Ovaj rod predstavlja samo jedna vrsta bakterija - E. coli, ali kombinira mnoge mogućnosti. Sorte E. coli razlikuju se po biološkim svojstvima, mogu imati različite skupove enzima (biovari) i različitu antigensku strukturu (serovari).
Escherichia coli je prvi put izolovao Escherich 1888. godine iz ljudskog izmeta i dobio ime po njemu.
Prirodno stanište E. coli je ljudsko crijevo. E. coli je predstavnik normalne crijevne mikroflore.
U procesu života, E. coli proizvodi enzime koji pospješuju probavu (na primjer, razgradnju vlakana), sintetizira neke vitamine (na primjer, vitamine B). Osim toga, ove bakterije pokazuju antagonistički učinak na patogene mikroorganizme, kao što su uzročnici dizenterije, tifusne groznice i toksičnih infekcija. Nedostatak Escherichia coli u debelom crijevu dovodi do ozbiljne bolesti - disbakterioze. U tom slučaju se poremeti normalan sastav crijevne mikroflore, razvijaju se proteus, kokalna flora, gljivice itd.
Sa smanjenjem otpornosti tijela (gladovanje, prekomjerni rad, itd.), Escherichia može prodrijeti u druge organe i tkiva i uzrokovati teške patološke procese. Dakle, možemo pretpostaviti da su Escherichia tipični uslovno patogeni mikroorganizmi: u normalnim uslovima su saprofiti, a kada se uslovi promene, izazivaju bolesti.
Izdvajajući se sa fekalijama, E. coli ulazi u spoljašnju sredinu. Detekcija E. coli u zemljištu, vodi i drugim objektima ukazuje na njihovu fekalnu kontaminaciju, a određivanje količine E. coli (coli-titar, coli-indeks) karakteriše sanitarno stanje objekta (vidi "Sanitarna mikrobiologija" ).
Morfologija. E. coli su kratke, u proseku 0,5-3,0 × 0,5-0,8 µm štapića. Gram-negativni. U većini slučajeva su pokretni, peritrihozni. Međutim, neke varijante E. coli su nepomične. Mnogi sojevi formiraju kapsulu. Spor se ne formira.
uzgoj. E. coli je fakultativni anaerob. Dobro raste na jednostavnim hranljivim podlogama na 37°C i pH 7,2-7,8. Sojevi E. coli izolovani iz crijeva ljudi i životinja razvijaju se i na 43-45°C, dok se Escherichia coli hladnokrvnih životinja u tim uvjetima ne razmnožava. Ova razlika u svojstvima E. coli različitog porijekla koristi se za određivanje sanitarnog stanja objekta, jer samo detekcija toplokrvnih E. coli ukazuje na sanitarni problem.
Na MPA, Escherichia coli formira zamućene, blago konveksne, vlažne kolonije sa glatkim rubovima. Na MPB daje ujednačenu zamućenost. Kapsulirane kulture rastu kao sluzave kolonije.
Za identifikaciju ešerihije koriste se diferencijalno dijagnostičke podloge: Endo i agar sa eozinmetilen plavim (EMS). Na Endovoj podlozi, E. coli raste kao grimiznocrvene kolonije sa ili bez metalnog sjaja. Na EMS mediju - u obliku tamno ljubičastih kolonija.
Enzimska svojstva. E. coli ima značajnu enzimsku aktivnost. Razgrađuju laktozu, glukozu, manitol, maltozu, saharozu i druge ugljikohidrate i alkohole uz stvaranje kiseline i plina. Proteolitička svojstva: formira indol. Želatin se ne razgrađuje. Neki biovari ne fermentiraju laktozu i saharozu (tabela 29).
Napomena, kg - stvaranje kiseline i gasa; + prisustvo znaka; - nedostatak znaka.
Toksigenost. Ešerihije imaju endotoksin (ligopolisaharid).
Antigenska struktura. Ešerihije se razlikuju po antigenskoj strukturi mikrobne ćelije, što je osnova za klasifikaciju bakterija ovog roda. Postoje tri tipa antigena Escherichia: O-antigen (somatski), K-antigen (kapsularni) i H-antigen (flagelati). Termostabilni O-antigen je lipopolisaharid-proteinski kompleks koji se nalazi u zidu bakterijske ćelije. O-antigen određuje da li kultura pripada serološkoj grupi. Opisano je više od 170 takvih grupa. Neke komponente O-antigena zajedničke su različitim O-grupama Escherichia, a ponekad i drugim enterobakterijama (Shigella, Salmonella, itd.). Escherichia K-antigeni su različiti: A, B, L i M. Antigeni A i M su termostabilni, B i L su termolabilni. K-antigen se nalazi u mikrobnoj ćeliji površnije od O-antigena, te stoga u njegovom prisustvu ne dolazi do reakcije aglutinacije žive kulture sa O-serumom. Za identifikaciju O-antigena, kultura se zagrijava sat vremena na 100 °C: K-antigen se uništava tijekom zagrijavanja, a O-antigen postaje sposoban za interakciju sa serumom. Utvrđeno je da Escherichia ima oko 100 tipova K-antigena, uglavnom tipa B-antigena (termolabilnih). H-antigen je prisutan samo u pokretnim sojevima, jer je povezan sa flagelama. U Escherichia je poznato više od 50 tipova H-antigena. Određivanje H-antigena omogućava utvrđivanje serovarijante izolovane kulture (Sl. 40).
Karakteristike antigenskog sastava izolovane kulture Escherichia date su na osnovu rezultata reakcije aglutinacije sa serumima koji sadrže O-, K- i H-antitijela. Istovremeno se utvrđuje koji su antigeni prisutni u kulturi, a njihova kombinacija karakteriše antigensku formulu izolirane kulture, odnosno njenu serovarijantu. Tabela 30 pokazuje primjere antigenske strukture nekih serovarijanti E. coli čiji su K antigeni B antigeni.
Ako je kultura aglutinirana OK-serumom OP1:K58 (B4) i H-serumom "6", tada se izoluje serovarijantna E. coli O111:B4:H6; ako se konstatuje reakcija aglutinacije sa OK-serumom O26:K60 (B6) i sa H-serumom "11", izoluje se kultura E. coli 026:B6:H11 itd.
Osim određivanja serovarijante E. coli, moguće je odrediti i fagovar izolirane kulture. Postoje setovi bakteriofaga koji liziraju ešerihije pojedinačnih serogrupa. Prema lizi kulture, jedan od faga uspostavlja svoj fagovar. Definicija fagovara je od epidemiološkog značaja.
Antagonistički učinak E. coli, njihova sposobnost suzbijanja rasta truležnih i patogenih bakterija, koristi se za stvaranje bakterijskih preparata za liječenje disbakterioze i raznih crijevnih bolesti (kolibakterin, bifikol).
Otpornost na životnu sredinu. E. coli su prilično otporne. Na 55°C umiru u roku od sat vremena, na 60°C - za 15 minuta. U tlu i vodi ostaju do 2-3 mjeseca, u mlijeku ne samo da ostaju, već se i razmnožavaju. Rastvori dezinficijensa (3% hloramin, sublimirani rastvor 1:1000, itd.) ih ubijaju za 20-30 minuta. E. coli su posebno osjetljive na briljantno zeleno.
Osjetljivost životinja. Ešerihije određenih serogrupa su patogene za različite životinje i kod njih uzrokuju oboljenja gastrointestinalnog trakta. Od laboratorijskih životinja na E. coli su najosjetljiviji zamorci, zečevi, bijeli miševi. Ovisno o načinu primjene, kultura Escherichia coli izaziva različite patološke procese: upalu i apsces supkutanim injekcijama, peritonitis i sepsu intraperitonealnom i intravenskom primjenom.
Izvori infekcije. Bolesnik. U tom slučaju bakterije ulaze u tijelo iz vanjskog okruženja (egzogena infekcija). E. coli također može uzrokovati razvoj patološkog procesa "iznutra" (endogena infekcija).
Putevi prijenosa. Glavni put prijenosa kod egzogenog oblika infekcije je kontaktno-kućni (indirektni kontakt). Patogeni se mogu prenositi na prljavim rukama, kroz posuđe, igračke, donji veš, hranu, muhe.
Patogeneza. Bolesti uzrokovane Escherichia nazivaju se Escherichiosis. Razvoj ešerihioze ovisi o putu unošenja patogena u tijelo i o serogrupi kojoj patogen pripada. Kada bakterije uđu kroz usta, mogu se javiti crijevna oboljenja kod djece i odraslih. Neke O-grupe ešerihija (serovari) najčešće su uzročnici ljudskih bolesti. Ove bakterije se nazivaju enteropatogena Escherichia coli (EPEC). Trenutno su poznate mnoge varijante EPKD, koje uzrokuju drugačiji tok ešerihioze. Postoji nekoliko grupa EKPC-a:
grupa I - uzročnici kolienteritisa kod male djece (serogrupe O111, O26, O55, O86, itd.);
grupa II - uzročnici bolesti sličnih dizenteriji kod djece i odraslih (O25, O124, O143, O144 itd.);
grupa III - uzročnici bolesti sličnih koleri (O1, O5, O6, O78 itd.).
Jednom u hrani, E. coli se u njima može razmnožavati. Konzumiranje takve hrane dovodi do razvoja trovanja hranom.
Razvoj endogene infekcije dovodi do oštećenja različitih organa: upale žučne kese (holecistitis), mjehura (cistitis), trovanja krvi (sepsa) itd.
Imunitet. Imunitet se razvija samo protiv jedne serovarijante Escherichia - uzročnika ove bolesti. Raznolikost Escherichia praktično čini ovaj imunitet neefikasnim. U razvoju imunološkog stanja kod oboljele djece od velikog je značaja stvaranje IgM antitijela koja ne prolaze kroz placentu, pa se stoga ne prenose od majke. IgA antitela na ešerihiju prenose se na dete od majke sa majčinim mlekom.
Prevencija. Poštivanje lične higijene i sanitarno-higijenskog režima. Ne postoji posebna profilaksa.
Tretman. Antibiotici: ampicilin, tetraciklin itd. Trenutno se proizvodi koliproteus fag čija upotreba daje dobre rezultate.
Kontrolna pitanja
1. Koje su glavne karakteristike crijevnih bakterija?
2. Koje antigene ima Escherichia?
3. Koji se lijekovi pripremaju od Escherichia coli?
Mikrobiološka istraživanja
Svrha studije: izolacija i identifikacija EPKD.
Materijal za istraživanje
1. Pražnjenje crijeva.
2. Povraćanje.
Po potrebi pregleda se iscjedak iz nosa i grla, gnoj iz uha, krv, urin, komadići organa leša.
Kada se pojavi žarište bolesti koli-enteritisa, pregledavaju se prehrambeni proizvodi, pranje s ruku pratilaca, igračke i drugi predmeti (prema epidemiološkim indikacijama).
Bilješka. Što se izmet ranije od početka bolesti pregleda, to je vjerojatnija mogućnost izolacije uzročnika.
Glavna metoda istraživanja
Bakteriološki
Napredak istraživanja
Drugi dan istraživanja
Čašice posijane dan ranije uklanjaju se iz termostata i gledaju u upadnoj ili prolaznoj svjetlosti. U prisustvu malinastocrvenih kolonija na Endo-ovoj podlozi (sa ili bez metalnog sjaja) ili ljubičaste na EMS medijumu, izvodi se probna reakcija aglutinacije na staklu kako bi se razlikovao EPP od drugih varijanti Escherichia.
Za postavljanje probne reakcije aglutinacije odabire se najmanje 10 izoliranih kolonija, označavajući ih ili numerirajući na poleđini posude; dio svake ciljne kolonije se uklanja petljom i aglutinira u kapi polivalentnog seruma ili imunoglobulina. Testira se samo dio kolonije tako da se u slučaju pozitivne reakcije aglutinacije iz preostalog dijela kolonije može izolirati čista kultura.
Tipični ili polivalentni ešerihijalni serumi (ili imunoglobulini) se proizvode u proizvodnim uslovima. Polivalentni serumi Escherichia OK (ili OK imunoglobulini) sadrže antitela na nekoliko antigena Escherichia O i K. Uz njihovu pomoć, uslovno je utvrđeno da izolovana kultura pripada EPKP. Na primjer, polivalentni serum O26, O55, O111 omogućava identifikaciju istoimenih kultura Escherichia. Serumi se razrjeđuju prema uputama na etiketi.
U laboratoriji se može pripremiti mješavina pojedinačnih OK seruma kombiniranjem ne više od 5 seruma tako da razrjeđenje svakog od njih ne bude veće od 1:10.
Postavljanje probne reakcije aglutinacije. 10 kapi polivalentnog seruma (ili imunoglobulina) nanosi se na jedno ili dva dobro odmašćena staklena stakalca. U svaku kap se dodaje dio predviđene kolonije i triturira. Kolonije koje su dale reakciju aglutinacije se prosijavaju u epruvete sa kosim agarom i stavljaju u termostat na 18-20 sati.Ako nijedna od 10 kolonija nije dala reakciju aglutinacije, dati negativan odgovor.
Treći dan istraživanja
Usjevi se vade iz termostata i pregledavaju. Na MPA enteropatogena Escherichia coli obično formira vlažnu, sjajnu, sivkastu prevlaku, rjeđe je zamućena. Kultura uzgojena na kosom agaru se ponovo provjerava u reakciji aglutinacije na staklu sa polivalentnim serumima Escherichia (ili imunoglobulinima). Ako odabrana kultura daje reakciju aglutinacije sa polivalentnim serumom (imunoglobulinom), onda se aglutinira sa svakim tipičnim serumom (imunoglobulinom) posebno u razrjeđenju 1:5 - 1:10. Aglutinacija sa živom kulturom je indikativna.
Zatim je potrebno biološkim testovima potvrditi pripadnost izolovane kulture rodu Escherichia. Da bi se to postiglo, kultura se sije na polutekuću Gissovu podlogu s laktozom, glukozom, manitolom, saharozom, maltozom i drugim šećerima, kao i na bujon ili peptonsku vodu kako bi se utvrdilo stvaranje indola i sumporovodika. Da bi se to učinilo, dva indikatorska papira navlažena reagensima koji otkrivaju stvaranje ovih tvari spuštaju se u epruvete ispod čepa. Jedan komad papira postaje crven u prisustvu indola, drugi postaje crn u prisustvu vodonik sulfida.
Tokom fermentacije šećera, reakcija medija postaje kisela i boja indikatora se mijenja. Ako se pored kiseline formira i gas, u medijumu se pojavljuju mehurići. Istovremeno se utvrđuje pokretljivost bakterija: inokulacija se vrši u polutečnom (0,2%) agaru injekcijom. Pokretne bakterije daju zamućenje cijele okoline, nepokretne - rastu samo injekcijom.
Za konačnu identifikaciju izolovane kulture, izvodi se detaljna reakcija aglutinacije sa živim i zagrijanim kulturama: sa živim - za određivanje K-antigena, sa zagrijanim - za određivanje O-antigena. Za postavljanje detaljne reakcije aglutinacije, antigen se priprema na sljedeći način: 3-5 ml izotonične otopine natrijum hlorida se ispere sa kulture sa kosog agara. Dobivena suspenzija se sipa u dvije epruvete. Jedan od njih se zagrijava u vodenom kupatilu na 100 ° C sat vremena.
Produžena reakcija aglutinacije stavlja se u dva reda epruveta. Serum u oba reda se razblaži u omjeru 1:50 - 1:100 (u 1. epruveti) prema titru naznačenom na etiketi ampule seruma. 2 kapi žive kulture se dodaju u prvi red, 2 kapi zagrijane kulture se dodaju u drugi red.
Epruvete se protresu i stave u termostat na 18-24 sata.
Četvrti dan istraživanja
Bilježe se promjene u Hissovom okruženju, bilježi se stvaranje indola i vodonik sulfida.
Većina predstavnika Escherichia fermentira ugljikohidrate sa stvaranjem kiseline i plina, razgrađuje proteinski hranjivi supstrat i formira indol.
Obračun reakcije aglutinacije u epruveti provodi se pomoću povećala ili aglutinoskopa. Aglutinacija sa živom kulturom je krupnozrna, sa mrtvom kulturom - sitnozrna. Reakcija se smatra pozitivnom ako je aglutinacija sa zagrijanom kulturom zabilježena u razrjeđenju seruma od najmanje pola titra seruma, a živa kultura je aglutinirana serumom razrijeđenim najmanje 1:200. Odnos antitijela prema zagrijanoj i živoj kulturi također igra ulogu. Razrjeđenje seruma, u kojem se uočava aglutinacija sa zagrijanom kulturom, treba najmanje 2 puta premašiti razrjeđenje seruma u kojem je živa kultura aglutinirana. U tabeli. 31 prikazuje različite opcije za rezultat reakcije aglutinacije.
Bilješka. Moguće su tri opcije reakcije: 1) zagrijana kultura se aglutinira sa serumom u većim razrjeđenjima od žive, reakcija je pozitivna; 2) živa i zagrejana kultura daju aglutinaciju u istim razblaženjima seruma. Takav rezultat može ukazivati na odsustvo K-antigena u kulturi; aglutinacija živih i zagrijanih kultura uzrokovana je O-antigenom. U tim slučajevima potrebno je ponoviti reakciju aglutinacije; 3) aglutinacija žive kulture u odsustvu aglutinacije toplinom omogućava vam da date negativan odgovor. Očigledno, u kulturi ne postoji O-antigen koji odgovara O-antitijelima u serumu (slika 41).
Kontrolna pitanja
1. Koji materijal se ispituje da bi se izolovala Escherichia?
2. Koji serumi se mogu koristiti za razlikovanje EPKD?
3. Zašto se produžena reakcija aglutinacije izvodi sa živim i zagrijanim kulturama Escherichia?
1. Uzmite od učitelja Petrijeve zdjelice sa kulturom inokuliranom na Endo mediju i inokulirajte u epruvetu sa kosim agarom.
2. Uzmite kulturu EPP na kosom agaru od učitelja, isperite je izotoničnim rastvorom natrijum hlorida. Topli dio ispiranja u vodenom kupatilu na 100° C. Razrijedite serum u dva reda epruveta i postavite reakciju aglutinacije kao što je gore opisano.
Hranljivi mediji
Endo i EMS diferencijalni mediji se koriste za uzgoj crijevnih bakterija. Dostupan u obliku suvog praha. Prema uputstvu na etiketi, određena količina suvog medijuma se izvaga, rastvori u odgovarajućoj količini vode, prokuva uz mešanje i izlije u sterilne Petrijeve posude.
Postoji li neka nebitna praznina u vašem privatnom životu? Nemaš stalnu devojku? Ove zavodljive kurve će biti dobro postavljene da zadovolje vaše seksualne želje na sladak način.
Rad na kursu
Biološke karakteristike Escherichia coli
Uvod
Escherichiosis (colibacillosis) - Akutna bakterijska zarazna bolest mladih domaćih životinja, uključujući ptice (uglavnom do 2 tjedna starosti), koja se manifestira obilnim proljevom, znacima teške intoksikacije i dehidracijom organizma.
Teče u enteritičnim, septičkim i enterotoksemskim oblicima. Osnovano je više od 150 vrsta. Kod domaćih životinja i ljudi poznato je da više od deset serotipova Escherichia coli izazivaju kolibacilozu.
Općenito je prihvaćeno da E. coli živi u crijevima životinja. U pravilu ne uzrokuje bolest.
Materijal za izolaciju Escherichia coli su predmeti iz okoline (voda, zemlja, brisevi sa raznih predmeta), u slučaju bolesti - izmet, povraćanje, urin, duodenalni sadržaj ili krv, kao i prehrambeni proizvodi za koje se sumnja da su izvor infekcije. Materijal se zaseje na diferencijalnu dijagnostičku podlogu, nakon čega sledi izolacija čiste kulture E. coli. Identifikacija se vrši proučavanjem morfoloških, biohemijskih i antigenskih karakteristika. Posljednji korak je određivanje biovara Escherichia coli, posebno serogrupe i serovara.
1.Istorijska referenca
coli bolest patogenosti
Escherichia coli
(Bakterije iz grupe Escherichia coli) Godine 1885. Escherich je otkrio mikroorganizam koji je dobio ime Escherichia coli (Escherichia coli). Ovaj mikroorganizam je stalni stanovnik debelog crijeva ljudi i životinja. Pored E. coli, u grupu crijevnih bakterija spadaju epifitske i fitopatogene vrste, kao i vrste čija ekologija (podrijetlo) još nije utvrđena. Bakterije iz grupe Escherichia coli uključuju rodove Escherichia (tipični predstavnik E. coli), Citrobacter (tipični predstavnik Citr. coli citrovorum), Enterobacter (tipični predstavnik Ent. aerogenes), koji su spojeni u jednu porodicu Enterobacteriaceae zbog zajednička morfološka i kulturna svojstva. Karakteriziraju ih različita enzimska svojstva i antigenska struktura.
Prvi put je bolest kod teladi ustanovio K. Ieysen 1891. godine u Danskoj. U stručnoj literaturi poznati su mnogi sinonimi pod kojima je opisana patologija: kolibaciloza, kolisepsa, kolienteritis, koli-proljev, "bijela dijareja teladi", toksična dispepsija. Patologija ima globalnu distribuciju, praćena velikim gubicima. U Njemačkoj je incidencija kolibaciloze kod teladi u tridesetim godinama dosegla 42-48%, među ždrebadima - 19,7%. U Francuskoj je u pojedinim godinama na nekim farmama smrtnost životinja bila 40-55%. U SAD, gubici od kolibaciloze su definisani kao 10% ukupne incidencije teladi. Bolest mladih životinja sa različitim pokazateljima uočena je u svim zemljama Evrope, Azije itd. (Ya.E. Kolyakov, 1970).
U Rusiji je bolest registrovana u svim regionima. Na farmama Amurske regije 1946-1969, među teladima koja su umrla prvog dana života, broj pozitivnih laboratorijskih nalaza na kolibacilozu iznosio je 28,7% od broja ispitanih uzoraka među starim teladima. 2-3 dana - 34%, 4-7 dana - 22,5%, 8-14 dana - 19,4%, 15-21 dana - 14,3%. Proučeno je 3829 uzoraka patološkog materijala (Yu.P. Mozhukhin, 1971). U Primorju, 1967-1970, obavljeno je 746 pregleda na kolibacilozu, od kojih je od 38% do 55% bilo pozitivno svake godine (E.A. Kiryanov, 1974). Mortalitet u pojedinačnim izbijanjima bolesti među teladima dostigao je 46,6%, au proseku godišnje - 32%. (E.A. Kiryanov, 1977, 1979). Na teritoriji Habarovsk, u proučavanju 258 uzoraka obrađenih u periodu 1972-1975, broj pozitivnih potvrda na kolibacilozu teladi iznosio je 12,4%. Slučajevi kolibaciloze među prasadima u ovim godinama nisu dijagnosticirani (E.A. Kiryanov, M.F. Sosnin, 1978). Na Sahalinu 1972-1976, broj pozitivnih slučajeva dijagnoze kolibaciloze kod teladi bio je u rasponu od 2,1 - 46,2%. (E.A. Kiryanov, V.G. Kurdyukov et al., 1981). U Amurskoj regiji u 1972-1976, 1696 predmeta je ispitano na kolibacilozu, telad, učestalost pozitivnih rezultata po godinama kretala se od 15,4-27,9%, među prasadima - 17,3-35%. Proučeno je 287 leševa (E.A. Kiryanov, I.F. Tyutrin, 1981). Kolibaciloza u zoni Dalekog istoka u analiziranim godinama zabilježena je i kod kuna, ptica i zečeva.
2. Biološka karakterizacija
.1 Morfološka svojstva
E. coli su male (2 - 3 mikrona duge, 0,5 - 0,7 mikrona široke) gram-negativne štapiće sa zaobljenim krajevima. Ultrastruktura je slična drugim gram-negativnim bakterijama. U razmazima su raspoređeni nasumično, ne formiraju spore, peritrihozni (flagele se protežu duž perimetra bakterije). Escherichia coli je pokretna. Neki sojevi su mikrokapsulirani, pili.
E. coli ne stvara spore.
2.2 Kulturna dobra
Optimalna temperatura za rast Escherichia je 37°C, pH 7,2 ... 7,4, fakultativni anaerob je nepretenciozan za hranljive medije.
Prilikom sjetve na mesno-peptonsku juhu (MPB), mesno-peptonski agar (MPA):
Na MPB daju obilan rast sa značajnom zamućenošću podloge; sediment je malen, sivkaste boje, lako se lomi. Oni formiraju parijetalni prsten, film na površini juhe obično je odsutan.
Na MPA, kolonije su prozirne sa sivkasto-plavom nijansom, lako se spajaju jedna s drugom (vidi Dodatak 2).
Prilikom sjetve na diferencijalne podloge:
na Endovoj podlozi formiraju ravne crvene kolonije srednje veličine sa tamnim metalnim sjajem (E. coli). (Vidi Aneks 3)
na Levinovom mediju, Escherichia coli daje kolonije obojene u boju indikatora, jer su u stanju da razgrađuju laktozu sadržanu u ovim podlogama.
na Hiss medijima, Escherichia coli može formirati plin. Na selektivno-diferencijalnim podlogama, kolonije poprimaju boju koja odgovara boji podloge.
na Ploskirevovoj sredini - crveno sa žutom nijansom ili bezbojno.
na krvnom agaru (KA) može dati potpunu hemolizu.
2.3 Biohemijska svojstva
E. coli proizvodi brojne saharolitičke enzime, brzo fermentira glukozu i druge ugljikohidrate, najčešće uz stvaranje kiselina i plinova. Gotovo svi biotipovi Escherichia coli konstantno fermentiraju manitol, arabinozu, maltozu uz stvaranje kiseline; preko 90% sojeva - laktoza, sorbitol; povremeno - saharoza, rafinoza, ramnoza, ksiloza, dulcit, salicin; po pravilu, adonit i inozitol ne fermentiraju. E.coli ne koristi amonijum citrat, natrijum malonat, ne raste na medijumu kalijum cijanida, ne redukuje nitrate i nitrite, ne razgrađuje ureu, ne rastvara želatinu, većina sojeva formira indol i ne oslobađa H 2S. Escherichia coli daje pozitivnu reakciju s metilrotom i negativnu Voges-Proskauerovu reakciju: (Da bi se uspostavila Voges-Proskauerova reakcija, 1 kubni cm 6% alkoholnog rastvora alfa-naftola dodaje se u 2,5 cc bakterijske kulture, a zatim 0,4 kubnih cm 40% vodenog rastvora KOH, dobro protresti epruvetu i nakon 3-5 minuta uzeti u obzir rezultate. Ako je acetilmetilkarbinol prisutan u kulturi, postaje ružičasta - pozitivna reakcija, žuta boja kultura ukazuje na negativnu reakciju, uz sumnjivu reakciju kultura postaje svijetlonarandžasta.). E. coli ne sintetizira enzime citokrom oksidazu i fenilalanin deaminazu, dekarboksilira lizin, ornitin i dehidrolizira arginin nedosljedno. Umotajte mlijeko.
2.4 Antigenska struktura
Prema antigenskim, i što je najvažnije, toksinogenim svojstvima, postoje dvije varijante E. coli:
oportunistička E. coli;
patogeni bacili koji uzrokuju dijareju.
E. coli sadrži O-, K- i H-antigene. O (somatski) - antigeni u E. coli su povezani sa lipopolisaharidom (LPS) ćelijskog zida. Imunohemijska specifičnost O-antigena određena je sastavom heksasaharida u ponavljajućim jedinicama terminalnog dijela polisaharidnog lanca, koji je na drugom kraju povezan preko 2-keto-3-deoksioktonata (KDO) za lipid A. Na primjer, LPS struktura jednog od sojeva Escherichia coli predstavljena je na sljedeći način:
Broj šećera u istoj terminalnoj vezi, kao i broj determinantnih karika u različitim serogrupama Escherichia, nije isti. Specifičnost O-antigena Escherichia coli obično se utvrđuje u reakciji aglutinacije sa O- ili OB-aglutinirajućim serumima na predmetnom predmetu, rjeđe drugim metodama.
K-antigeni su površinski antigeni koji su povezani sa kapsulom i LPS-om Escherichia coli. Dijele se na A-, B- i L-antigene, koji se međusobno razlikuju po osjetljivosti na visoke temperature i hemijske agense. Najveća otpornost na toplotu (do 100°C za 2 ½ sat), alkohol i 1 N. Rastvor HCl ima A-antigen, najmanje stabilan L-antigen. U većini Escherichia coli, K antigeni su kiseli polisaharidi koji sadrže uronske kiseline. Neki K antigeni sadrže samo protein. E. coli sa K-antigenima se ne aglutiniraju homolognim O-coli serumom. Ova karakteristika je svojstvena živim kulturama i gubi se nakon što se prokuhaju ili autoklaviraju. Prisustvo K-antigena se takođe utvrđuje u reakciji adsorpcije aglutinina i u imunoelektroforetskim studijama.
H-flagelirani, ili flagelarni, antigeni su svojstveni aktivno pokretljivim sojevima. Oni su povezani sa proteinom flagelina i određuju tip imunohemijske specifičnosti Escherichia coli. H-antigeni su termolabilni. Potpuno se uništavaju kada se prokuvaju 2½ sati.
U E. coli je opisano oko 170 O antigena, 97 K antigena i 50 H antigena. Sojevi Escherichia coli opremljeni cilijama sadrže proteinske cilijarne antigene. Nalaze se u reakciji hemaglutinacije.
Escherichia coli se označava prema antigenskim formulama: na prvo mjesto stavlja se broj O-antigena, na drugo broj K-antigena, a na treće H-antigen. Tip K-antigena je naveden u zagradama. Na primjer, K(B) ili K(L). Broj O-, K- i H-antigena razdvojen je dvotočkama. Prema antigenskim formulama utvrđuje se pripadnost ispitivanog soja određenoj serološkoj grupi.
Epizootske epidemije kolibaciloze najčešće uzrokuju patogene sojeve Escherichia sljedećih ser grupa:
kod teladi - 08, 09, 015, 020, 026, 035, 078, 086, 0101, 0115, 0117, 0119, 0141, rjeđe 02, 033, 041, 055, 01;
kod prasadi - 06, 026, 033, 0101, 0136, 0139, 0141, 0142, 0149, 0152, 0157;
kod jagnjadi - 04, 08, 09, 015, 020, 028, 035, 041, 078, 0101, 0137;
kod ptica - 01, 02, 08, 015, 018, 026.055, 078, 0111, 0113, 0128, 0141.
2.5 Plazmidi
E. coli može sadržavati različite plazmide: profag, faktor plodnosti, kolicinogeni faktor, faktor rezistencije, antigeni faktor, enterotoksigeni faktor i druge. Profagi mogu uzrokovati promjene u pojedinačnim znakovima Escherichia coli, na primjer, O-antigen (lizogenija (od grčkog l ý sis - raspadanje, raspadanje i ... geneia - porijeklo, stvaranje), genetski određena sposobnost bakterija da liziraju uz oslobađanje bakteriofaga niz generacija nakon direktne infekcije njime. Teoriju lizogenije razvili su 1950. godine francuski naučnici A. Lvov i A. Gutman, koji su pokazali da je lizogeno stanje povezano sa prisustvom potencijalno zarazne strukture, profaga, u bakterijskim ćelijama. U svakoj generaciji lizogenih bakterija, vrlo mali dio stanica (~1 stanica na milijun) podliježe lizi, uz oslobađanje od 70 do 150 čestica takozvanog umjerenog faga. Učestalost prijelaza profaga u infektivno stanje (indukcija profaga) može se povećati brojnim agensima (npr. ultraljubičastim zracima). Nakon infekcije bakterijske ćelije umjerenim fagom, proces infekcije može se razvijati u jednom od dva smjera: duž putanje litičkog ciklusa, koji se, baš kao i kada su bakterije inficirane virulentnim fagom, završava lizom stanice i oslobađanjem potomstvo faga u okolinu; na putu lizogenizacije, kada se kao rezultat biosintetskih procesa u ćeliji razvije imunitet na inficirani fag, DNK faga se uključuje u DNK bakterije i nakon toga se replicira zajedno s njom kao njena komponenta (profag), i bakterija opstaje i postaje lizogena. Sudbina ćelije odlučuje se u prvim fazama infekcije i zavisi uglavnom od vremena formiranja imuniteta. Ako se stanje imuniteta pojavi prije nego što razvoj infekcije dostigne fazu koja nepovratno vodi do lize, tada može doći do lizogenizacije. Genom bakterija može istovremeno sadržavati profage nekoliko različitih faga (spol i lizogenija). U ovom slučaju, ćelija je imuna na sve ove fage. Kao rezultat lizogenizacije, neka svojstva bakterijske ćelije mogu se promijeniti (tzv. lizogena konverzija), zbog sticanja novih genetskih informacija od strane bakterije. Umjetno dobivene lizogene bakterije se po svojim svojstvima ne razlikuju od lizogenih bakterija koje se nalaze u prirodnim uvjetima. U malom dijelu potomstva lizogene ćelije dolazi do "izlječenja" - gubitka profaga. Ćelije koje su izgubile profag stvaraju nelizogene linije. Učestalost ovog procesa može se povećati, na primjer, djelovanjem ultraljubičastih zraka. Dakle, lizogenija. - složeni oblik virusne infekcije kod bakterija, u kojem prolazi veliki broj ćelijskih generacija od trenutka infekcije bakterije fagom do stanične lize).
F-plazmidi određuju seksualni polaritet i uzrokuju stvaranje seksualnih cilija (sex-pili). Kol plazmidi kontroliraju proizvodnju kolicina, koji inhibiraju rast filogenetski srodnih bakterija. R-plazmidi su odgovorni za rezistenciju E. coli na antibiotike. Plazmid K88 kontroliše sintezu istoimenog antigena i niti koje određuju adhezivna svojstva enteropatogene i enterotoksigene Escherichia coli; Plazmidi mogu biti dva tipa. Jedan od njih određuje sintezu termolabilnog, drugi - termolabilnog i termostabilnog enterotoksina.
2.6 Formiranje toksina
E. coli proizvodi endotoksin povezan sa LPS (lipopolisaharid), koji je dio O-antigena. Biološka aktivnost endotoksina različito je izražena u različitim serogrupama Escherichia coli. Toksična svojstva endotoksina određena su cijelom molekulom LPS, budući da je jedan lipid ili polisaharid niske toksičnosti. Endotoksin utiče na sistem zgrušavanja krvi, izaziva Schwartzmanov fenomen i druge pojave, ima pirogena, pomoćna, zaštitna i mitogena svojstva. U malim dozama stimulira, a u velikim dozama inhibira fagocitnu reakciju.
Mnoge serogrupe E. coli proizvode endotoksine. Smatra se da neke serogrupe Escherichia coli izazivaju dijareju nalik koleri kod ljudi, druge samo kod životinja (svinje, telad).
E. coli proizvodi dvije vrste enterotoksina. Termostabilni enterotoksin se inaktivira tek nakon 30 minuta ključanja, polako dijalizira kroz celofan i ostaje aktivan pri kiselim pH vrijednostima i nakon tretmana tripsinom i pronazom. Molekularna težina 10 3-104. Nema antigena svojstva. Toplotno labilni enterotoksin se inaktivira nakon 30 minuta zagrijavanja na 60°C, pH 4,0-5,0, pod djelovanjem pronaze i ne dijalizira se. Antigenska specifičnost termolabilnih enterotoksina koje proizvode različite serogrupe i kolerogena je ista. Stimuliraju aktivnost adenilat ciklaze i uzrokuju nakupljanje cikličkog adenozin monofosfata (cAMP), što dovodi do poremećaja lučenja i razvoja akutne dijareje.
2.7 Otpor
Otpornost E. coli na vanjske faktore uobičajena je za asporogene bakterije. U vanjskom okruženju (voda, tlo) opstaje, ovisno o specifičnim uvjetima, nekoliko mjeseci. Kada se zagrije u suspenziji, umire na 55 ° nakon sat vremena, na 60 ° - nakon 15 minuta, u 1% otopini fenola - nakon 10 minuta, u otopini živinog klorida 1: 1000 - nakon 2 minute. E. coli ima selektivnu osjetljivost na soli briljantne zelene i tetrationske kiseline. To je osnova za korištenje niza selektivnih medija. Mnogi sojevi E. coli su visoko osjetljivi na monomicin, kanamicin, gentamicin.
2.8 Patogenost
Escherichia coli - komensali debelog crijeva - može izazvati gnojno-upalne procese u organima i tkivima s naglim smanjenjem otpornosti tijela.
Virulencija Escherichia coli se očituje u adhezivnosti Escherichia coli, odnosno prianjanju na resice crijevnog epitela, razmnožavanju u lumenu tankog i debelog crijeva, prodiranju u epitelne stanice i intracelularnoj reprodukciji, kao i supresiji fagocitna aktivnost makrofaga i polimorfonuklearnih leukocita. Escherichia coli - uzročnici kolienteritisa kod mladih životinja i bolesti sličnih koleri kod odraslih životinja - razmnožavaju se na površini epitelnih stanica crijeva. Escherichia coli - uzročnici bolesti sličnih dizenteriji - prodiru u epitelne stanice i razmnožavaju se u njima. Manifestacija virulencije E. coli ovisi o dozi bakterija koje su ušle u crijevo. Virulencija Escherichia coli se utvrđuje u kulturama tkiva, eksperimentima na laboratorijskim životinjama u reprodukciji eksperimentalnog kolienteritisa, upale pluća i drugih procesa. Sposobnost penetracije se utvrđuje Šerenovim keratokonjunktivalnim testom uvođenjem kulture E. coli u konjunktivu oka zamorca.
E.coli može nanijeti značajnu štetu životinji. Sojevi koji žive u debelom crijevu i oportunistički su patogeni mogu izaći izvan gastrointestinalnog trakta i sa smanjenjem imuniteta i njihovom akumulacijom mogu uzrokovati različite nespecifične pioinflamatorne bolesti (cistitis, holecistitis, kolisepsa i dr.). Takve bolesti se nazivaju parenteralna ešerihioza.
Dijareični sojevi E. coli koji ulaze u tijelo izvana mogu uzrokovati izbijanje enteralne (epidemijske) ešerihioze.
Novorođene životinje najčešće pate od epidemijske ešerihioze, u kojoj imunološki sustav još nije u potpunosti formiran; imaju samo IgG dobijen od majke preko placente (a IgM štiti od gram-negativnih bakterija); kiselost želudačnog soka je niska; normalna mikroflora se tek formira.
Ali dijareagenična ešerihija može uticati na starije životinje, kao i na odrasle. Štaviše, ešerihioza se može odvijati, na primjer, po tipu kolere (enterotoksigeni sojevi), dizenterije (enteroinvazivni sojevi), hemoragičnog kolitisa (enterohemoragični sojevi). Ponekad Escherichia coli uzrokuje kolisepsu, peritonitis, endotoksičnost (septički šok). Osim toga, E. coli može uzrokovati trovanje hranom.
2.9 Patogeneza
Posebnost ove infekcije leži u činjenici da su nastanak i razvoj bolesti uvjetovani originalnošću zaštitnih reakcija kod mladih životinja iu znatno manjoj mjeri ovise o svojstvima mikroba uzročnika i dozi infekcije. . Od velikog značaja u patogenezi nastanka bolesti su promjene enzimske aktivnosti žlijezda gastrointestinalnog trakta, pojava disbakterioze, smanjenje antagonističkih, enzimskih i vitaminskih svojstava crijevne mikroflore. Toksikoza kod kolienteritisa je uzrokovana brojnim razlozima. Zajedno s kolitoksinom koji luče patogeni serološki tipovi Escherichia coli i produktima raspadanja mikrobnih tijela, toksični proizvodi nastali iz hrane apsorbiraju se iz crijeva zbog kršenja procesa probave i brzine njegovog kretanja u lumenu crijeva. Ovi toksični proizvodi i antigeni Escherichia coli utiču na nervne završetke i direktno na nervne centre, na zidove krvnih sudova i tkiva. Drugi čimbenik koji ima ogroman utjecaj na kliničke manifestacije toksikoze je promjena mase cirkulirajuće krvi, koja je uzrokovana oštrim spazmom arteriola sa značajnim širenjem kapilara i malih vena. Istovremeno, zbog širenja žila trbušne šupljine, dolazi do preraspodjele mase krvi, njenog taloženja u trbušnoj šupljini i stvaranja anemije u žilama mozga, kože i bubrega. Povećanje vaskularne permeabilnosti dovodi do pojave edema tkiva zbog prelaska proteina i tekućeg dijela krvi u međućelijske prostore. Povećanju zgrušavanja krvi i pogoršanju cirkulacije krvi doprinose i veliki gubici vode i soli uz česte tečna stolica, povraćanje, pojačano isparavanje s površine kože, kao i pri disanju. Sve to dovodi do kršenja cirkulacije krvi, pogoršanja opskrbe tkiva kisikom, smanjenja srčane aktivnosti i smanjenja stvaranja urina.
Povećanje razine kalija kod takvih pacijenata je kratkotrajno i brzo se zamjenjuje progresivnim smanjenjem njegove razine u krvnom serumu na pozadini povećanog gubitka kalija u urinu i izmetu.
Određenu ulogu u nastanku slike toksikoze ima gotovo konstantan i dugotrajan pad funkcije kore nadbubrežne žlijezde uz smanjenje proizvodnje i lučenja glukokortikoidnih hormona koji reguliraju vaskularni tonus, metabolizam proteina i ugljikohidrata i obnavljaju oštećene stanice. propusnost.
2.10 Ekologija
Rezervoar Escherichia coli u prirodi je osoba čije je životinjsko debelo crijevo naseljeno različitim biotipovima ovog mikroba.
Broj E. coli u 1 g fecesa kreće se od nekoliko miliona do 1-3 milijarde jedinki. Tokom života dolazi do višestruke promjene biovara E. coli u crijevima. Određenu ulogu u ovom procesu imaju ishrana, prošle infekcije, liječenje hemoterapijskim lijekovima, antibioticima i drugi faktori.
3. Laboratorijska dijagnostika
Kada se pronađu bakterije tipične za E. coli u pogledu morfoloških, tinktorijalnih i kulturnih svojstava, biohemijska svojstva se ne proučavaju, već se odmah ispituju u RA na staklu sa aglutinirajućim antiadhezivnim serumom, prvo sa kompleksnim, a zatim kada je pozitivan rezultat. dobijene monovalentnim serumima. Rezultat reakcije se uzima u obzir u roku od jedne minute. Kontrole su:
) test kultura + fiziološki rastvor;
) kultura + normalni zečji serum razrijeđen 1:10.
Kulture uzgojene na MPA testirane su sa serumima K 88, 987 P i A 20, kulture iz Minkove podloge - sa serumima K 99 i F41. Kada je RA pozitivan, kulture se klasifikuju kao uzročnici ešerihioze i time se završava njihovo dalje istraživanje. U odsustvu Escherichia sa adhezivnim antigenima, kultura se identifikuje na osnovu proučavanja enzimskih karakteristika. E. coli karakterizira razgradnja glukoze i laktoze uz stvaranje kiseline i plina, oslobađanje indola, odsustvo ureaze i nemogućnost iskorištavanja citrata.
U kulturama identifikovanim kao E. coli, pripadnost O-serogrupi je utvrđena kao indirektni pokazatelj patogenosti ili se patogenost proučava u biotestima na bijelim miševima, pilićima.
O-serogrupa Escherichia je uspostavljena na sljedeći način. Kulture uzgajane na MPA sa kosom na 37 0C 18-20 sati, isprati fiziološkim rastvorom, preneti u suve sterilne epruvete, zagrejati u vodenom kupatilu na 100 0Sa 1 sat za uništavanje površinskih termolabilnih L- i B-antigena ili autoklaviranje na 120°C 2 sata za uništavanje termostabilnog A-antigena. Zagrijana suspenzija bakterija se centrifugira na 2000 ... 3000 min -110 ... 15 minuta i talog se koristi kao antigen za postavljanje RA na staklo. Ostatak antigena se razrijedi sterilnom fiziološkom otopinom do koncentracije ćelije od 5 108/ml i stavite epruvetu RA.
Određivanje serogrupne pripadnosti kultura počinje postavljanjem RA na staklo sa grupnim polivalentnim serumima: polivalentni serumi se nanose kap po kap na čisto staklo bez masti. Kultura istaložena centrifugiranjem se petljom unosi u svaku kap i dobro promiješa, rezultat se uzima u obzir u roku od 3 minute. Pozitivnu reakciju karakterizira stvaranje sitnozrnatih aglutinata i pročišćavanje tekućine. Ako je rezultat negativan, cijeli pad ostaje mutan.
Antigen aglutiniran jednim od seruma polivalentne grupe se ispituje u RA na staklu sa monovalentnim serumima razblaženim 1:10 i uključenim u ovaj polivalentni serum. Zatim se sa monovalentnim serumom, koji je dao pozitivnu reakciju, RA stavlja u epruvete u zapremini od 1 ml. Serum se razrijedi fiziološkom otopinom 1:25 do titra naznačenog na etiketi: prvo pripremite početno razrjeđenje - dodajte 0,1 ml seruma u 2,4 ml fiziološkog rastvora, u preostale epruvete sipajte 0,5 ml fiziološkog rastvora, prebacite 0 sa početne razblaživanje ,5 ml smjese u drugu, miješanje, iz druge u treću itd., iz posljednje epruvete se ukloni 0,5 ml smjese, a iz prve 1,5 ml. Dodajte 0,5 ml antigena u sve epruvete. Istovremeno se postavljaju kontrole: 1) antigen + fiziološki rastvor (da se isključi samoaglutinacija); 2) serum razrijeđen 1:25 bez antigena (da bi se izbjegla flokulacija). Sve epruvete se protresu, drže u termostatu na 37°C 16...18 sati, a zatim na sobnoj temperaturi - 6...8 sati.Reakcija se očitava pomoću aglutinoskopa.
Rezultati se uzimaju u obzir prema općeprihvaćenoj metodi i označeni su križićima (++++, +++, ++, +, -).
Za ubrzanu dijagnostičku metodu i povećanje učestalosti pozitivnih rezultata koristi se metoda luminiscentnih antitijela - modifikacija metode Koons i Chestnut (Coons, Kaplan, 1950). Razmaz se priprema ili direktno iz stolice (razrijeđen 5-10 puta fiziološkom otopinom), ili nakon prethodnog uzgoja 3-24 sata na Endo mediju ili u tečnom bujonu. Nakon tretmana specifičnim fluorescentnim serumom, uz pozitivan rezultat, u preparatu se detektuje blistav sjaj bakterijskih ćelija kada se gleda pod fluorescentnim mikroskopom.
4. Liječenje i prevencija
Tretman.Sve aktivnosti se provode otprilike na isti način kao kod salmoneloze. Serum protiv Escherichia coli nije uvijek efikasan zbog činjenice da ne odgovara uvijek vrsti uzročnika kolibaciloze. Najefikasniji učinak postiže se oralnom primjenom hlortetraciklin hidroklorida (0,01-0,02 g svaki), oksitetraciklina (0,025 g svaki) ili micerina (0,01 g na 1 kg žive težine).
Antibiotici se široko koriste za liječenje bolesnih životinja (O. 3. Iskhakov et al., 1984):
Ampicilin, Lijek se primjenjuje oralno, pojedinačno ili grupno, 20 mg po kg tjelesne težine 3 puta dnevno;
Biovit. Antibiotik se propisuje uz hranu, vodu, kolostrum 2 puta dnevno u dozi od 0,25 g po kg žive težine. Tok prevencije je 5-20 dana;
Vitatetrin. U terapijske svrhe daju pojedinačno 40 mg po kg žive težine u razmaku od 12 sati.Tiječenje je 5-7 dana;
Gentamicin. Antibiotik se daje intramuskularno u dozi od 1,5 mg po kg žive težine 5-7 dana;
Levomicetin. Dodijelite oralno 20 mg na 1 kg žive težine;
Mix-10. Davati sa hranom u dozi od 3-4 kg po 1 toni hrane. Tok tretmana je 7-10 dana;
Noromandomyxin. Doze za telad 100 mg po 1 kg žive težine. Antibiotik se daje na usta. Tok tretmana je 7 dana;
Orimycin. Primjenjuje se intramuskularno, subkutano, intraperitonealno ili polako intravenozno u dozi od 4-30 mg po kg težine životinje 2 puta dnevno. Zapremina injektiranog rastvora je 10-20 ml. Tok tretmana je 5-7 dana;
Polimiksin M sulfat. Davati unutra 2-3 puta dnevno u obliku vodenog rastvora od 4 mg po kg žive težine;
Solvovetin. Primjenjuje se intramuskularno nakon 12 sati u dozi od 0,15 ml po kg žive težine. Injekcije se ponavljaju 5-7 dana;
Spectam B. Spectam se daje oralno 20-30 minuta prije pijenja kolostruma. Doza - 40-60 mg po kg žive težine životinje 2 puta dnevno, 3 dana za redom.
Pored antibiotika, kolibaciloza pokazuje upotrebu sulfanilamidnih lijekova: selfapiridazin, ftazin, sulfadimetoksin, sulfamonometoksin, enteroseptol, intestopan, meksaform, nevigrom itd. (R.M. Salimov, 1985; V.747; V.79, 1985; V.747; 1985; L. I. Gershkovich, 1966; V. A. Gumul i dr., 1985). Nedavno su za liječenje teladi sa kolibacilozom predloženi Lers i Startin, koji pružaju terapijski učinak do 88 posto. (N.I. Ovsyanov et al., 1984; I.D. Kolesnichenko et al., 1985).
Mjere kontrole i prevencije. Kada se postavi dijagnoza, bolesna telad se izoluju i leče. Rođena telad se hrani sa 80-100 ml hiperimunog seruma i 10 ml koliprotektana. Coliprotektan se daje u roku od dva dana do 60 ml. Otpaka i stajnjak se uklanjaju iz prostorija svaki dan. Stajnjak se skladišti na određenom mestu za biotermalnu dezinfekciju. Mašine ili kavezi u ambulanti za telad takođe se svakodnevno dezinfikuju. Dezinfikujte inventar, oluke za stajnjak, prolaze za stajnjak.
U dijelu gdje se drže bolesna telad, razmak između kaveza za transfer se produžava. Dezinfikujte unutrašnji vazduh. Osoblje koje radi u štali za telad je obezbeđeno kombinezonom i obućom. Posjećivanje ambulante, teladi neovlašćenim licima nije dozvoljeno. Centralni zadatak borbe protiv kolibaciloze je stvaranje normalnih uslova za ishranu i držanje krava, kao i osiguranje uzgoja mladih životinja. U tom smislu, krave treba hraniti na bazi biološki potpune ishrane. Od životinja se traži da se aktivno vježbaju. Organizacija aktivne vježbe kod krava je snažan faktor koji sprječava nakupljanje plazmida sa patogenošću i otpornošću na lijekove.
Jednako važna u sistemu prevencije širenja patogene ešerihije je i pravilna organizacija teljenja i uzgoja novorođenih teladi. Za teljenje krava svaka farma je opremljena dvodelnim porodiljnim krečom u stopi od 10-15% mesta od ukupnog broja krava. U svakoj takvoj sekciji konstruirano je nekoliko kutija. Prije teljenja vrši se toalet i dezinfekcija kože krave. Dezinficirana kutija je napunjena kvalitetnom posteljinom. Teljenje se prihvata na čistom mehu. U prvom satu nakon rođenja, radi prevencije kolibaciloze, tele se hrani sa 80-100 ml hiperimunog seruma, zatim kolostruma.
Uzgoj rođene teladi je organizovan u boksovima. Da bi se to postiglo, ambulanta je podijeljena na 4 izolirana dijela sa zasebnim ulazima, autonomnom ventilacijom i kanalizacijom. Pojedinačne ćelije su instalirane u svakoj sekciji. Sekcije se popunjavaju za 3-4 dana. Kada ih koristite, poštuje se princip "sve je prazno - sve je zauzeto". Drže se u pojedinačnim kavezima 10 dana, a zatim se iz ambulante prebacuju na grupno održavanje. Trude se da telad u kućici za telad budu smeštena deo po deo u jedan ili dva grupna kaveza. Ćelije i odjeljak koji se pušta u ambulantu podvrgavaju se mehaničkom čišćenju i dezinfekciji. Nakon toga sekcija se ne zauzima pet dana, daje joj se „biološki odmor“.
Farme provode specifičnu prevenciju kolibaciloze. Da bi se to postiglo, duboko gravidne krave i junice se vakcinišu aluminijum hidroksidom, formol-tnomersal vakcinom protiv kolibaciloze teladi i jagnjadi. Krave i junice imuniziraju se 1,5-2 mjeseca prije teljenja intramuskularno dva puta sa pauzom od 10-15 dana. Vakcinacijom krava obezbeđuje se visoka koncentracija antitela u kolostrumu, koja štite rođeno tele od uticaja patogene ešerihije. Primjena vakcine kod krava smanjuje incidencu kolibaciloze kod teladi za 1,5-3 puta, mortalitet za 5-10 puta (VV Kolchak, 1983).
Osim toga, u cilju prevencije bolesti, za telad je indikovana upotreba seruma krvi krave uzetog na istoj farmi, kao i normalnih globulina, kolifaga. Ispijanje acidofilne bujonske kulture, acidofilno mlijeko ima pozitivan učinak. Dobar efekat je upotreba kolibakterina, bifidumbakterina. Bifidumbacterin se propisuje 2-3 doze 2-3 puta dnevno tokom 3-4 dana G.V. Gnatenko i saradnici (1983.), duboko steonim kravama preporučuje se liječenje streptomicinom. Lijek u dozi od 500 IU po 1 kg žive težine primjenjuje se intramuskularno 2 puta dnevno 3 dana za redom. Prema njihovim podacima, incidencija teladi dobijenih od tretiranih krava smanjena je na 7,1%.Uginuća nema. U nedostatku takvog tretmana, incidencija teladi dostiže 80%, smrtnost - do 61%.
Zaključak
E. coli, Escherichia coli, - ovo ime smo čuli više puta u TV izveštajima o epidemijama poslednjih godina u nekim ruskim gradovima (Ivanovo, Smolensk, Čeljabinsk). Kada osoba neupućena u mikrobiologiju sluša radio ili gleda slične priče na televiziji, stiče se utisak da E. coli može samo naštetiti čovjeku i da se mora riješiti na sve moguće načine.
Ali ako malo bolje pogledamo ovaj mikroorganizam, vidjet ćemo da E. coli može donijeti mnoge dobrobiti čovječanstvu, a njeni štetni efekti mogu se značajno ograničiti pravilnim sanitarno-higijenskim mjerama i pravilnim tretmanom. To je vrlo zgodan objekat za dovođenje genetskog inženjeringa i drugih studija osmišljenih da pomognu u budućnosti u liječenju pacijenata sa raznim bolestima.
U našoj zemlji se ove studije ne provode tako aktivno kao u Sjedinjenim Državama, zbog nedostatka sredstava za takav rad, ali ako se ovaj problem riješi u bliskoj budućnosti, onda ruski naučnici imaju sve šanse da otkriju najnovije metode liječenja. povezana sa upotrebom Escherichia coli (Ogroman entuzijazam domaćih naučnika, uključujući i interesovanje savremene naučne omladine, takođe igra značajnu ulogu).
Spisak korišćene literature
1.Borisov L.B. Enteropatogena Escherichia coli i njihovi fagi, L., 1976.
2. TSB, str. 366-368.
Gnatenko G.V., Tupia L.G. Rakitsky D.T. Iskustvo u borbi protiv kolibaciloze teladi. - Veterinarska medicina, Kijev: "Žetva", 1983, br. 57
Gumul V.A., Afanasiev L.A., Maulanov A. 3. Klinika i liječenje kolibaciloze u teladi. - Bilten poljoprivrednih nauka Kazahstana, 1985, br. 2.
Kaufman F. Porodica crijevnih bakterija, trans. sa engleskog, M., 1959.
Kiryanov E.A. Patogena mikroflora preživara. - U knjizi: Borba protiv bolesti domaćih životinja u Transbaikaliji i na Dalekom istoku. Sat. naučnim Zbornik radova Poljoprivrednog instituta Blagoveščenska, Blagoveščensk, 1974.
Kiryanov E.A. Bolesti teladi i njihova prevencija u kolektivnim farmama i državnim farmama Primorskog kraja. - Vladivostok, 1977.
Kiryanov E.A., Sosnin M.F. Epizootska situacija i problemi zdravih životinjskih stada u Amurskoj regiji. - Povećanje produktivnosti domaćih životinja na Dalekom istoku. Sat. naučnim tr. Primorski poljoprivredni institut, br. 47, Ussuriysk, 1978.
Kirjanov E.A., Galiulina R.V. Prevencija bolesti mladih domaćih životinja. - Vladivostok, 1979.
Kirjanov E.A., Tjutrin I.F. Skice o zaraznoj patologiji domaćih životinja. - Reprodukcija stada i veterinarska zdravstvena zaštita u uslovima intenzivnog stočarstva na Dalekom istoku. Sat. naučnim tr. Primorski poljoprivredni institut, Ussuriysk, 1981.
Kolčak V.V. Kolibaciloza teladi i mjere za borbu protiv nje na farmama Amurske regije (metoda, preporuke). - Novosibirsk: SO VASKhNIL, 1983,
Koljakov I - E-, Gitelson S. S., Kavruk L.S. kolibaciloza kod teladi. - M: "Spike", 1970.
Luria S., Darnell J., Opća virologija, trans. sa engleskog, M., 1970; Ravin V.K., Lysogenia, M., 1971.
Medicinska mikrobiologija, virologija i imunologija, ur. L.B. Borisov i A.M. Smirnova, str. 269-273, M., Medicina, 1994.
Medicinska enciklopedija, strana 252.
Metode sanitarnih i mikrobioloških istraživanja objekata životne sredine, ur. G.I. Sidorenko, M., 1978.
Mikrobiologija i imunologija, ur. AA. Vorobyova, str. 289-293, M., Medicina, 1999.
Minkevich I.E. Bakterije iz grupe Escherichia coli kao sanitarni indikativni mikroorganizmi, L., 1949.
Mozhukhin Yu.P. O epizootologiji kolibaciloze kod teladi i prasadi u Amurskoj regiji. - U knjizi: Materijali XIX naučnog skupa. Blagovješčensk, 1971
Ovsyanov N.I., Ovladeva M.A., Naumova K.N. Lers lijek za dijareju teladi. - Sibirska zemlja, Daleki istok, 1984, br. 2
Akutne crijevne infekcije, ur. T.V. Peradze, str. 73, L., 1973.
Pozdeev O.K. Medicinska mikrobiologija, str. 351-357, M., Geotar-med, 2002.
Prodanov V.I. Materijali za proučavanje gastrointestinalnih bolesti novorođenih teladi. - U knjizi: Prevencija i liječenje bolesti mladih domaćih životinja. Moskva: Kolos, 1974
Salimov R.M. Lijekovi za kolibak-
teriosis. - Sibirski, Daleki istok, 1985. Tabačnik A.L., Giršovič E.S., Temper R.M. Enterotoksigena E.coli, Zhurn. mikr., epid. i imuno., br. 3, str. 31, 1977.
Fortushny V.A. Sulfagin za kolibacilozu kod teladi. - Veterina, 1985, br. 9
Tutoring
Trebate pomoć u učenju teme?
Naši stručnjaci će savjetovati ili pružiti usluge podučavanja o temama koje vas zanimaju.
Pošaljite prijavu naznačivši temu upravo sada kako biste saznali o mogućnosti dobivanja konsultacija.
STYLAB nudi test sisteme za detekciju Escherichia coli (E. coli) u uzorcima hrane i životne sredine mikrobiološkim metodama, PCR u realnom vremenu i lateks aglutinacijom.
coli ( Escherichia coli) je fakultativna anaerobna gram-negativna pokretna bakterija u obliku štapa koja je dio normalne crijevne mikroflore većine toplokrvnih životinja, uključujući ljude. Postoji mnogo serotipova E. coli, od kojih je većina bezopasna ili čak korisna za nosioca. Bakterije koje čine mikrofloru sprečavaju razmnožavanje drugih bakterija, uključujući i patogene. Osim toga, E. coli proizvodi vitamin K. Međutim, neki serotipovi E. coli može izazvati tešku bolest. Morfološki bezopasna i patogena Escherichia coli se ne razlikuju, stoga je za utvrđivanje patogenosti mikroorganizma potrebno analizirati njegove antigene.
Bakterije E. coli mogu pripadati različitim serogrupama: imaju različite antigene. Serogrupa je grupa bakterija koje dijele zajednički antigen; može uključivati više od jednog serotipa, vrste ili roda. Za E. coli najpoznatije su enteropatogene Escherichia coli serogrupe O26, O55, O86, O111, O114, O119, O125, O126, O127, O128, O142 i O158. Druge vrste patogene Escherichia coli također mogu pripadati istim grupama. Na primjer, serogrupe O86, O127, O142 i O158 su identificirane u DAEC-u.
Postoji šest vrsta patogene Escherichia coli.
- Enterohemoragična Escherichia coli (EHEC, koriste se i skraćenice STEC - od "E. coli koja proizvodi shigatoxin" i VTEC - "E. coli koja proizvodi verotoksin"). Ove bakterije proizvode dva toksina, koji se nazivaju toksini slični šigama (Shigella-like). EHEC uzrokuje bolesti slične po simptomima dizenteriji i praćene hemoragičnom dijarejom. U teškim slučajevima može se razviti hemolitičko-uremijski sindrom (HUS). EHEC uključuje serotipove E. coli O104:H4, O157:H7 i neke druge.
- Enterotoksigena Escherichia coli (ETEC) proizvodi toksine otporne na toplinu i stabilne na toplinu, od kojih je potonji sličan Vibrio cholerae. Bolesti uzrokovane ovom bakterijom karakteriziraju vodenasti proljev, groznica i, u nekim slučajevima, mučnina.
- Enteroinvazivna Escherichia coli (EIEC) uzrokuje bolesti slične bacilarnoj dizenteriji. Ove bakterije prodiru u stanice crijevnog epitela i razmnožavaju se u njima.
- Enteropatogena Escherichia coli (EPEC) češće izaziva dijareju kod dece nego kod odraslih. Njegov mehanizam djelovanja razlikuje se od ETEC i EIEC: ove bakterije se vežu za stanice crijevnog epitela, ali ne prodiru u njih. Bolesti uzrokovane EPEC-om mogu trajati do 2 sedmice.
- Enteroagregativna E. coli (EAEC) također uzrokuje bolest, uglavnom kod djece. Bakterije se vežu za crijevni epitel i oslobađaju toksine.
- Difuzno-ljepljiva E. coli (DAEC) uzrokuje blagu dijareju kod djece, posebno one mlađe od 2 godine. Međutim, ovaj mikroorganizam je pronađen kod zdrave djece, kao i kod zdravih odraslih osoba.
E. coli može uzrokovati ne samo enteritis i toksične infekcije, već i neonatalni meningitis, respiratorne infekcije, infekcije urinarnog trakta i bakteriemiju – uobičajenu tjelesnu leziju uzrokovanu bakterijama koje su ušle u krvotok.
E. coli pripada najistraženijim organizmima. Genom jednog od sojeva ovih bakterija potpuno je sekvenciran 1997. godine. E. coli se koristi u genetskim i mikrobiološkim eksperimentima, kao iu proučavanju specijacije. Osim toga, uz pomoć ovih bakterija sintetiziraju se različiti proteini, posebno analog humanog inzulina, neki enzimi itd. Koriste se i za proizvodnju vakcina. Istraživanja su u toku kako bi se E. coli koristila kao gorivo.
U Ruskoj Federaciji i zemljama Carinske unije, sadržaj E. coli u prehrambenim proizvodima ograničen je TR TS 021/2011 "O sigurnosti hrane", TR TS 033/2013 "O sigurnosti mlijeka i mliječnih proizvoda" i drugim tehničkim propisima. Ažurne pravne informacije možete pronaći na web stranici kompaktan24. com .
Za određivanje E. coli u uzorcima koriste se i mikrobiološke metode (selektivni mediji, test supstrati) i određivanje DNK pomoću PCR-a. Kao ekspresni testovi koristi se jednostavna i brza metoda lateks aglutinacije.
Književnost
- UREDU. Pozdeev. Medicinska mikrobiologija. Moskva, GEOTAR-MED, 2001.
- Zvanična web stranica CDC-a.
- Germani Y, Bégaud E, Duval P, Le Bouguénec C. Prevalencija enteropatogene, enteroagregativne i difuzno adherentne Escherichia coli među izolatima djece s dijarejom u Novoj Kaledoniji. J Infect Dis. 1996 nov;174(5):1124-6.
- Mansan-Almeida R, Pereira AL, Giugliano LG. Difuzno adherentni sojevi Escherichia coli izolirani od djece i odraslih čine dvije različite populacije. BMC Microbiol. 2013 Feb 1;13:22.
- Isabel C. A. Scaletsky, Sandra H. Fabbricotti, Rozane L. B. Carvalho, Claudia R. Nunes, Helcio S. Maranhão, Mauro B. Morais i Ulysses Fagundes-Neto Difuzno pristali Escherichia coli kao uzrok akutne dijareje kod male djece u sjeveroistočnom Brazilu: studija slučaj-kontrola. J Clin Microbiol. februar 2002; 40(2): 645-648.
Escherichia (E. coli)
Istorija otkrića.
Prvo su izolovani iz crijeva djeteta i opisani u 1885 Nemački pedijatar Theodor Escherich.
|
Taksonomija. Porodica |
Enterobacteriaceae |
|
Pleme |
|
|
Vrste |
E. coli i druge, ukupno 5 vrsta |
Morfologija i tinktorijalna svojstva .
E. coli su gram-negativni ravni štapići sa zaobljenim krajevima, veličine 0,4-0,-2-6 µm, nasumično raspoređeni u razmazima, pokretni (peritrihozni), imaju mikrokapsulu, tip I i II pili, ne formiraju spore.
kulturna dobra .
E.coli - fakultativni anaerobi, hemoorganoheterotrofi. Nije zahtjevan za uslove uzgoja. Optimalni uslovi uzgoja: temperatura 37 C, pH 7,2-7,5, trajanje uzgoja - 24-48 sati. Dobro rastu na jednostavnim hranljivim podlogama (MPB, MPA). U BCH, rast se uočava u obliku difuznog zamućenja, praćenog formiranjem precipitata. Na MPA formiraju kolonije u obliku slova S: blago konveksne prozirne kolonije sa ravnim rubovima i glatkom, sjajnom površinom srednje veličine. Moguć je rast u R-formi (kolonije nazubljenih rubova, hrapave površine), ponekad narastu mukozne kolonije (M-oblika).
Daju karakterističan rast na diferencijalno-dijagnostičkim medijima: Endo (grimizne kolonije s metalnim sjajem); Levin (tamnoplave kolonije s metalnim sjajem), Ploskirev (ružičaste kolonije s metalnim sjajem), Ressel i Olkenitsky. Može pokazati hemolizu na krvnom agaru.
Biohemijska svojstva .
E. coli ima visoku enzimsku aktivnost. Katalaza-pozitivna i oksidaza-negativna. Voges-Proskauerova reakcija je negativna. Oni razlažu šećere (glukozu, laktozu, manitol, arabinozu, saharozu, itd.) do kiseline i gasa. Razgradnja laktoze na kiselinu i plin je odlika Escherichia od ostalih enterobakterija. Reduciraju nitrate u nitrite, formiraju indol, amonijak, ne proizvode sumporovodik, ne ukapljuju želatinu.
Antigenska struktura .
Antigenska struktura je složena. Postoje O-, H-, K- (L, B, A), M-antigeni, fimbrijalni, ribosomalni i mnogi drugi antigeni. U seroididentifikaciji su od najveće važnosti O-, H-, K- antigeni.
* O - somatski antigen, lipopolisaharid ćelijskog zida, termostabilan, otporan na alkohol, grupa (≥171 serogrupa).
* H - flagelarni antigen, protein flagelina, tipičan (više od 57 serotipova).
* K - kapsularni antigen, kiseli polisaharid, takođe tipičan (više od 97 serotipova). K-antigen nije homogen - ovisno o otpornosti na temperaturu razlikuju se 3 njegove varijante:
L - termolabilni antigen (uništava kada se zagreje na 600C);
A - termostabilan (izdrži 2-3 sata ključanja);
B - srednji u smislu termolabilnosti između A i L (izdrži zagrijavanje do 60C tokom jednog sata, ali se uništava ključanjem).
Serovari ešerihije su označeni sa naznakom antigenske formule: O26: K60: H2 ...
faktori patogenosti.
1. Toksini:
* endotoksin - ima pirogeno i toksično (smanjenje krvnog pritiska, neurotoksičnost) dejstvo na ljudski organizam, inhibira fagocitozu;
* egzotoksini formiraju neke sojeve Escherichia coli:
Enterotokoža (ETKP);
Citotoksin s hemolitičkim i nekrotskim djelovanjem (EICP, EHEC).
2. Strukturne i hemijske komponente ćelije:
* pio I (adhezija) i II (konjugacija) vrste;
* kapsula i T-protein ćelijskog zida (adhezija, supresija fagocitoze);
* plazmidi (Col-, R-, F-, Hly-, Ent-plazmidi, kao i plazmidi koji kodiraju sintezu faktora adhezije pronađeni su u E. coli).
otpor.
E. coli dobro preživljavaju u vanjskom okruženju, ostaju u zemljištu i vodi nekoliko mjeseci. Na 56C umiru u roku od 1 sata, zagrijavanje na 60C ne može izdržati više od 15-20 minuta, a umiru odmah kada se prokuhaju. Osetljiv na dezinfekciona sredstva i antibiotike.
Ekologija i uloga u patologiji.
Razlikujte oportunističku i dijarejuE. Witholi.
Uslovno patogene E. coli dio su crijevne mikroflore ljudi, sisara, ptica, gmizavaca i riba. Sa izmetom, E. coli se izlučuje u okolinu. E. coli je sanitarni indikativni mikroorganizam, njegovo otkrivanje ukazuje na svježu fekalnu kontaminaciju objekata okoliša.
Uslovno patogena E. coli izaziva endogene gnojno-upalne procese različite lokalizacije (infekcije mokraćnih puteva, supuracija rana, holecistitis, apendicitis, peritonitis, konjuktivitis, otitis, upala pluća, meningitis...) do sepse, češće na pozadini IDS-a .
Dijareogena E. coli su uzročnici egzogenih infekcija - ešerihioza (akutne crijevne bolesti, koje se javljaju kao enteritis i enterokolitis) i trovanja hranom.
Epidemiologija
.
Bolesti uzrokovane
E. coli, sveprisutna.
Izvor infekcije : pacijenti i nosioci bakterija.
Mehanizam prijenosa : fekalno-oralni (načini: hrana, kontaktno-kućni i rjeđe voda).
Patogeneza i kliničke manifestacije .
Dijaregeni serovari Escherichia coli dijele se u 5 grupa:
* Enteropatogena (EPKP);
* Enterotoksigen (ETCP);
* Enteroinvazivni (EICP);
* Enterohemoragični (EGKP);
* Enteroadheziv (EACP).
Pored navedenog, izolovane su difuzno adherentne Escherichia coli (još nisu dovoljno proučene).
Morfološki, predstavnici različitih grupa se međusobno ne razlikuju.; oni se razlikuju po antigenski struktura i faktori patogenosti.
EPKD - uzrokuje ešerihiozu kod djece mlađe od 1 godine (češće kod djece koja se hrane na flašicu). Patogeni utječu na epitel tankog crijeva: adsorbirajući se na površini enterocita zbog proteina vanjske membrane (intimin), ovdje se razmnožavaju i oštećuju mikroresice, uzrokujući njihovo odbacivanje. Upalna reakcija koja se razvija u ovom slučaju posljedica je djelovanja endotokože koja se oslobađa prilikom uništavanja Escherichia coli. Glavne kliničke manifestacije: dijareja, povraćanje, regurgitacija hrane, znaci dehidracije, pothranjenost. Tok bolesti je težak i može trajati nedeljama.
ETEC uzrokuje bolesti nalik koleri kod djece i odraslih. Uz pomoć pilija vežu se za epitel donjih dijelova tankog crijeva, razmnožavaju se zbog CF (kolonizacijski faktor) i proizvode 2 vrste toksina: LT (termolabilan, sličan po mehanizmu djelovanja egzotoksinu Vibrio cholerae) i ST (termostabilan). LT i ST povećavaju sadržaj cAMP i cGMP u epitelnim stanicama, što uzrokuje kršenje transporta molekularnog željeza i pojačano oslobađanje vode iz stanica. To narušava ravnotežu vode i soli u crijevima i dovodi do razvoja vodene dijareje. Bolest po svojoj prirodi podsjeća na blagi oblik kolere (u literaturi se često naziva putnički proljev).
EIEC uzrokuje bolest nalik dizenteriji kod djece i odraslih. Adsorbuju se na ćelije epitela donjih delova debelog creva, prodiru u ćelije, razmnožavaju se, luče toksin sličan šigeli i uništavaju ćelije. Šireći se kroz međućelijske prostore, utiču na susjedne ćelije, stvarajući čireve. Klinički simptomi: prvo - vodenasti proljev, a zatim se u stolici pojavljuje primjesa sluzi i krvi.
EHEC je uzročnik hemoragične dijareje i hemolitičko-uremičkog sindroma, koji pogađa uglavnom djecu. Patogeni luče citotoksin sličan Shigelu koji uzrokuje destrukciju vaskularnog endotela (blokira sintezu proteina na ribosomima) crijeva i bubrega, što rezultira ishemijom i nekrozom stanica. Klinički uočeni hemoragični kolitis (krvavi proljev) i hemolitičko-uremijski sindrom (hemolitička anemija i zatajenje bubrega), koji su teški i često fatalni.
EACP (opisan 1985.) su u stanju da se brzo vežu na površinu ćelija i koloniziraju različite dijelove crijeva, ali češće pogađaju debelo crijevo. Ne stvaraju citotoksine, ne prodiru u ćelije. Klinički, bolest je karakterizirana perzistentnim dijarejnim sindromom.
Imunitet .
Nakon prijenosa ešerihioze formira se humoralni tip-specifični imunitet, uočava se razvoj lokalnog imuniteta (SIgA). Formirajuća antitijela nemaju zaštitna svojstva.
Kod djece prve godine života pasivni transplacentarni imunitet obezbjeđuju antitijela koja prolaze kroz placentu i antitijela koja dolaze s majčinim mlijekom. Ženskim mlijekom se prenose i mukopolisaharidi koji doprinose razmnožavanju lakto- i bifidobakterija - antagonista uzročnika ešerihioze.
Mikrobiološka dijagnostika .
Materijal koji se proučava: kod crijevne ešerihioze - izmet, povraćanje, kod dojenčadi bris iz grla, kod endogene infekcije - materijal iz odgovarajućeg žarišta (urin, iscjedak iz rane, krv...).
1. Bakterioskopska metoda.
2. Bakteriološka metoda (osnovna) - izolacija čiste kulture patogena, njena identifikacija, određivanje osjetljivosti na antibiotike.
3. Serološka metoda:
* RA sa poli-(OB) i monovalentnim aglutinirajućim serumima Escherichia;
4. Molekularno biološka metoda (PCR, DNK sonde).
Specifična profilaksa nije razvijena .
Nespecifična profilaksa : rana dijagnoza, izolacija pacijenata, redovni preventivni pregledi zaposlenih u dečijim ustanovama i zdravstvenim ustanovama. Od velikog značaja je striktno poštovanje sanitarno-epidemiološkog režima u ovim ustanovama.
Principi terapije : dijeta, CTP (nitrofurani, fluorokinoloni), sa generalizovanim oblicima - antibiotici, uzimajući u obzir osetljivost, specifično lečenje - koli-bakteriofag, probiotici koji sadrže lakto- i bifid.
61. Patogene ešerihije (uzročnici ešerihije): sistematika, morfologija, kulturološka i tinktorijalna svojstva, biohemijske karakteristike, antigena struktura i formiranje toksina, patogeneza i klinika. Dijareogena ešerihija, njihova diferencijacija od uslovno patogenih. Mikrobiološka dijagnostika. Prevencija i liječenje.
Rod Escherichia.
Ešerihije su najčešće aerobne crijevne bakterije koje pod određenim uvjetima mogu uzrokovati široku grupu bolesti čovjeka, kako crijevne (proljev) tako i ekstraintestinalne (bakteremije, infekcije mokraćnih puteva itd.) lokalizacije. Glavna vrsta - E. coli (E. coli) - najčešći uzročnik zaraznih bolesti uzrokovanih enterobakterijama. Ovaj patogen je pokazatelj fekalne kontaminacije, posebno vode. If - titar i if - indeks su se često koristili kao sanitarni indikatori. Ešerihije su dio mikroflore debelog crijeva sisara, ptica, gmizavaca i riba.
kulturna dobra. Na tečnim podlogama E. coli daje difuzno zamućenje, na gustim medijima formira S- i R-oblike kolonija. Na podlozi Endo za Escherichia, Escherichia coli koja fermentira laktozom formira intenzivno crvene kolonije metalnog sjaja, nefermentirajuće - blijedoružičaste ili bezbojne kolonije sa tamnijim središtem, na Ploskirevovoj podlozi - crvene sa žućkastim nijansama, na Levinovom mediju - tamne. plava sa metalnim sjajem.
biohemijska svojstva. Escherichia coli u većini slučajeva fermentira ugljikohidrate (glukozu, laktozu, manitol, arabinozu, galaktozu itd.) sa stvaranjem kiseline i plina, stvara indol, ali ne stvara sumporovodik i ne razrjeđuje želatinu.
Antigenska struktura. Nisu pronađene značajne morfološke razlike između patogene i nepatogene Escherichia coli. Njihova diferencijacija zasniva se na proučavanju antigenskih svojstava. Među površinskim antigenima razlikuju se polisaharidni O-antigeni, flagelarni H-antigeni i kapsularni polisaharidni K-antigeni. Poznato je više od 170 varijanti O-antigena (ovo odgovara patogenu koji pripada određenoj serogrupi) i 57 H-antigena (koji pripadaju serovaru). Sastav dijareagene (uzrokuje dijareju) Escherichia coli uključuje 43 O-grupe i 57 OH-varijanti.
Glavni faktori patogenosti dijareje E.coli.
1. Faktori adhezije, kolonizacije i invazije povezani sa pili, fimbrijalnim strukturama, proteinima vanjske membrane. Oni su kodirani plazmidnim genima i potiču kolonizaciju donjeg dijela tankog crijeva.
2. Egzotoksini: citotonini (stimulišu hipersekreciju tečnosti crevnim ćelijama, remete metabolizam vode i soli i doprinose razvoju dijareje) i enterocitotoksini (deluju na ćelije crevnog zida i kapilarnog endotela).
3. Endotoksin (lipopolisaharid).
U zavisnosti od prisustva različitih faktora patogenosti, dijareagen Escherichia coli dijele se na pet glavnih tipova: enterotoksigena, enteroinvazivna, enteropatogena, enterohemoragična, enteroadhezivna.
4. Patogenu E. coli karakteriše proizvodnja bakteriocina (kolicina).
Enterotoksigene E. coli imaju termolabilni toksin visoke molekularne težine, sličan po djelovanju koleri, uzrokuju dijareju nalik koleri (gastroenteritis kod male djece, putnički proljev, itd.).
Enteroinvazivne Escherichia coli mogu prodrijeti i razmnožavati se u stanicama crijevnog epitela. Izazivaju obilnu dijareju s primjesom krvi i velikim brojem leukocita (indikator invazivnog procesa) u stolici. Klinički podsjeća na dizenteriju. Sojevi imaju neke sličnosti sa Shigella (nepokretni, ne fermentiraju laktozu, imaju visoka enteroinvazivna svojstva).
Enteropatogena E. coli glavni su uzročnici dijareje kod djece. U srcu lezija je adhezija bakterija na crijevni epitel s oštećenjem mikroresica. Karakterizira ga vodenasta dijareja i teška dehidracija.
Enterohemoragična Escherichia coli uzrokuje dijareju pomiješanu s krvlju (hemoragični kolitis), hemolitičko-uremijski sindrom (hemolitička anemija u kombinaciji sa zatajenjem bubrega). Najčešći serotip enterohemoragične Escherichia coli je O157:H7.
Enteroadhezivne E. coli ne proizvode citotoksine i slabo su shvaćene.
Epidemiologija. Glavni mehanizam širenja dijareje E. coli je fekalno-oralni. Infekcija se može dogoditi putem hrane, vode, tokom brige o životinjama. Budući da Escherichia živi u crijevima mnogih životinjskih vrsta, teško je odrediti konkretan izvor infekcije. Kontaktni put infekcije može biti u zatvorenim ustanovama. Enteropatogena i enteroinvazivna E. coli najčešći su uzročnici bolničkih izbijanja ešerihioze.
Laboratorijska dijagnostika. Glavni pristup je izolacija čiste kulture na diferencijalnoj dijagnostičkoj podlozi i njena identifikacija prema antigenskim svojstvima. Stavili su RA sa setom polivalentnih OK (na O- i K-antigene) seruma, zatim adsorbovali O-serume i kulture zagrejane na 100 stepeni Celzijusa (da bi se uništili K-antigeni).
Biohemijska diferencijacija ima dodatni značaj. Identifikacija dijareagenskih tipova moguća je identifikacijom specifičnih markera (enterohemoragična Escherichia coli ne fermentira sorbitol, a serovar O157:H7 ne pokazuje aktivnost beta-glukuronidaze).