Enteroinvazivne bakterije Escherichia coli lahko prodrejo v celice črevesnega epitelija in se v njih razmnožujejo. Povzročajo obilno drisko s primesjo krvi in velikim številom levkocitov (indikator invazivnega procesa) v blatu. Klinično spominja na dizenterijo. Sevi imajo nekaj podobnosti s Shigella (negibni, ne fermentirajo laktoze, imajo visoke enteroinvazivne lastnosti).
Enteropatogene E. coli so glavni povzročitelji driske pri otrocih. V središču lezij je adhezija bakterij na črevesni epitelij s poškodbo mikrovil. Zanj je značilna vodena driska in huda dehidracija.
Enterohemoragična Escherichia coli povzroča drisko s krvjo (hemoragični kolitis), hemolitično-uremični sindrom (hemolitična anemija v kombinaciji z odpovedjo ledvic). Najpogostejši serotip enterohemoragične Escherichie coli je O157:H7.
Enteroadhezivna E. coli ne proizvaja citotoksinov in je slabo razumljena.
Epidemiologija. Glavni mehanizem širjenja driske E. coli je fekalno-oralni. Okužba se lahko pojavi s hrano, vodo, pri skrbi za živali. Ker Escherichia živi v črevesju številnih živalskih vrst, je težko določiti specifični vir okužbe. Kontaktna pot okužbe je lahko v zaprtih ustanovah. Enteropatogena in enteroinvazivna E. coli sta najpogostejša povzročitelja nozokomialnih izbruhov escherichiosis.
Laboratorijska diagnostika. Glavni pristop je izolacija čiste kulture na diferencialno diagnostičnih medijih in njena identifikacija z antigenskimi lastnostmi. Dajo RA z nizom polivalentnih OK (za O- in K-antigene) serumov, nato - adsorbirane O-serume in kulture, segrete na 100 stopinj Celzija (za uničenje K-antigenov).
Biokemična diferenciacija ima dodaten pomen. Identifikacija driskih tipov je mogoča z identifikacijo specifičnih markerjev (enterohemoragična Escherichia coli ne fermentira sorbitola, serovar O157: H7 pa ne kaže beta-glukuronidazne aktivnosti).