آزمایش خون الایزا یک روش رایج برای تشخیص پاتولوژی های مختلف است. نتیجه آزمایش خون که رمزگشایی ELISA توسط پزشک تشخیص آزمایشگاهی تفسیر شده است، در اکثر موارد قابل اعتماد است.
الایزا چیست؟
الایزا یک روش تشخیصی مدرن است که برای تشخیص عفونت ها، اختلالات هورمونی و ایمنی و بیماری های انکولوژیک در آزمایشگاه استفاده می شود. این روش به شما امکان می دهد تا آنتی بادی های عفونت را در مراحل اولیه بیماری شناسایی کنید.این روش به روش های غیرمستقیم تشخیصی تعلق دارد، زیرا پاسخ ایمنی بدن را آشکار می کند. از جمله مزایای ELISA در مقایسه با سایر روش های تشخیصی، می توان سطح بالایی از ساخت را مشخص کرد که احتمال خطا را کاهش می دهد. این روش بسیار حساس است و برای تشخیص بیماری ها در کودکان و بزرگسالان استفاده می شود. تعداد زیادی از اصلاحات مختلف الایزا وجود دارد.
روش الایزا بر اساس ویژگی واکنش های ایمونوشیمیایی و همچنین الگوهای فیزیکوشیمیایی واکنش های کمپلکس های آنتی ژن-آنتی بادی است. واکنش ها با مشارکت آنزیم های خاصی تولید می شوند که برچسب هایی برای تشخیص آنتی بادی ها هستند. در نتیجه یک واکنش ایمونوشیمیایی، آنتی بادی های کاملاً تعریف شده به آنتی ژن های مربوطه متصل می شوند. آزمایش خون توسط ایمونواسی آنزیمی تقریباً احتمال به دست آوردن نتیجه مثبت کاذب را از بین می برد. متخصصان تشخیص آزمایشگاهی بر اساس رنگ آمیزی محلول در طول نشانه آنزیمی مجموعه آنتی ژن-آنتی بادی، نتیجه مثبت یا منفی را قضاوت می کنند. اگر محلول رنگی باشد، سپس آنتی ژن با آنتی بادی تعامل داشته باشد، نتیجه ELISA مثبت است.
چه بیماری هایی را می توان با الایزا تشخیص داد
مطالعه با روش ایمونواسی آنزیمی اجازه می دهد:
- شناسایی تعدادی از بیماری های عفونی؛
- تشخیص بیماری های خود ایمنی؛
- برای تشخیص وجود انکولوژی؛
- شناسایی اختلالات هورمونی؛
- تحقیقات دیگری انجام دهید
آزمایش خون توسط ELISA به شما امکان می دهد وجود عفونت های زیر را تعیین کنید:
این روش برای شناسایی آنتی ژن های پاتوژن های تعدادی از عفونت ها و همچنین برای شناسایی آنتی بادی های کلاس های مختلف استفاده می شود. روش الایزا برای تشخیص سیفلیس، HIV و هپاتیت ویروسی محبوبیت زیادی به دست آورده است. تعیین وجود و سطح آنتی بادی در سرم خون برای تشخیص اولیه STI توصیه نمی شود. در این صورت وجود آنتی بادی در خون تنها می تواند نشانه ای از تماس بدن بیمار با عامل عفونی در گذشته باشد.
تشخیص انواع بیماری های خودایمنی با روش الایزا از طریق مطالعه موارد زیر انجام می شود:
- اجسام ضد هسته ای؛
- آنتی بادی های DNA دو رشته ای؛
- آنتی بادی برای آنتی ژن های هسته ای محلول (صفحه نمایش ENA)؛
- آنتی بادی های ضد کاردیولیپین؛
- IgG به پپتید سیترولین؛
- فاکتور روماتوئید؛
- پروتئین واکنشی C؛
- آنتی بادی های خود به آنتی ژن های سیتوپلاسمی نوتروفیل ها (غربالگری ANCA).
کمپلکس های ایمنی خاص مشخصه برخی از بیماری های خودایمنی هستند. به عنوان مثال، آنتی بادی های DNA دو رشته ای مشخصه بیماری هایی مانند لوپوس اریتماتوز سیستمیک هستند.
تعریف بیماری های انکولوژیک با سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم سرم خون برای نشانگرهای تومور خاص، مانند PSA، CA-125 انجام می شود.
PSA نشان دهنده وجود آدنوم پروستات و سرطان پروستات است. CA-125 نشانگر تومور سرطان تخمدان است. ارزش همچنین با تومورهای سرطانی رحم، غدد پستانی، آندومتر افزایش می یابد.
آماده سازی برای تجزیه و تحلیل
برای اطمینان از حداکثر دقت نتایج، باید قوانین خاصی را برای آماده شدن برای مطالعه دنبال کنید. تجزیه و تحلیل برای تشخیص آزمایشگاهی توسط ELISA، به عنوان یک قاعده، در صبح از ورید کوبیتال گرفته می شود. اهدای خون به شدت با معده خالی ضروری است. علاوه بر این نسخه ساده، توصیه های زیر برای آماده سازی باید رعایت شود:
- 24 ساعت قبل از مطالعه، لازم است الکل و سیگار را حذف کنید.
- اجتناب از فعالیت بدنی سنگین؛
- آرام بمان
- اجتناب از تنش عصبی؛
- اهدای خون برای الایزا زودتر از 10 روز پس از قطع دارو.
- در صورت مصرف داروهای مورد نیاز به پزشک خود اطلاع دهید.
علاوه بر این، چند روز قبل از انجام آزمایش، رعایت رژیم غذایی توصیه می شود. در عین حال، غذاهای چرب، غذاهای سرخ شده را از رژیم غذایی حذف کنید. قبل از آزمایش هپاتیت ویروسی، نه تنها غذاهای چرب و سرخ شده، بلکه مرکبات و همچنین سبزیجات نارنجی را از رژیم غذایی حذف کنید.
لازم به ذکر است که نتایج طیف خاصی از مطالعات هورمونی تحت تأثیر عاملی مانند مرحله چرخه قاعدگی قرار می گیرد. نیاز به تجزیه و تحلیل در یک یا مرحله دیگر از چرخه قاعدگی باید از قبل با پزشک خود در میان گذاشته شود. در غیر این صورت، ممکن است نتایج غیر منتظره ای دریافت کنید. به عنوان مثال، سطح طبیعی هورمون جنسی لوتئینیزه کننده در زنان بسته به روز چرخه متفاوت است:
- 1-12 روز - 2-14 mU / L.
- 12-14 روز - 24-150 mU / L.
- از 15 روز قبل از شروع چرخه جدید - 2-17 mU / L.
تفسیر نتایج الایزا
تجزیه و تحلیل به شما امکان می دهد تا حضور آنتی بادی های کلاس های مختلف را در بدن ایجاد کنید. 3 دسته از آنتی بادی ها وجود دارد:
تولید این آنتی بادی ها در مراحل مختلف بیماری رخ می دهد. آنتی بادی های IgM اولین آنتی بادی هایی هستند که پس از عفونت در بدن تولید می شوند. وجود آنها در هر صورت نشانگر بیماری است. در یک فرد سالم، این دسته از آنتی بادی ها وجود ندارد.
این ایمونوگلوبولین ها حدود 5-6 هفته در سرم خون وجود دارند.
ایمونوگلوبولین های کلاس G موجود در خون نشان می دهد که فرد یا قبلاً به این بیماری مبتلا بوده یا ناقل عفونت است. این آنتی بادی ها بعد از آنتی بادی های کلاس M در اکثر بیماری ها 3-4 هفته پس از عفونت شروع به تولید می کنند. حضور آنها در بدن برای چندین سال امکان پذیر است. و در برخی بیماری ها (مثلا سیفلیس)، IgG مادام العمر در خون وجود دارد.
اگر IgA در بدن وجود داشته باشد، لازم است تا حد امکان با عفونت مبارزه کرد. آنتی بادی های این کلاس فقط در مورد یک بیماری عفونی مزمن ظاهر می شوند. ناپدید شدن IgA نشان دهنده از بین رفتن عفونت است.
اگر آنالیز ELISA در کودکان زیر 1.5 سال انجام شود، ویژگی زیر باید در نظر گرفته شود: خون کودک حاوی IgG مادر به عفونت های مختلف است. این بدان معنا نیست که کودک بیمار است. در این مورد، آن را بیشتر هنجار است. وجود IgM شواهدی از عفونت داخل رحمی یا عفونت حاصل از تولد است. IgM مادر نمی تواند از جفت وارد بدن نوزاد شود.
جدول ترکیبات احتمالی وجود یا عدم وجود آنتی بادی های 3 کلاس در بدن و تفسیر آنها را نشان می دهد.
هنگام رمزگشایی تجزیه و تحلیل، (+) نشان دهنده یک نتیجه مثبت و (-) نشان دهنده مخالف است، یعنی یک نتیجه منفی. نتیجه، نشان دادن وجود یا عدم وجود هر ماده ای در بدن، کیفی نامیده می شود. می توان آن را با مقدار کمی تکمیل کرد. نتیجه کمی، محتوای کمی مواد مختلف در بدن را نشان می دهد.
لازم به ذکر است که سیستم های آزمایشی دارای مقادیر مرجعی هستند که توسط سازنده تعریف شده است که شاخص ها را مشخص می کند. تجاوز از مقادیر مرجع، به عنوان یک قاعده، به معنای وجود آسیب شناسی خاص در بدن موضوع است.
پس از دریافت نتایج الایزا، پزشک معالج باید مقادیر به دست آمده را رمزگشایی کند. فقط او می تواند ارزیابی درستی از نتایج انجام دهد و مرحله بیماری را تعیین کند.
در تماس با
ELISA - آنزیم ایمونواسی - یکی از پیشرفته ترین روش ها برای تشخیص سیفلیس است. این علائم وجود عامل ایجاد کننده بیماری را در مراحل مختلف دومی نشان می دهد. این تجزیه و تحلیل بر اساس شناسایی آنتی بادی های خاصی است که در خون بیمار با وارد شدن ترپونما پالیدوم (یک پاتوژن باکتریایی) به بدن ظاهر می شود.
روش الایزا نه تنها برای گروهی از بیماری های مقاربتی کار می کند. به همان اندازه برای تشخیص بیماری های عفونی مختلف کاربرد دارد. اصل تحلیل در دهه 60 قرن گذشته توسعه یافت. با این حال، تنها پس از 20 سال شروع به استفاده فعال کرد.
اکنون از الایزا برای تشخیص سیفلیس، ایدز، سل و بسیاری از بیماری های دیگر استفاده می شود. برای شناسایی آنتی بادی ها، از آنزیم های طراحی شده ویژه ای استفاده می شود که به طور فعال به پروتئین های خاص خون واکنش نشان می دهند.
الایزا در چه مواردی تجویز می شود؟
خود بیمار در صورت داشتن علائم مشکوک (بثورات مشخصه روی بدن، تب، درد عضلانی و غیره) می تواند برای تجزیه و تحلیل به کلینیک مراجعه کند. با این حال، در مراحل خاص، بیماری خود را به وضوح نشان نمی دهد. چند هفته پس از عفونت، علائم ناپدید می شوند و بیمار ممکن است به اشتباه باور کند که بهبود یافته است. به همین دلیل، تعدادی از موارد وجود دارد که تجزیه و تحلیل ELISA اجباری است:
- هنگام درخواست برای کار در شرکت هایی که با تعداد زیادی از افراد در تماس است، مواد غذایی، کودکان و کالاهای پزشکی.
- هنگام ثبت نام یک زن باردار. این بیماری از مادر بیمار به نوزاد منتقل می شود، بنابراین شناسایی به موقع آن مهم است.
- هنگام اهدای خون قبل از اهدای خون، اهداکننده باید آن را از نظر عفونت های خطرناک از جمله سیفلیس بررسی کند.
- در حین آمادگی برای جراحی چنین مداخلاتی شامل تماس مستقیم با خون بیمار است. این ممکن است برای کادر پزشکی و سایر بیماران کلینیک ناامن باشد.
- هنگامی که علائم در یکی از شرکای جنسی تشخیص داده می شود. در این صورت، شریک دوم نیز ملزم به اهدای خون برای نمونه است.
- در طول خدمت سربازی و همچنین در مورد زندان. هر دو موقعیت شامل تماس طولانی مدت با تعداد زیادی از افراد است. از آنجایی که این بیماری نه تنها از طریق تماس جنسی، بلکه از طریق تماس خانگی نیز منتقل می شود، هر فردی از محیط اطراف فرد مبتلا در معرض خطر است.
چگونه انجام می شود؟
ویژگی اصلی ELISA دقت بالای داده ها است. این اجازه می دهد تا نه تنها آنتی بادی ها را شناسایی کنید، بلکه نسبت کمی آنها را نیز تعیین کنید.
این بدان معنی است که ایمونواسی آنزیمی امکان شناسایی بیماری را با احتمال 99.99٪ و در عین حال تعیین اینکه بیماری در حال حاضر در چه مرحله ای از توسعه قرار دارد، امکان پذیر می کند.
هنگام انجام الایزا، خون از یک ورید از بیمار گرفته می شود. سپس به روش خاصی آماده می شود و روی صفحه پلی استایرن با سوراخ های زیاد قرار می گیرد. هنگام تشخیص، آنزیم های خاصی به سرم خون اضافه می شود که در صورت وجود آنتی بادی ها / آنتی ژن های بیماری، پیوندهای قوی با آنها ایجاد می کنند.
نتیجه تشکیل چنین ترکیباتی تغییر رنگ پلاسمای خون در چاه (از بی رنگ به زرد روشن) است. کافی است یک کارگر آزمایشگاه به صورت بصری نتیجه را ارزیابی کند تا بفهمد خون بیمار روی پانل است.
تفسیر نتایج
با الایزا برای سیفلیس، وجود 3 کلاس از آنتی بادی ها (ایمونوگلوبولین ها) ارزیابی می شود: A، M و G. این مواد در خون یک فرد آلوده در یک توالی کاملاً تعریف شده تشکیل می شوند:
- وجود ایمونوگلوبولین A نشان می دهد که بیش از یک ماه از ابتلا به ترپونما پالیدوم می گذرد.
- آنتی بادی های M با حضور طولانی مدت عفونت در ارگانیسم آشکار می شوند. آنها همچنین می توانند واکنشی به تشدید یک بیماری مزمن باشند.
- ایمونوگلوبولین G در اوج بیماری و همچنین پس از انجام درمان توسط بدن تولید می شود.
شدت رنگ آمیزی پلاسمای خون به رنگ زرد روشن در طی الایزا مستقیماً میزان آنتی بادی ها را نشان می دهد. اگر رنگ پلاسما کمی مایل به زرد باشد، نتایج زیر سوال رفته و این روش تکرار می شود. با نتیجه منفی، رنگ پلاسما تغییر نمی کند و شفاف باقی می ماند.
نتیجه الیزا مثبت کاذب
در طول زندگی، فرد اغلب مجبور است برای سیفلیس (قبل از گرفتن شغل و غیره) ELISA انجام دهد. یک نتیجه مثبت همیشه استرس زا می شود. با این حال، قبل از زمان وحشت نکنید! گاهی اوقات الایزا می تواند نتیجه مثبت کاذب بدهد. در این صورت بررسی مجدد منطقی است.
کارشناسان توصیه نمی کنند پس از اولین نتیجه مثبت ELISA نگران باشید، زیرا هدف این مطالعه شناسایی نه خود ترپونما رنگ پریده، بلکه آنتی بادی هایی است که بدن در پاسخ به حمله باکتری های بیماری زا تولید می کند. ELISA - تجزیه و تحلیل با دقت بالا (احتمال خطا کمتر از 1٪). در صورت شک، پزشکان بلافاصله تشخیص نمی دهند، بلکه به بیمار پیشنهاد می کنند که دوباره خون اهدا کند.
پاسخ مثبت کاذب الایزا در بیماری ها ممکن است:
- بافت همبند، مفاصل (واسکولیت، آرتریت روماتوئید و غیره)؛
- قلب (عمدتا برای بیماری های التهابی: میوکاردیت، اندوکاردیت)؛
- سیستم غدد درون ریز (دیابت)؛
- عفونی (هپاتیت، سل و غیره).
نتیجه مثبت کاذب ممکن است در دوران بارداری یا اگر بیمار کمی قبل از الایزا واکسینه شده باشد، رخ دهد. استفاده از الکل و مواد مخدر همچنین می تواند نتایج تجزیه و تحلیل را تغییر دهد نه بهتر.
در تعداد نسبتاً زیادی از موارد، با بررسی خون بیمارانی که قبلا تحت درمان قرار گرفته اند، یک واکنش مثبت به دست می آید. در 10 درصد از افراد معالجه شده، یک واکنش مثبت مادام العمر باقی می ماند، زیرا مقدار معینی از آنتی بادی ها به عنوان پاسخ ایمنی به یک بیماری که یکبار شروع می شود، دائماً در خون گردش می کند.
نتیجه منفی کاذب
همراه با مثبت کاذب، یک واکنش منفی کاذب نیز ممکن است. در همان ابتدای بیماری، زمانی که ترپونما به تازگی وارد بدن شده است، آنتی بادی ها به مقدار کافی برای تشخیص تولید نمی شوند. آنزیم ها ممکن است آنها را برطرف نکنند، بنابراین نتایج ELISA منفی است.
اگر مشکوک به سیفلیس وجود داشته باشد (بیمار رابطه جنسی محافظت نشده داشته است، به هر طریقی با بیماران احتمالی در تماس بوده و غیره)، تجزیه و تحلیل دوم انجام می شود.
بررسی افراد تماس
در صورتی که بیماری در یک بیمار با اطمینان 100٪ تشخیص داده شود، پروتکل اقدامات خاصی وجود دارد. اول از همه، معاینه توسط شریک جنسی او انجام می شود: زن، زن، سایر افرادی که با فرد آلوده رابطه صمیمی داشته اند. در این زمینه پزشکان قاطعانه برخورد می کنند. معاینه شرکای جنسی برای جلوگیری از شیوع یک بیماری خطرناک الزامی است.
تمام اعضای خانواده بیمار تحت درمان قرار می گیرند، حتی اگر آزمایش آنها نتیجه منفی داشته باشد. به یاد داشته باشید: سیفلیس یک بیماری حاد مسری است که از طریق تماس خانگی منتقل می شود. کودکان و سایر اعضای خانواده هنگام استفاده از حمام، حوله های مشترک و ظروف ممکن است به ترپونما مبتلا شوند.
اقدامات پس از تایید تشخیص
به محض تایید داده های ELISA برای سیفلیس، فرد مبتلا و کسانی که با او در تماس هستند با آنتی بیوتیک درمان می شوند. تمام توصیه های پزشک - دوز، دفعات مصرف دارو - باید دقیقاً رعایت شود!
برای مدت زمان درمان، به شهروندان شاغل گواهی با تشخیص رمزگذاری شده مطابق با ICD-10 صادر می شود. پس از درمان کامل، کتاب پزشکی تمدید می شود. کارگر بهبود یافته می تواند وظایف فوری خود را آغاز کند. کارفرما حق ندارد از بازگرداندن او به محل کار خودداری کند.
اینها داده های اساسی برای ELISA هستند. کسانی که مبتلا می شوند باید به خاطر داشته باشند: تشخیص به کل زندگی بعدی بیمار پایان نمی دهد. در حال حاضر داروهای موثری وجود دارد که می تواند به طور قابل اعتماد این بیماری را درمان کند. معاینه و درمان به موقع می تواند از خطرناک ترین عواقب بیماری جلوگیری کند و سایر افراد جامعه را از آن مصون نگه دارد.
برای انجام یک ارزیابی جامع از وضعیت بدن، از روش تشخیصی ELISA استفاده می شود. آزمایش خون ELISA برای تشخیص نقص ایمنی عفونی، هماتولوژیک، اولیه و ثانویه طراحی شده است.
آنالیز الایزا چیست؟
بسیاری از بیماران به روش الایزا علاقه مند هستند: چیست، مطالعه برای چیست. ایمونواسی آنزیمی نسبتاً اخیراً مورد استفاده قرار گرفته است. در ابتدا برای مطالعه ساختارهای آنتی ژنی مورد استفاده قرار گرفت و فقط برای اهداف علمی انجام شد. سپس دانشمندان به این نتیجه رسیدند که با کمک آنزیم‌ها می‌توان آنتی‌بادی‌های خاصی را که در پاسخ به یک بیماری جاری ایجاد می‌شوند، شناسایی کرد.
در ابتدا، این روش تنها توسط موسسات پزشکی با مشخصات محدود، عمدتاً در ایستگاه‌های انتقال خون مورد استفاده قرار می‌گرفت. روش الایزا برای تشخیص عفونت HIV از اهمیت ویژه ای برخوردار است.
امروزه این روش کاربرد وسیعی دارد. آزمایشگاه های مدرن از آن برای تشخیص موارد زیر استفاده می کنند:
- تومورها؛
- اختلالات هورمونی؛
- عفونت ها؛
- فرآیندهای عفونی مزمن یا قبلا منتقل شده؛
- کرم ها
اگر یک فرآیند عفونی در بدن رخ دهد، این نوع تشخیص بهینه ترین برای تعیین نوع بیماری در نظر گرفته می شود.
ماهیت روش و انواع آن
روش الایزا - چیست، ماهیت این نوع تحقیق چیست؟ این و بسیاری از سوالات دیگر مورد توجه بیماران است. اساس این روش تشخیصی، اتصال سلول های ایمنی بدن به آنتی ژن های عوامل عفونی است. کمپلکس حاصل با استفاده از یک آنزیم خاص تعیین می شود.
برای درک اصل روش الایزا، باید بدانید واکنش آنتی ژن-آنتی بادی چگونه پیش می رود. آنتی ژن یک مولکول پروتئینی بیگانه برای بدن است که همراه با عفونت وارد بدن می شود. ذرات خون خارجی که در گروه همخوانی ندارند نیز آنتی ژن محسوب می شوند. در بدن، آنها یک پاسخ ایمنی را با هدف محافظت در برابر مواد خارجی تحریک می کنند. بنابراین، بدن انسان آنتی‌بادی‌هایی تولید می‌کند - ایمونوگلوبولین‌ها که می‌توانند به آنتی ژن‌ها متصل شوند و یک کمپلکس ایمنی را تشکیل دهند. شناسایی و تخریب چنین ترکیباتی توسط سلول های ایمنی بسیار آسان تر است.
واکنش برای حضور چنین کمپلکس های ایمنی در آزمایشگاه با استفاده از ترکیبات آماده انجام می شود تا مشخص شود که آیا مشابه در خون وجود دارد یا خیر.
ماهیت روش الایزا بسیار ساده است، اما با توجه به اینکه آزمایش خون برای تشخیص بسیاری از عفونت ها و بیماری ها انجام می شود، انواع مختلفی از آن وجود دارد. هر کدام در طرح رفتار و محدوده متفاوت هستند. ممکن است الایزا مستقیم یا غیرمستقیم باشد. روش مستقیم به این معنی است که از آنتی بادی های بی حرکت که با آنتی ژن ها واکنش نشان می دهند استفاده می شود. مزیت اصلی این روش این است که تمام فرآیندها را می توان خودکار کرد، به این معنی که تشخیص زمان کمی می برد.
روش غیر مستقیم به این معنی است که از آنتی بادی های ثانویه استفاده می شود. و در فاز جامد، آنتی ژن بی حرکت می شود. تجزیه و تحلیل به شما امکان می دهد تا آنتی بادی های آنتی ژن های مختلف را تعیین کنید. این به دستیابی به نتیجه دقیق تر کمک می کند، اما روش پیچیده است.
مزایای مطالعه
روش الایزا نسبت به سایر روش های تشخیصی مزایای زیادی دارد. اصلی ترین آنها عبارتند از:
- حساسیت بالا؛
- پایداری در طول ذخیره سازی مواد؛
- سرعت تشخیص؛
- می توان از مقدار کمی از مواد تست استفاده کرد.
- امکان خودکارسازی تمام فرآیندها وجود دارد.
- عفونت را می توان در مراحل اولیه تشخیص داد.
این روش تشخیصی جهانی است، بنابراین برای معاینه انبوه مناسب است. با کمک تجزیه و تحلیل، می توان پویایی روند روند عفونی را ردیابی کرد.
نشانه هایی برای تجزیه و تحلیل و نمونه برداری مواد
انجام مطالعه با استفاده از روش الایزا در صورت مشکوک به انواع بیماری ها قابل تجویز است:
خون وریدی از نظر وجود آنتی بادی بررسی می شود. قبل از تجزیه و تحلیل، عناصری که می توانند مطالعه را پیچیده کنند از آن جدا می شوند. سایر مایعات بیولوژیکی نیز ممکن است نمونه برداری شوند.
برای به دست آوردن دقیق ترین اطلاعات، نمونه گیری خون با معده خالی انجام می شود. اگر این روش برای تعیین عفونت نهفته تجویز شده است، چند هفته قبل از تجزیه و تحلیل، باید مصرف داروهای ضد باکتری و ضد ویروسی را متوقف کنید. بسته به تجهیزات آزمایشگاهی که مواد در آن گرفته شده است، نتیجه را می توان در عرض یک روز به دست آورد. در موارد اضطراری این زمان به چند ساعت کاهش می یابد.
تجزیه و تحلیل برای سیفلیس
استفاده از روش الایزا به تعیین وجود بسیاری از عفونت ها در بدن به ویژه سیفلیس کمک می کند. برای مطالعه، خون از ورید با معده خالی گرفته می شود. سپس مطالعه ای انجام می شود که به تعیین نه تنها وجود بیماری در بدن کمک می کند، بلکه زمان دقیق شروع آن را نیز تعیین می کند، زیرا در طول بیماری برخی از آنتی بادی ها با سایرین به ترتیب کاملاً تعریف شده جایگزین می شوند.
در مرحله حاد که نشان دهنده یک دوره طولانی بیماری است یا در حین تشدید یک عفونت مزمن، ایمونوگلوبولین های نوع M در خون شناسایی می شوند. وجود ایمونوگلوبولین های نوع A نشان می دهد که عفونت بیش از 4 در بدن باقی می ماند. هفته ها ایمونوگلوبولین های گروه G نشان دهنده ارتفاع بیماری یا درمان قبلی است.
با توجه به درجه رنگ چاه ها، شدت سیر فرآیند عفونی ارزیابی می شود، زیرا اشباع آن به تعداد کمپلکس های ایمنی تشکیل شده بستگی دارد.
تست HIV
روش الایزا نیز برای تجزیه و تحلیل در این مورد استفاده می شود، دارای ویژگی های خاصی است که با سیر و پیشرفت بیماری مرتبط است. این روش تحقیق برای تعیین قابل قبول ترین روش در نظر گرفته می شود، با این حال، باید زودتر از یک ماه پس از قرار گرفتن در معرض عوامل خطر انجام شود. این به دلیل وجود دوره کمون است که از 45 روز تا 6 ماه طول می کشد. به همین دلیل است که تجزیه و تحلیل باید بعد از شش ماه تکرار شود.
- آسکاریازیس؛
- ژیاردیازیس؛
- توکسوپلاسموز و غیره
با وجود تمام مزایا، روش الایزا معایبی نیز دارد. عیب اصلی این است که هنگام انجام یک مطالعه، پزشک باید پیش فرضی در مورد بیماری داشته باشد.
زمانی که هیچ راهی برای یافتن تصادفی پاتوژن و تعیین خواص ایمونواسی آنزیمی آن وجود ندارد. آزمایش فقط وجود آنتی بادی در خون بیمار را نشان می دهد. علاوه بر این، این یک تحلیل نسبتاً گران است.
رمزگشایی تجزیه و تحلیل
نتیجه یک الایزا کیفی یا وجود آنتی بادی ها یا عدم وجود آنها در خون خواهد بود. اگر تجزیه و تحلیل کمی انجام شود، غلظت آنتی بادی ها را می توان در یک مقدار عددی یا در تعداد معینی از علائم + بیان کرد.
علاوه بر این، شاخص هایی مانند:
شاخص IgM نشان دهنده سیر یک فرآیند عفونی حاد در بدن است. فقدان کامل آن ممکن است نشان دهنده عدم وجود عامل ایجاد کننده بیماری یا انتقال آن به مرحله مزمن باشد.
خواندن IgA با تست IgM منفی نشان دهنده عفونت مزمن یا نهفته است. وجود همزمان IgM و IgA نشان دهنده این است که بیماری در مرحله حاد است. وجود IgG نشان دهنده انتقال بیماری به مرحله مزمن یا بهبودی کامل و ایجاد ایمنی است.
اکنون تست های الایزا ویژه ای وجود دارد که می توانید خودتان انجام دهید.
فهرست روش های تشخیصی موجود در دهه های اخیر به سرعت در حال گسترش بوده است، متخصصان تشخیص سعی در ترکیب مزایای تمام تجزیه و تحلیل های قبلی در روش های جدید دارند و از تمام کاستی های قبلی خود خلاص می شوند.
اخیراً ، بیشتر و بیشتر در لیست روش های تشخیصی ، ایمونواسی آنزیمی ظاهر می شود - یک آزمایش مدرن و نسبتاً جدید ، که برای یک فرد عادی که به پزشکی مرتبط نیست کمی شناخته شده است. با این وجود، این تکنیک به سرعت در حال پر کردن صفوف طرفداران خود در میان کادر پزشکی واجد شرایط است. چیست و در چه مواردی باید استفاده شود، می توانید سعی کنید با آشنایی با ویژگی ها و ویژگی های اصلی آن، آن را کشف کنید.
ایمونواسی آنزیمی یک روش آزمایشگاهی ابزاری مبتنی بر واکنش مولکولی آنتی ژن-آنتی بادی است که تشخیص پروتئین های خاص در مواد بیولوژیکی (نمونه هایی برای تحقیق) را ممکن می سازد. چنین پروتئین هایی می توانند آنزیم ها، میکروارگانیسم های مختلف (ویروس ها، باکتری ها، قارچ ها)، تک یاخته ها و غیره باشند.
پس از کشف این روش، نام آزمایش الایزا به آن داده شد که به نام کاشفان مربوط نمی شود، اما مخفف نام کامل در نسخه انگلیسی - سنجش ایمنی مرتبط با آنزیم است. پزشکان در سراسر جهان از این نام استفاده می کنند، برخی از پزشکان کشورهای روسی زبان نیز به این نوع مطالعه می گویند.
اصل اصلی روش واکنش مولکولی "آنتی ژن-آنتی بادی" است.
آنتی ژن هر مولکول خارجی است که به عنوان بخشی از یک میکروب بیماریزا وارد بدن انسان می شود. آنتی ژن ها معمولاً مولکول های پروتئینی هستند. علاوه بر میکروارگانیسم ها، چنین "غریبه" می تواند سلول های خون شخص دیگری باشد که در گروه یا فاکتور Rh مطابقت ندارند.
در پاسخ به ورود چنین آنتی ژنی به بدن، یک واکنش ایمنی راه اندازی می شود که هدف آن محافظت در برابر هر مولکول خارجی است. این به دلیل سنتز عوامل خاص سیستم ایمنی - آنتی بادی ها (ایمونوگلوبولین ها) اتفاق می افتد. هر آنتی بادی فقط به یک آنتی ژن خاص نزدیک می شود و "بیگانه" بیماری زا را خنثی می کند و در یک مجموعه واحد به آن متصل می شود. این فرآیند چنین اتصالی است که واکنش آنتی ژن-آنتی بادی نامیده می شود.
انواع آنتی بادی
همه آنتی بادی ها (ایمونوگلوبولین ها) بسته به اینکه در چه مرحله ای از پاسخ ایمنی ظاهر می شوند به 5 نوع تقسیم می شوند:
برای تشخیص ELISA، سطح ایمونوگلوبولین های IgG، IgM و IgA اغلب مهم هستند. با اعتبارات آنها می توانید دریابید که آیا فردی قبلاً بیماری داشته است یا اخیراً آلوده شده است ، آیا ایمنی ایجاد کرده است یا بدنش در برابر آسیب شناسی بی دفاع است.
مزایا و معایب ایمونواسی آنزیمی
در حال حاضر الایزا یکی از دقیق ترین و حساس ترین روش ها می باشد. این توسط متخصصان در زمینه های مختلف پزشکی پذیرفته شده است و همچنان به گسترش دامنه خود ادامه می دهد.
مزایای روش
- دقت بالای داده های دریافتی.
- حساسیت (به شما امکان می دهد تا ماده مورد نیاز را حتی با حداقل حضور پاتوژن در نمونه تشخیص دهید).
- امکان تشخیص در روزهای اول بیماری یا در دوره کمون.
- سرعت اکتساب داده ها در مقایسه با روش های دیگر با دقت مشابه.
- اتوماسیون بالای فرآیند و حداقل مشارکت انسانی که خطای مجری را کاهش می دهد.
- به دست آوردن اطلاعات در مورد مرحله فرآیند پاتولوژیک و اثربخشی درمان انتخاب شده.
- بدون درد و تهاجم کم در انتخاب مواد.
معایب روش
- در بیشتر موارد، به شما این امکان را می دهد که پاسخ بدن به یک عامل بیماری زا و نه خود عامل بیماری زا را تعیین کنید.
- قبل از مطالعه، بیماری مشکوک باید دقیقاً شناخته شود، زیرا آزمایش بسیار اختصاصی است.
- احتمال وجود شاخص های کاذب ناشی از مسائل فنی، مصرف داروها، وجود همزمان چندین بیماری مزمن یا اختلالات متابولیک در بدن بیمار.
- تفسیر نتایج باید فقط توسط یک متخصص بسیار ماهر انجام شود، زیرا برای تفسیر داده های به دست آمده، نیاز به آموزش ویژه و ذخیره بزرگ دانش پزشکی در یک منطقه خاص است.
- ELISA یک آنالیز نسبتاً نادر است، بنابراین در همه آزمایشگاه‌های تشخیصی انجام نمی‌شود.
- این روش بسیار گران است، زیرا علاوه بر معرف ها، آزمایشگاه باید تجهیزات گران قیمت متعدد و نمونه های آنتی ژن تولید شده در موسسات ویژه داشته باشد.
چه زمانی از ایمونواسی آنزیمی استفاده می شود؟
فهرست کامل نشانه ها برای انتصاب ایمونواسی آنزیمی بسیار گسترده است، تقریباً تمام شاخه های پزشکی را شامل می شود.
اغلب، ELISA برای اهداف زیر استفاده می شود:
- تشخیص بیماری های عفونی؛
- تشخیص بیماری های مقاربتی؛
- تعیین وضعیت ایمنی یا بیماری های خود ایمنی فردی؛
- شناسایی نشانگرهای تومور؛
- تعریف هورمون ها
در مورد بیماری های عفونی و ویروسی، این تکنیک امکان شناسایی آسیب شناسی های زیر را فراهم می کند:
علاوه بر این، ELISA به شما امکان می دهد تا به سرعت و به طور موثر حمله قلبی را تعیین کنید، پتانسیل تولید مثل بدن را ارزیابی کنید، آلرژی ها، منبع آن و غیره را شناسایی کنید.
تکنیک الایزا برای انجام آزمایشات بالینی در توسعه داروهای جدید و در ارزیابی تأثیر آنها بر بدن انسان استفاده می شود.
انواع نمونه ها و روش های انتخاب آنها برای تحقیق
اغلب، ماده آزمایشی برای ایمونواسی آنزیمی خون است که از ورید کوبیتال بیمار گرفته می شود. نمونه برداری با معده خالی، عمدتاً در صبح انجام می شود. پس از انتخاب از خون، آن دسته از سلول های تشکیل شده که با مطالعه تداخل دارند، جدا شده و خارج می شوند و تنها سرم باقی می ماند.
هنگام تشخیص عفونت های دستگاه تناسلی، اسمیر از بافت های مخاطی اندام های تناسلی، مخاط از مجرای ادرار یا دهانه رحم، نمونه هایی از راست روده، خراش های ناشی از فرسایش یا زخم در ناحیه کشاله ران و از سایر قسمت های بدن اغلب به مواد تبدیل می شوند. اسمیر را می توان از حفره دهان و همچنین از نازوفارنکس گرفت.
گاهی اوقات از آنزیم ایمونواسی در عمل زنان و زایمان در دوران بارداری برای تعیین وضعیت مایع آمنیوتیک استفاده می شود. در این حالت مایع آمنیوتیک نمونه می شود. برای این کار، با سوراخ کردن مثانه جنین با سوزن بلند، مقدار کمی مایع گرفته می شود. تمام دستکاری ها با یک ابزار استریل انجام می شود تا خطرات احتمالی به حداقل برسد.
اغلب این ماده به مایع مغزی نخاعی یا سروزی تبدیل می شود. این اتفاق با بی حسی موضعی که تزریق می شود اتفاق می افتد.
متخصصی که به مطالعه می فرستد باید مشخص کنید که چه نوع موادی برای ایمونواسی آنزیمی مورد نیاز است. اغلب نمونه ها از چندین نوع به طور همزمان یا از مکان های مختلف گرفته می شود. پزشکی که ارجاع این نوع معاینه را صادر می کند باید در مورد آمادگی برای تحویل بیومتریال نیز به بیمار اطلاع دهد.
آماده سازی برای ایمونواسی آنزیمی
برای افزایش دقت داده های به دست آمده پس از ایمونواسی آنزیمی، آماده سازی برای انتخاب مواد باید به شرح زیر باشد:
- 10 روز قبل از مطالعه، آنتی بیوتیک ها، داروهای ضد ویروسی و ضد قارچی را حذف کنید.
- برای یک روز لازم است الکل، سیگار کشیدن و مصرف مواد مخدر را حذف کنید.
- در همان دوره، لازم است از اعمال بیش از حد فیزیکی اجتناب شود.
- همه داروهایی را که بیمار مصرف می کند به پزشک اطلاع دهید.
- اگر باردار هستید یا مشکوک به بارداری هستید به پزشک خود اطلاع دهید.
بهتر است مواد برای آزمایش صبح ناشتا انتخاب شوند.
اگر هدف تشخیص تعیین وضعیت پس زمینه هورمونی باشد، مهم است که در آستانه یک حالت آرام اطمینان حاصل شود و از تنش عصبی جلوگیری شود. برای خانم ها، اهدای خون برای هورمون ها به وضوح با دوره چرخه ماهانه تعیین می شود که در زمان ملاقات توسط پزشک مورد بحث قرار می گیرد.
3-2 روز قبل از نمونه گیری، غذاهای سرخ شده و چرب را از منو حذف کنید و مرکبات و هر میوه و سبزی نارنجی و زرد دیگری را قبل از آزمایش هپاتیت مصرف نکنید.
رمزگشایی نتایج ایمونواسی آنزیمی
نتیجه یک مطالعه کیفی، به عنوان یک قاعده، با علائم "+" (پیدا شده) یا "-" (پیدا نشد) نشان داده می شود.
با وجود یا عدم وجود گروه های خاصی از ایمونوگلوبولین ها، می توان نتایج زیر را به دست آورد:
- JgM (-)، JgG (-)، JgA (-) - ایمنی نسبت به بیماری کاملاً وجود ندارد (بدن قبلاً با این نوع آنتی ژن مواجه نشده است).
- JgM (-)، JgG (+)، JgA (-) - قبلاً با این آنتی ژن یا واکسن برخورد شده بود.
- JgM (+)، JgG (-/+)، JgA (-/+) - فرآیند پاتولوژیک حاد (به احتمال زیاد اولیه).
- JgM (-)، JgG (+/-)، JgA (+/-) - دوره مزمن.
- JgM (+)، JgG (+)، JgA (+) - عود.
- JgM (-) - مرحله بهبودی.
مقادیر کمی بار اطلاعات زیادی را حمل می کنند، اما فقط پزشک معالج قادر به تفسیر آنها بر اساس نشانه های قبلی، سن بیمار و هنجارهای هر بیماری خاص است. به همین دلیل، ارزیابی نتایج به تنهایی غیرممکن است.
چقدر باید منتظر نتایج بود
این تکنیک دارای انواع مختلفی است که بسته به آن اصطلاح به دست آوردن داده های موجود تعیین می شود. میانگین مدت زمان تشخیص ELISA 4-6 ساعت است که امکان صدور نتایج را در روز بعد فراهم می کند.
طولانی ترین روش ها تا 10 روز طول می کشد، به عنوان مثال، در صورت تشخیص عفونت HIV.
در صورت نیاز فوری می توان از روش های اکسپرس استفاده کرد که در طی 1-2 ساعت پاسخ به دست می آید.
از کجا می توانم آزمایش الایزا بگیرم؟
از آنجایی که تجهیزات این نوع تشخیص بسیار گران است، همه آزمایشگاه ها نمی توانند آن را خریداری کنند. علاوه بر این، آزمایش‌های حاوی آنتی‌ژن‌های خاص ماندگاری محدودی دارند (معمولاً حدود 1 سال)، بنابراین باید دائماً به‌روزرسانی شوند.
به این دلایل، مؤسسات پزشکی دولتی همیشه آزمایشگاه الایزا ندارند. بیشتر اوقات، شما باید با مراکز بزرگ پزشکی خصوصی یا مراکز تشخیصی بزرگ تماس بگیرید.
برای انجام مطالعه الایزا، آزمایشگاه باید دارای مجوز ویژه باشد و کارکنان و دستیاران آزمایشگاه باید آموزش های ویژه ای را طی کنند.
اغلب، یک مرکز تشخیصی یا آزمایشگاه خاص توسط پزشک توصیه می شود که بیمار را برای معاینه راهنمایی می کند.
هزینه ایمونواسی آنزیمی
قیمت این مطالعه به منطقه کشور و سطح کلینیک ارائه دهنده خدمات بستگی دارد. در مسکو، حداقل قیمت برای تعیین یک آنتی ژن از 700 روبل شروع می شود. در صورت نیاز به شناسایی چندین ایمونوگلوبولین به صورت همزمان، قیمت آن خلاصه می شود.
در مورد تجزیه و تحلیل فوری، هزینه 150-200 روبل افزایش می یابد. برای هر آنتی ژن
علیرغم هزینه نسبتاً بالا، ایمونواسی آنزیمی این امکان را فراهم می کند تا معاینه بیمار را تا حد امکان آموزنده و سریع انجام دهید، که زمان قبل از شروع درمان را کاهش می دهد و به شما امکان می دهد تا به سرعت وضعیت فرد را تثبیت کنید.
این ویدئو فیلم "مبانی ایمونواسی آنزیمی" را نشان می دهد.
با پیشرفت پزشکی مدرن، می توان در صورت مشکوک شدن به پاتولوژی های خاص در بیمار، تشخیص های عمیق تری انجام داد. یکی از روش های آموزنده تحقیقات آزمایشگاهی آنالیز الایزا بود که با گرفتن خون وریدی انجام می شود. یعنی هیچ چیز برای بیمار در کل تغییر نمی کند. اما دستیار آزمایشگاه ELISA تکنیک پیچیده ای را برای مطالعه بیومواد جمع آوری شده انجام می دهد. تجزیه و تحلیل های الایزا چیست و استفاده از روش الایزا به عنوان یک روش تشخیصی چه نکات ظریفی دارد، ما مطالب زیر را درک می کنیم.
ایمونواسی آنزیمی چیست؟
تولید آنتی بادی توسط خود آنتی ژن هایی که وارد بدن انسان شده اند تحریک می شود. هنگام ورود به "نبرد" برای سلامتی بدن، آنتی بادی ها، به عنوان مثال، خود را با آنتی ژن ها علامت گذاری می کنند، چیزی که دستیار آزمایشگاه در آزمایش خون مشاهده می کند. یعنی در بیومتریال جمع آوری شده، می توان نه تنها وجود عفونت، بلکه آثار آن را پس از بهبودی کامل بدن ردیابی کرد.
بنابراین، با تجویز سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم برای یک بیمار، پزشک معالج می تواند مدت زمان عفونت، درجه پیشرفت آن را ردیابی کند یا وجود مصونیت در برابر یک عفونت خاص را شناسایی کند.
فرآیند تشخیصی ELISA به شکل زیر است:
- خون وریدی گرفته شده در آزمایشگاه به حالت سرم خون آورده می شود.
- سپس دستیار آزمایشگاه از یک سینی مخصوص با سلول ها استفاده می کند که هر کدام از آنها قبلاً حاوی تمام آنتی ژن های لازم است. کافی است فقط سرم خون را در هر سلول بریزید و واکنش ایمونوگلوبولین ها (آنتی بادی ها) به آنتی ژن ها را دنبال کنید. وجود واکنش "مطلوب" با تغییر رنگ ماده مورد مطالعه نشان داده می شود. در آینده، دستیار آزمایشگاه چگالی نوری محیط مورد مطالعه را مطالعه می کند.
- آسکاریازیس و انتروبیازیس (کرم های گرد و کرم سوزنی)؛
- تریکینوزیس؛
- اپیستورکیازیس در اشکال حاد و مزمن؛
- ژیاردیازیس؛
- آمیبیوز؛
- توکسوپلاسموز؛
- لیشمانیوز به هر شکلی باشد.
مهم: ایمونواسی آنزیمی می تواند هم کیفی و هم کمی باشد. در حالت اول، دستیار آزمایشگاه فقط وجود ماده مورد نظر در خون را تایید یا رد می کند. در مورد دوم، در نتیجه تجزیه و تحلیل، غلظت آن در بدن بیمار نشان داده شده است.
معایب روش
با تمام مزایای این روش تشخیصی، باید درک کرد که ایمونواسی آنزیمی راهی برای یافتن علت بیماری بیمار نیست، بلکه تنها روشی برای تأیید تشخیص ادعا شده توسط پزشک معالج است. و با توجه به این واقعیت که مطالعه بسیار گران است، باید از آن عاقلانه استفاده شود. در این مورد، نتایج مطالعه باید فقط توسط یک متخصص واجد شرایط تفسیر شود.
رمزگشایی نتایج
بعد از اینکه مخفف IFA و چیستی آن را از بین بردیم ─ متوجه شدیم، ارزش آن را دارد که به تفسیر نتایج برویم. درک این نکته مهم است که اگر تجزیه و تحلیل به صورت کیفی انجام شود، نتیجه فقط مثبت یا منفی خواهد بود. یعنی تشخیص یا ظن پزشک را در مورد یک تشخیص خاص تایید می کند و یا آن را رد می کند. در این صورت، فرم به ترتیب حاوی نمادهای "+" یا "-" خواهد بود.
مهم: نتیجه آزمایش منفی همیشه نشان دهنده عدم وجود عفونت نیست. واقعیت این است که آنتی بادی های آنتی ژن می توانند در عرض 14 روز پس از عفونت تشکیل شوند و به احتمال زیاد هنوز تشکیل نشده اند.
اگر تجزیه و تحلیل کمی انجام شود، در اینجا نوع آنتی بادی ها، تعداد و مرحله فعالیت آنها تعیین می شود. به طور خاص، با چنین تشخیصی، آنتی بادی ها (ایمونوگلوبولین ها) IgG و IgM تعیین می شوند که در دوره های مختلف پیشرفت عفونت تشکیل می شوند. رایج ترین نتایج در این مورد عبارتند از:
- افزایش IgM و عدم وجود کامل IgG. این تصویر نشان دهنده عفونت اخیر و مرحله حاد آسیب شناسی است.
- افزایش فعالیت هر دو نوع ایمونوگلوبولین (IgM و IgG). او از یک دوره طولانی مدت و مزمن روند عفونی صحبت می کند.
- فعالیت IgG و عدم وجود کامل IgM. این عفونت حداقل شش ماه پیش بود و اکنون این ویروس در مرحله مزمن طولانی است.
- عدم وجود آنتی بادی های IgG و IgA. نتیجه تعریف نشده است.
- عدم وجود آنتی بادی های IgM، IgA و IgG. نشان دهنده عدم ایمنی نسبت به یک عفونت خاص است.
- فعالیت آنتی بادی های IgG، IgM و IgA نشان دهنده تشدید یک فرآیند مزمن است.
علاوه بر شناسایی انواع آنتی بادی ها، دستیار آزمایشگاه در ستون مخصوص فرم تعداد آنها را در هر حجم خون نیز نشان می دهد. به یاد داشته باشید که با درک روش الایزا، خودتان نتایج را تفسیر نکنید. نتایج به‌دست‌آمده بسته به تشخیص پیشنهادی، بر اساس تصویر بالینی بیمار، تنها توسط پزشک معالج با دقت تفسیر می‌شود.