Il test del sangue ELISA è un metodo comune per rilevare varie patologie. Il risultato di un esame del sangue, la cui decodifica ELISA è stata interpretata da un medico diagnostico di laboratorio, è affidabile nella maggior parte dei casi.
Cos'è ELISA
ELISA è un moderno metodo diagnostico utilizzato per diagnosticare in laboratorio infezioni, disturbi ormonali e immunitari e malattie oncologiche. Il metodo consente di rilevare gli anticorpi contro l'infezione già nelle prime fasi della malattia. Questo metodo appartiene ai metodi diagnostici indiretti, in quanto rivela la risposta immunitaria del corpo. Tra i vantaggi dell'ELISA rispetto ad altri metodi diagnostici, si può individuare un alto livello di producibilità, che riduce la probabilità di errori. Il metodo è altamente sensibile e viene utilizzato per diagnosticare malattie sia nei bambini che negli adulti. Esiste un ampio numero di diverse modifiche di ELISA.
Il metodo ELISA si basa sulla specificità delle reazioni immunochimiche, nonché sui modelli fisico-chimici delle reazioni dei complessi antigene-anticorpo. Le reazioni sono prodotte con la partecipazione di enzimi specifici, che sono etichette per il rilevamento di anticorpi. Come risultato di una reazione immunochimica, gli anticorpi rigorosamente definiti si legano agli antigeni corrispondenti. Un esame del sangue mediante dosaggio immunoenzimatico elimina quasi la possibilità di ottenere un risultato falso positivo. Gli specialisti diagnostici di laboratorio giudicano un risultato positivo o negativo in base al fatto che la soluzione si sia macchiata durante l'indicazione enzimatica del complesso antigene-anticorpo. Se la soluzione è colorata, l'antigene ha interagito con l'anticorpo, il risultato ELISA è positivo.
Quali malattie possono essere rilevate da ELISA
Lo studio mediante immunodosaggio enzimatico consente di:
- identificare una serie di malattie infettive;
- diagnosticare malattie autoimmuni;
- rilevare la presenza di oncologia;
- identificare i disturbi ormonali;
- fare altre ricerche.
Un esame del sangue mediante ELISA consente di determinare la presenza delle seguenti infezioni:
Il metodo viene utilizzato per rilevare antigeni di agenti patogeni di una serie di infezioni, nonché per rilevare anticorpi di varie classi. Il metodo ELISA ha guadagnato grande popolarità per il rilevamento della sifilide, dell'HIV e dell'epatite virale. Non è consigliabile determinare la presenza e il livello di anticorpi nel siero del sangue ai fini della diagnosi primaria delle IST. In questo caso, la presenza di anticorpi nel sangue non può che essere un segno che il corpo del paziente è stato in passato in contatto con l'agente infettivo.
La diagnosi di varie malattie autoimmuni mediante ELISA viene effettuata attraverso lo studio di:
- corpi antinucleari;
- anticorpi contro il DNA a doppio filamento;
- anticorpi contro antigeni nucleari solubili (schermo ENA);
- anticorpi anticardiolipina;
- IgG al peptide citrullina;
- fattore reumatoide;
- Proteina C-reattiva;
- autoanticorpi contro gli antigeni citoplasmatici dei neutrofili (schermo ANCA).
I complessi immuni specifici sono caratteristici di certe malattie autoimmuni. Ad esempio, gli anticorpi del DNA a doppio filamento sono caratteristici di una malattia come il lupus eritematoso sistemico.
La definizione delle malattie oncologiche viene effettuata con un dosaggio immunosorbente legato all'enzima del siero del sangue per marcatori tumorali specifici, come PSA, CA-125.
PSA indica la presenza di adenoma prostatico e cancro alla prostata. CA-125 è un marcatore tumorale per il cancro ovarico. Il valore aumenta anche con i tumori cancerosi dell'utero, delle ghiandole mammarie, dell'endometrio.
Preparazione per l'analisi
Per garantire la massima accuratezza dei risultati, è necessario seguire alcune regole per la preparazione allo studio. L'analisi per la diagnostica di laboratorio mediante ELISA, di norma, viene prelevata al mattino dalla vena cubitale. È necessario donare il sangue rigorosamente a stomaco vuoto. Oltre a questa semplice prescrizione, dovrebbero essere seguite le seguenti raccomandazioni per la preparazione:
- 24 ore prima dello studio, è necessario escludere alcol e fumo;
- evitare uno sforzo fisico intenso;
- stai calmo;
- evitare la tensione nervosa;
- donare il sangue per ELISA non prima di 10 giorni dopo la sospensione del farmaco;
- informi il medico se sta assumendo farmaci di cui ha bisogno.
Inoltre, alcuni giorni prima del test, si consiglia di seguire una dieta. Allo stesso tempo, escludi dalla dieta cibi grassi, cibi fritti. Prima di testare l'epatite virale, escludere dalla dieta non solo cibi grassi e fritti, ma anche agrumi e verdure all'arancia.
Va notato che i risultati di una certa gamma di studi ormonali sono influenzati da un fattore come la fase del ciclo mestruale. La necessità di eseguire un'analisi in una o nell'altra fase del ciclo mestruale dovrebbe essere discussa in anticipo con il medico. Altrimenti, potresti ottenere risultati inaspettati. Ad esempio, il livello normale di ormone sessuale luteinizzante nelle donne varia a seconda del giorno del ciclo:
- 1-12 giorni - 2-14 mU / l;
- 12-14 giorni - 24-150 mU / l;
- da 15 giorni prima dell'inizio di un nuovo ciclo - 2-17 mU / l.
Interpretazione dei risultati ELISA
L'analisi consente di stabilire la presenza nel corpo di anticorpi di varie classi. Esistono 3 classi di anticorpi:
La produzione di questi anticorpi si verifica in vari stadi della malattia. Gli anticorpi IgM sono i primi ad essere prodotti nel corpo dopo l'infezione. La loro presenza è comunque un indicatore della malattia. In una persona sana, questa classe di anticorpi è assente.
Queste immunoglobuline sono presenti nel siero del sangue per circa 5-6 settimane.
Le immunoglobuline di classe G presenti nel sangue indicano che una persona ha già avuto la malattia o è portatrice dell'infezione. Questi anticorpi iniziano a essere prodotti dopo gli anticorpi di classe M, nella maggior parte delle malattie, 3-4 settimane dopo l'infezione. La loro presenza nel corpo è possibile per diversi anni. E in alcune malattie (ad esempio la sifilide), le IgG sono presenti nel sangue per tutta la vita.
Se l'IgA è presente nel corpo, è necessario combattere l'infezione il più intensamente possibile. Gli anticorpi di questa classe compaiono solo nel caso di una malattia infettiva cronica. La scomparsa di IgA indica la distruzione dell'infezione.
Se l'analisi ELISA viene eseguita su bambini di età inferiore a 1,5 anni, è necessario tenere conto della seguente caratteristica: il sangue del bambino contiene l'IgG della madre contro varie infezioni. Questo non significa che il bambino sia malato. In questo caso, è piuttosto la norma. La presenza di IgM è indice di infezione intrauterina o di infezione acquisita dopo la nascita. Le IgM della madre non possono attraversare la placenta e raggiungere il corpo del bambino.
La tabella mostra le possibili combinazioni della presenza o assenza di anticorpi di 3 classi nel corpo e la loro interpretazione.
Quando si decifrano le analisi, (+) indica un risultato positivo e (-) indica il contrario, cioè negativo. Il risultato, che mostra la presenza o l'assenza di qualsiasi sostanza nel corpo, è chiamato qualitativo. Può essere integrato da quantitativo. Il risultato quantitativo mostra il contenuto quantitativo di varie sostanze nel corpo.
Va notato che i sistemi di test hanno i propri valori di riferimento, definiti dal produttore, che caratterizzano gli indicatori. Il superamento dei valori di riferimento, di regola, significa la presenza di determinate patologie nel corpo del soggetto.
Dopo aver ricevuto i risultati dell'ELISA, il medico curante deve decifrare i valori ottenuti. Solo lui può fare una corretta valutazione dei risultati e determinare lo stadio della malattia.
In contatto con
ELISA - saggio immunoenzimatico - è uno dei metodi più avanzati per diagnosticare la sifilide. Rivela segni della presenza dell'agente eziologico della malattia in diverse fasi di quest'ultima. L'analisi si basa sull'identificazione di anticorpi specifici che compaiono nel sangue del paziente quando il treponema pallidum (un batterio patogeno) viene introdotto nell'organismo.
Il metodo ELISA funziona non solo per un gruppo di malattie a trasmissione sessuale. È ugualmente applicabile alla diagnosi di varie malattie infettive. Il principio di analisi è stato sviluppato negli anni '60 del secolo scorso. Tuttavia, ha iniziato a essere utilizzato attivamente solo dopo 20 anni.
Ora ELISA viene utilizzato per diagnosticare la sifilide, l'AIDS, la tubercolosi e molte altre malattie. Per rilevare gli anticorpi, vengono utilizzati enzimi appositamente progettati che reagiscono attivamente a specifiche proteine del sangue.
In quali casi viene prescritto l'ELISA?
Il paziente stesso può venire in clinica per l'analisi se presenta sintomi sospetti (caratteristiche eruzioni cutanee sul corpo, febbre, dolori muscolari, ecc.). Tuttavia, in determinate fasi, la malattia non si manifesta in modo così chiaro. Alcune settimane dopo l'infezione, i sintomi scompaiono e il paziente può erroneamente credere di essersi ripreso. Per questo motivo, ci sono un certo numero di casi in cui l'analisi ELISA è obbligatoria:
- Quando si fa domanda per un lavoro presso imprese in cui vi è contatto con un gran numero di persone, cibo, bambini e beni medici.
- Quando si registra una donna incinta. La malattia viene trasmessa da una madre malata a un bambino, quindi è importante identificarla in tempo.
- Quando si dona il sangue. Prima di donare il sangue, il donatore deve controllarlo per infezioni pericolose, inclusa la sifilide.
- Durante la preparazione per l'intervento chirurgico. Tali interventi comportano il contatto diretto con il sangue del paziente. Questo potrebbe non essere sicuro per il personale medico e altri pazienti della clinica.
- Quando i sintomi vengono rilevati in uno dei partner sessuali. In questo caso, anche il secondo partner è tenuto a donare il sangue per un prelievo.
- Durante il servizio militare, così come in caso di reclusione. Entrambe le situazioni comportano un contatto prolungato con un gran numero di persone. Poiché la malattia viene trasmessa non solo per contatto sessuale, ma anche per contatto domestico, qualsiasi persona dall'ambiente della persona infetta è a rischio.
Come si svolge?
La caratteristica principale dell'ELISA è l'elevata accuratezza dei dati. Permette non solo di rilevare gli anticorpi, ma anche di determinare il loro rapporto quantitativo.
Ciò significa che il dosaggio immunoenzimatico consente di identificare la malattia con una probabilità del 99,99% e allo stesso tempo di determinare in quale fase di sviluppo si trova attualmente la malattia.
Quando si esegue un ELISA, il sangue viene prelevato da un paziente da una vena. Poi viene preparato in modo speciale e posto su un pannello di polistirolo con molti fori. Durante la diagnosi, al siero del sangue vengono aggiunti enzimi speciali che, in presenza di anticorpi / antigeni della malattia, formano forti legami con essi.
Il risultato della formazione di tali composti è un cambiamento nel colore del plasma sanguigno nel pozzo (da incolore a giallo brillante). È sufficiente che un operatore di laboratorio valuti visivamente il risultato per capire che il sangue del paziente è sul pannello.
Interpretazione dei risultati
Con ELISA per la sifilide viene valutata la presenza di 3 classi di anticorpi (immunoglobuline): A, M e G. Queste sostanze si formano nel sangue di una persona infetta in una sequenza rigorosamente definita:
- La presenza di immunoglobulina A indica che è passato più di un mese dall'infezione da treponema pallidum.
- Gli anticorpi M vengono alla luce all'atto di presenza lunga di un'infezione in un organismo. Possono anche essere una reazione a un'esacerbazione di una malattia cronica.
- L'immunoglobulina G viene prodotta dall'organismo al culmine della malattia, così come dopo che il trattamento è già stato effettuato.
L'intensità della colorazione del plasma sanguigno in giallo brillante durante l'ELISA indica direttamente la quantità di anticorpi. Se il colore del plasma è leggermente giallastro, i risultati vengono messi in discussione e la procedura viene ripetuta. Con un risultato negativo, il colore del plasma non cambia e rimane trasparente.
Risultato ELISA falso positivo
Per tutta la vita, una persona molto spesso deve fare un ELISA per la sifilide (prima di trovare un lavoro, ecc.). Un risultato positivo diventa sempre stressante. Tuttavia, non farti prendere dal panico prima del tempo! A volte ELISA può dare un risultato falso positivo. In questo caso, ha senso riesaminare.
Gli esperti non consigliano di preoccuparsi dopo il primissimo risultato ELISA positivo, poiché questo studio ha lo scopo di identificare non il pallido treponema in sé, ma gli anticorpi che il corpo produce in risposta all'attacco di batteri patogeni. ELISA - analisi con elevata precisione (la probabilità di errore è inferiore all'1%). In caso di dubbio, i medici non formulano immediatamente una diagnosi, ma offrono al paziente di donare nuovamente il sangue.
Una risposta ELISA falsamente positiva è possibile nelle malattie:
- tessuto connettivo, articolazioni (vasculite, artrite reumatoide, ecc.);
- cuore (principalmente per malattie infiammatorie: miocardite, endocardite);
- sistema endocrino (diabete);
- infettive (epatite, tubercolosi, ecc.).
Un risultato falso positivo può verificarsi durante la gravidanza o se la paziente è stata vaccinata poco prima dell'ELISA. L'uso di alcol e droghe può anche cambiare i risultati dell'analisi non in meglio.
In un numero abbastanza elevato di casi si ottiene una reazione positiva controllando il sangue di pazienti già sottoposti a trattamento. Nel 10% dei guariti, una reazione positiva rimane per tutta la vita, poiché una certa quantità di anticorpi circola costantemente nel sangue come risposta immunitaria a una malattia di una volta.
Risultato falso negativo
Insieme a un falso positivo, è possibile anche una reazione falsa negativa. All'inizio della malattia, quando il treponema è appena entrato nel corpo, gli anticorpi vengono prodotti in quantità insufficienti per essere rilevati. Gli enzimi potrebbero non risolverli, quindi i risultati dell'ELISA sono negativi.
Se ci sono sospetti di sifilide (il paziente ha avuto rapporti sessuali non protetti, in un modo o nell'altro era in contatto con possibili pazienti, ecc.), Viene eseguita una seconda analisi.
Esame delle persone di contatto
Esiste un certo protocollo di azioni nel caso in cui una malattia sia stata rilevata in un paziente con certezza al 100%. Prima di tutto, l'esame viene effettuato dal suo partner sessuale: marito, moglie, altre persone che hanno avuto un rapporto intimo con la persona infetta. A questo proposito, i medici sono categorici. L'esame dei partner sessuali è obbligatorio per evitare la diffusione di una malattia pericolosa.
Tutti i membri della famiglia del paziente vengono curati, anche se i loro test hanno mostrato un risultato negativo. Ricorda: la sifilide è una malattia acutamente contagiosa trasmessa dal contatto domestico. I bambini e altri membri della famiglia possono contrarre il treponema mentre usano il bagno, gli asciugamani e i piatti condivisi.
Azioni dopo la conferma della diagnosi
Non appena i dati ELISA per la sifilide vengono confermati, la persona infetta e coloro che sono in contatto con lui vengono curati con antibiotici. Tutte le raccomandazioni del medico - dosaggio, frequenza dei farmaci - devono essere seguite esattamente!
Per la durata del trattamento, ai cittadini che lavorano viene rilasciato un certificato con una diagnosi crittografata secondo ICD-10. Dopo una cura completa, il libro medico viene esteso. Il lavoratore recuperato può iniziare le sue mansioni immediate. Il datore di lavoro non ha il diritto di rifiutare di reintegrarlo nel posto di lavoro.
Questi sono i dati di base per l'ELISA. Coloro che si infettano devono ricordare: la diagnosi non pone fine all'intera vita successiva del paziente. Ora ci sono farmaci efficaci che possono curare in modo affidabile questa malattia. L'esame e il trattamento tempestivi possono evitare le conseguenze più pericolose della malattia e proteggerne altri membri della società.
Per condurre una valutazione completa dello stato del corpo, viene utilizzato un metodo diagnostico ELISA. Il test del sangue ELISA è progettato per diagnosticare immunodeficienze infettive, ematologiche, primarie e secondarie.
Cos'è l'analisi ELISA
Molti pazienti sono interessati al metodo ELISA: cos'è, a cosa serve lo studio. Il dosaggio immunoenzimatico è stato utilizzato relativamente di recente. Inizialmente, è stato utilizzato per studiare le strutture antigeniche ed è stato eseguito solo per scopi scientifici. Quindi gli scienziati sono giunti alla conclusione che con l'aiuto degli enzimi è possibile identificare anticorpi specifici che si presentano in risposta a una malattia in corso.
Inizialmente, questa tecnica era utilizzata solo da istituzioni mediche di profilo ristretto, principalmente nelle stazioni di trasfusione di sangue. Di particolare importanza è il metodo ELISA per rilevare l'infezione da HIV.
Oggi questo metodo ha un ampio campo di applicazione. I laboratori moderni lo usano per diagnosticare:
- tumori;
- disturbi ormonali;
- infezioni;
- processi infettivi cronici o precedentemente trasferiti;
- elminti.
Se si verifica un processo infettivo nel corpo, questo tipo di diagnosi è considerato il più ottimale per determinare il tipo di malattia.
L'essenza del metodo e dei suoi tipi
Metodo ELISA: cos'è, qual è l'essenza di questo tipo di ricerca? Questa e molte altre domande interessano i pazienti. La base di questo metodo diagnostico è il legame delle cellule immunitarie del corpo agli antigeni degli agenti infettivi. Il complesso risultante viene determinato utilizzando un enzima speciale.
Per comprendere il principio del metodo ELISA, è necessario sapere come procede la reazione antigene-anticorpo. Un antigene è una molecola proteica estranea al corpo che entra insieme all'infezione. Anche le particelle di sangue estraneo che non corrispondono nel gruppo sono considerate antigeni. Nel corpo provocano una risposta immunitaria volta a proteggere dalle sostanze estranee. Pertanto, il corpo umano produce anticorpi - immunoglobuline che possono attaccarsi agli antigeni, formando un complesso immunitario. Tali composti sono molto più facili da riconoscere e distruggere dalle cellule immunitarie.
La reazione per la presenza di tali immunocomplessi viene effettuata in laboratorio, utilizzando composti già pronti per determinare se ce ne sono di simili nel sangue.
L'essenza del metodo ELISA è abbastanza semplice, tuttavia, poiché viene eseguito un esame del sangue per rilevare molte infezioni e malattie, esistono molte delle sue varietà. Ciascuno differisce nello schema di condotta e nell'ambito. Può essere ELISA diretto o indiretto. Il metodo diretto implica l'utilizzo di anticorpi immobilizzati che reagiscono con gli antigeni. Il vantaggio principale di questo metodo è che tutti i processi possono essere automatizzati, il che significa che la diagnostica richiede un po' di tempo.
Il metodo indiretto implica l'utilizzo di anticorpi secondari. E sulla fase solida, l'antigene è immobilizzato. L'analisi consente di determinare gli anticorpi contro vari antigeni. Questo aiuta a ottenere un risultato più accurato, ma il metodo è complesso.
Vantaggi dello studio
Il metodo ELISA presenta molti vantaggi rispetto ad altri metodi diagnostici. I principali includono:
- alta sensibilità;
- stabilità durante la conservazione degli ingredienti;
- velocità della diagnostica;
- può essere utilizzata una piccola quantità di materiale di prova;
- è possibile automatizzare tutti i processi;
- l'infezione può essere rilevata in una fase precoce.
Questo metodo diagnostico è universale, quindi è adatto per l'esame di massa. Con l'aiuto dell'analisi è possibile tracciare la dinamica del decorso del processo infettivo.
Indicazioni per l'analisi e il campionamento del materiale
Condurre uno studio utilizzando il metodo ELISA può essere prescritto se si sospetta una varietà di malattie:
Il sangue venoso viene esaminato per la presenza di anticorpi. Prima dell'analisi, gli elementi che possono complicare lo studio vengono isolati da esso. Possono essere campionati anche altri fluidi biologici.
Per ottenere le informazioni più accurate, il prelievo di sangue viene effettuato a stomaco vuoto. Se la procedura è stata prescritta per determinare un'infezione latente, alcune settimane prima dell'analisi, dovresti interrompere l'assunzione di farmaci antibatterici e antivirali. A seconda dell'attrezzatura del laboratorio in cui è stato prelevato il materiale, il risultato può essere ottenuto entro un giorno. In casi di emergenza, questo tempo è ridotto a poche ore.
Analisi per la sifilide
L'uso del metodo ELISA aiuta a determinare la presenza di molte infezioni nel corpo, in particolare la sifilide. Per lo studio, il sangue viene prelevato da una vena a stomaco vuoto. Quindi viene condotto uno studio che aiuta a determinare non solo la presenza della malattia nell'organismo, ma anche i tempi esatti della sua insorgenza, poiché durante il decorso della malattia alcuni anticorpi vengono sostituiti da altri in un ordine rigorosamente definito.
Nella fase acuta, che indica un decorso prolungato della malattia, o durante un'esacerbazione di un'infezione cronica, nel sangue verranno rilevate immunoglobuline di tipo M. La presenza di immunoglobuline di tipo A indica che l'infezione vive nel corpo per più di 4 settimane. Le immunoglobuline del gruppo G indicano l'altezza della malattia o la terapia precedente.
In base al grado di colore dei pozzetti, viene valutata l'intensità del decorso del processo infettivo, poiché la sua saturazione dipende dal numero di complessi immunitari formati.
Test dell'HIV
Il metodo ELISA viene utilizzato anche per l'analisi in questo caso, ha alcune caratteristiche associate al decorso e alla progressione della malattia. Questo metodo di ricerca è considerato il più accettabile per la determinazione, tuttavia, dovrebbe essere eseguito non prima di un mese dall'esposizione ai fattori di rischio. Ciò è dovuto alla presenza di un periodo di incubazione che va dai 45 giorni ai 6 mesi. Ecco perché l'analisi deve essere ripetuta dopo sei mesi.
- ascariasis;
- giardiasi;
- toxoplasmosi, ecc.
Nonostante tutti i vantaggi, ci sono anche degli svantaggi del metodo ELISA. Lo svantaggio principale è che quando si conduce uno studio, il medico deve avere in anticipo un'ipotesi sulla malattia.
Quando non c'è modo di trovare accidentalmente l'agente patogeno e determinarne le proprietà del dosaggio immunoenzimatico. Il test indica solo la presenza di anticorpi nel sangue del paziente. Inoltre, questa è un'analisi piuttosto costosa.
Decifrare l'analisi
Il risultato di un ELISA qualitativo sarà la presenza di anticorpi o la loro assenza nel sangue. Se viene eseguita un'analisi quantitativa, la concentrazione di anticorpi può essere espressa in un valore numerico o in un certo numero di segni +.
Inoltre, indicatori come:
L'indicatore IgM indica il corso di un processo infettivo acuto nel corpo. La sua completa assenza può indicare l'assenza dell'agente eziologico della malattia o il suo passaggio allo stadio cronico.
Una lettura di IgA con un test IgM negativo indica un'infezione cronica o latente. La contemporanea presenza di IgM e IgA indica che la malattia è in fase acuta. La presenza di IgG indica il passaggio della malattia allo stadio cronico o il completo recupero e lo sviluppo dell'immunità.
Ora ci sono speciali test ELISA che puoi fare da solo.
L'elenco dei metodi diagnostici disponibili si è rapidamente ampliato negli ultimi decenni, i diagnostici stanno cercando di combinare i vantaggi di tutte le analisi precedenti in nuovi metodi, eliminando tutti i loro precedenti difetti.
Di recente, sempre più spesso nell'elenco delle procedure diagnostiche appare il dosaggio immunoenzimatico, un test moderno e abbastanza nuovo, poco noto a una persona comune che non è imparentata con la medicina. Tuttavia, questa tecnica sta rapidamente reintegrando i ranghi dei suoi aderenti tra il personale medico qualificato. Che cos'è e in quali casi dovrebbe essere usato, puoi provare a capirlo familiarizzando con le sue caratteristiche e caratteristiche principali.
L'immunodosaggio enzimatico è una tecnica strumentale di laboratorio basata sulla reazione molecolare antigene-anticorpo, che consente di rilevare proteine specifiche in materiali biologici (campioni per la ricerca). Tali proteine possono essere enzimi, vari microrganismi (virus, batteri, funghi), protozoi, ecc.
Dopo la scoperta del metodo, gli è stato dato il nome test ELISA, che non è correlato al nome degli scopritori, ma è un'abbreviazione del nome completo nella versione inglese - test immunoassorbente legato all'enzima. I medici di tutto il mondo usano questo nome, anche alcuni medici nei paesi di lingua russa chiamano questo tipo di studio.
Il principio principale del metodo è la reazione molecolare "antigene-anticorpo".
Un antigene è qualsiasi molecola estranea che entra nel corpo umano come parte di un microbo patogeno. Gli antigeni sono generalmente molecole proteiche. Oltre ai microrganismi, un tale "straniero" può essere cellule del sangue di qualcun altro che non corrispondono al gruppo o al fattore Rh.
In risposta all'ingresso di un tale antigene nel corpo, viene lanciata una reazione immunitaria, che ha lo scopo di proteggere da eventuali molecole estranee. Ciò si verifica a causa della sintesi di agenti speciali del sistema immunitario: anticorpi (immunoglobuline). Ogni anticorpo si avvicina solo a un certo antigene e neutralizza il patogeno "outsider", legandosi ad esso in un unico complesso. È il processo di tale legame che si chiama reazione antigene-anticorpo.
Tipi di anticorpi
Tutti gli anticorpi (immunoglobuline) sono divisi in 5 tipi a seconda dello stadio della risposta immunitaria in cui compaiono:
Per la diagnostica ELISA, i livelli di immunoglobuline IgG, IgM e IgA sono molto spesso importanti. Dai loro crediti, puoi scoprire se una persona ha avuto una malattia in precedenza o si è infettata di recente, se ha sviluppato un'immunità o se il suo corpo è indifeso contro la patologia.
Vantaggi e svantaggi del dosaggio immunoenzimatico
Al momento, ELISA è uno dei metodi più accurati e sensibili. È stato adottato da specialisti in vari campi della medicina e continua ad ampliare il suo campo di applicazione.
Vantaggi del metodo
- Elevata precisione dei dati ricevuti.
- Sensibilità (consente di rilevare la sostanza richiesta anche con la minima presenza dell'agente patogeno nel campione).
- La possibilità di diagnosi nei primi giorni della malattia o nel periodo di incubazione.
- La velocità di acquisizione dei dati rispetto ad altri metodi di accuratezza simile.
- Alta automazione del processo e minima partecipazione umana, che riduce l'errore dell'esecutore.
- Ottenere dati sullo stadio del processo patologico e sull'efficacia della terapia selezionata.
- Indolore e bassa invasività nella scelta del materiale.
Svantaggi del metodo
- Nella maggior parte dei casi, consente di determinare la risposta del corpo a un agente patogeno e non l'agente patogeno stesso.
- Prima dello studio, la malattia sospetta deve essere nota con precisione, poiché il test è altamente specifico.
- La probabilità di falsi indicatori causati da problemi tecnici, assunzione di farmaci, presenza simultanea di diverse malattie croniche o disturbi metabolici nel corpo del paziente.
- L'interpretazione dei risultati dovrebbe essere eseguita solo da uno specialista altamente qualificato, poiché per interpretare i dati ottenuti è necessario disporre di una formazione specifica e di un ampio bagaglio di conoscenze mediche in una determinata area.
- L'ELISA è un'analisi piuttosto rara, pertanto non viene eseguita in tutti i laboratori diagnostici.
- Il metodo è piuttosto costoso, poiché oltre ai reagenti, il laboratorio deve disporre di numerose attrezzature costose e campioni di antigeni prodotti presso istituti speciali.
Quando viene utilizzato il dosaggio immunoenzimatico?
L'elenco completo delle indicazioni per la nomina del dosaggio immunoenzimatico è molto ampio, comprende quasi tutte le branche della medicina.
Molto spesso, ELISA viene utilizzato per tali scopi:
- rilevamento di malattie infettive;
- diagnosi delle malattie veneree;
- determinazione dello stato immunitario o di singole malattie autoimmuni;
- identificazione di marcatori tumorali;
- definizione di ormoni.
Nel caso di malattie infettive e virali, la tecnica consente di identificare le seguenti patologie:
Inoltre, ELISA consente di determinare in modo rapido ed efficace un infarto, valutare il potenziale riproduttivo del corpo, identificare le allergie, la sua fonte, ecc.
La tecnica ELISA viene utilizzata per condurre studi clinici nello sviluppo di nuovi farmaci e nella valutazione del loro impatto sul corpo umano.
Tipi di campioni e metodi della loro selezione per la ricerca
Molto spesso, il materiale di prova per il dosaggio immunoenzimatico è il sangue, che viene prelevato dalla vena cubitale del paziente. Il campionamento viene effettuato a stomaco vuoto, prevalentemente al mattino. Dopo la selezione dal sangue, quelle cellule formate che interferiscono con lo studio vengono separate e rimosse, lasciando solo il siero.
Quando si diagnosticano infezioni genito-urinarie, gli strisci delle mucose degli organi genitali, il muco dell'uretra o della cervice, i campioni dal retto, i raschiamenti da erosioni o ulcere nella zona inguinale e da altre parti del corpo diventano spesso materiali. Gli strisci possono essere prelevati dalla cavità orale e dal rinofaringe.
A volte il dosaggio immunoenzimatico viene utilizzato nella pratica ostetrica e ginecologica durante la gravidanza per determinare la condizione del liquido amniotico. In questo caso, il liquido amniotico diventa il campione. Per fare ciò, viene prelevata una piccola quantità di liquido perforando la vescica fetale con un lungo ago. Tutte le manipolazioni vengono eseguite con uno strumento sterile per ridurre al minimo i possibili rischi.
Spesso il materiale diventa fluido cerebrospinale o sieroso. Questo accade con l'anestesia locale, che viene iniettata.
Specificare quale tipo di materiale è necessario per il dosaggio immunoenzimatico, lo specialista che invia allo studio dovrebbe. Spesso vengono prelevati campioni di diversi tipi contemporaneamente o da luoghi diversi. Il medico che effettua l'invio per questo tipo di esame deve informare il paziente anche della preparazione alla consegna del biomateriale.
Preparazione per immunodosaggio enzimatico
Per aumentare l'accuratezza dei dati ottenuti dopo il dosaggio immunoenzimatico, la preparazione per la selezione del materiale dovrebbe essere la seguente:
- 10 giorni prima dello studio, escludere antibiotici, farmaci antivirali e antimicotici;
- per un giorno è necessario escludere l'alcol, il fumo e l'assunzione di droghe;
- nello stesso periodo è necessario evitare sforzi fisici eccessivi;
- informare il prescrittore di tutti i farmaci che il paziente sta assumendo;
- Informare il medico in caso di gravidanza o sospetta gravidanza.
È meglio se i materiali per il test vengono selezionati al mattino a stomaco vuoto.
Se la diagnosi mira a determinare lo stato del background ormonale, è importante garantire uno stato calmo alla vigilia ed evitare la tensione nervosa. Per le donne, la donazione di sangue per gli ormoni è chiaramente determinata dal periodo del ciclo mensile, che sarà discusso dal medico al momento dell'appuntamento.
2-3 giorni prima del campionamento, i cibi fritti e grassi dovrebbero essere esclusi dal menu e gli agrumi e qualsiasi altra frutta e verdura arancione e gialla non dovrebbero essere consumati prima del test dell'epatite.
Decifrare i risultati del dosaggio immunoenzimatico
Il risultato di uno studio qualitativo, di norma, è indicato dai segni "+" (trovato) o "-" (non trovato).
Dalla presenza o assenza di determinati gruppi di immunoglobuline, si possono trarre le seguenti conclusioni:
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) - l'immunità alla malattia è completamente assente (il corpo non ha mai incontrato questo tipo di antigene prima);
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) - in precedenza c'era stata una collisione con questo antigene o con un vaccino;
- JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - processo patologico acuto (molto probabilmente primario);
- JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - decorso cronico;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) - ricaduta;
- JgM (-) - fase di recupero.
I valori quantitativi trasportano un grande carico di informazioni, ma solo il medico curante è in grado di interpretarli, sulla base di precedenti indicazioni, dell'età del paziente e delle norme per ciascuna specifica malattia. Per questo motivo, è impossibile valutare i risultati da soli.
Quanto tempo aspettare per i risultati
Questa tecnica ha molte varietà, a seconda delle quali viene determinato il termine per ottenere i dati disponibili. La durata media della diagnostica ELISA è di 4-6 ore, il che consente di emettere i risultati il giorno successivo.
I metodi più lunghi richiedono fino a 10 giorni, ad esempio, in caso di rilevamento dell'infezione da HIV.
In caso di necessità urgente, è possibile utilizzare modalità espresse, in cui la risposta si ottiene entro 1-2 ore.
Dove posso ottenere un test ELISA?
Poiché l'attrezzatura per questo tipo di diagnostica è piuttosto costosa, non tutti i laboratori possono acquistarla. Inoltre, i test contenenti antigeni specifici hanno una durata di conservazione limitata (di solito circa 1 anno), quindi devono essere costantemente aggiornati.
Per questi motivi, le istituzioni mediche statali non sempre dispongono di laboratori ELISA. Molto spesso, è necessario contattare grandi centri medici privati o grandi centri diagnostici.
Per condurre uno studio ELISA, il laboratorio deve disporre di una licenza speciale e il personale e gli assistenti di laboratorio devono seguire una formazione specifica.
Molto spesso, il medico che dirige il paziente per l'esame raccomanda un centro diagnostico o un laboratorio specifico.
Il costo del dosaggio immunoenzimatico
Il prezzo per questo studio dipende dalla regione del paese e dal livello della clinica che fornisce il servizio. A Mosca, il prezzo minimo per la determinazione di un antigene parte da 700 rubli. Se è necessario identificare più immunoglobuline contemporaneamente, il prezzo verrà riassunto.
In caso di analisi urgente, il costo aumenta di 150-200 rubli. per ogni antigene.
Nonostante il costo piuttosto elevato, il dosaggio immunoenzimatico consente di rendere l'esame del paziente il più informativo e rapido possibile, il che riduce il tempo prima dell'inizio del trattamento e consente di stabilizzare rapidamente le condizioni della persona.
Questo video mostra il film "Fundamentals of enzyme immunoassay".
Con il progresso della medicina moderna, è possibile effettuare diagnosi più approfondite in caso di sospetto di determinate patologie in un paziente. Uno dei metodi informativi della ricerca di laboratorio era l'analisi ELISA, che viene eseguita prelevando sangue venoso. Cioè, nulla cambia per il paziente nel suo insieme. Ma l'assistente di laboratorio ELISA conduce una tecnica complessa per studiare il biomateriale raccolto. Quali sono le analisi ELISA e quali sono le sottigliezze dell'utilizzo del metodo ELISA come diagnostico, comprendiamo il materiale di seguito.
Cos'è un test immunoenzimatico?
La produzione di anticorpi è provocata dagli antigeni stessi che sono entrati nel corpo umano. Entrando nella "battaglia" per la salute del corpo, gli anticorpi, per così dire, si contrassegnano con antigeni, che è ciò che l'assistente di laboratorio vede in un esame del sangue. Cioè, nel biomateriale raccolto, è possibile rintracciare non solo la presenza di un'infezione, ma anche le sue tracce dopo che il corpo si è completamente ripreso.
Pertanto, prescrivendo un test di immunoassorbimento enzimatico per un paziente, il medico curante può monitorare la durata dell'infezione, il grado della sua progressione o identificare la presenza di immunità a una particolare infezione.
Il processo diagnostico ELISA si presenta così:
- Il sangue venoso prelevato viene portato in laboratorio allo stato di siero sanguigno;
- Quindi l'assistente di laboratorio utilizza un vassoio speciale con cellule, ognuna delle quali contiene già tutti gli antigeni necessari. È sufficiente far cadere il siero del sangue in ogni cellula e monitorare la reazione delle immunoglobuline (anticorpi) agli antigeni. La presenza della reazione "desiderata" è indicata da un cambiamento nel colore del materiale in esame. In futuro, l'assistente di laboratorio studia la densità ottica del mezzo in studio.
- Ascariasi ed enterobiasi (ascaridi e ossiuri);
- Trichinosi;
- Opisthorchiasis in forme acute e croniche;
- Giardiasi;
- Amebiosi;
- Toxoplasmosi;
- Leishmaniosi in qualsiasi forma.
Importante: il dosaggio immunoenzimatico può essere sia qualitativo che quantitativo. Nel primo caso, l'assistente di laboratorio si limita a confermare o smentire la presenza della sostanza desiderata nel sangue. Nel secondo caso, a seguito dell'analisi, viene indicata la sua concentrazione nel corpo del paziente.
Svantaggi del metodo
Con tutti i vantaggi di questo metodo diagnostico, dovrebbe essere chiaro che un test immunoenzimatico non è un modo per trovare la causa della malattia di un paziente, ma solo un metodo per confermare la diagnosi presunta dal medico curante. E in considerazione del fatto che lo studio è piuttosto costoso, deve essere usato con saggezza. In questo caso, i risultati dello studio dovrebbero essere interpretati solo da uno specialista qualificato.
Decifrare i risultati
Dopo che abbiamo smontato la sigla IFA e di cosa si tratta ─ scoperto, vale la pena passare all'interpretazione dei risultati. È importante capire qui che se l'analisi è stata eseguita qualitativamente, il risultato sarà solo positivo o negativo. Cioè, la diagnosi conferma i sospetti del medico su una particolare diagnosi o li confuta. In questo caso, il modulo conterrà rispettivamente i simboli "+" o "-".
Importante: un risultato negativo del test non indica sempre l'assenza di infezione. Il fatto è che gli anticorpi contro gli antigeni possono formarsi entro 14 giorni dall'infezione ed è probabile che non si siano ancora formati.
Se viene eseguita un'analisi quantitativa, qui vengono determinati il \u200b\u200btipo di anticorpi, il loro numero e lo stadio di attività. In particolare, con tale diagnosi, vengono determinati gli anticorpi (immunoglobuline) IgG e IgM, che si formano in diversi periodi di progressione dell'infezione. I risultati più comuni in questo caso sono:
- IgM elevate e completa assenza di IgG. Questa immagine indica un'infezione recente e una fase acuta della patologia.
- Aumento dell'attività di entrambi i tipi di immunoglobuline (IgM e IgG). Parla di un decorso a lungo termine e cronico del processo infettivo.
- Attività IgG e completa assenza di IgM. L'infezione è avvenuta almeno sei mesi fa e ora il virus è in una fase cronica prolungata.
- Assenza di anticorpi IgG e IgA. Il risultato è indefinito.
- Assenza di anticorpi IgM, IgA e IgG. Indica una mancanza di immunità a un'infezione specifica.
- L'attività degli anticorpi IgG, IgM e IgA indica un'esacerbazione di un processo cronico.
Oltre a identificare i tipi di anticorpi, l'assistente di laboratorio in un'apposita colonna del modulo indica anche il loro numero per volume di sangue. Ricorda, avendo capito cos'è il metodo ELISA, non interpretare tu stesso i risultati. I risultati ottenuti possono essere interpretati con esattezza solo dal medico curante, in funzione della diagnosi proposta, costruita sulla base del quadro clinico del paziente.